A denaturálást, sózás és a csapadék a fehérjék
A fehérjék izolálására az oldatból vagy osztott fehérjéket a fizikai-kémiai tulajdonságok egy olyan faktor vagy mindkettő eltávolításához elegendő biztosítva ezek oldékonysága - töltés és hidratációs héj.
Fehérjék lehet távolítani az oldatból
Mivel a fehérjék oldhatóságára függ tőlük, a eltűnése az egyik vagy mindkét ilyen tényezők vezet teljes vagy részleges a fehérje kicsapódását, és természetesen, hogy a veszteség a funkcióját. Néhány lerakódás módszerek lehetővé teszik, hogy a későbbiekben helyreállítani a természetes tulajdonságait és teljesítményét fehérjéket.
A reverzibilitást fehérje kicsapódását okozza megtartása elsődleges szerkezete a fehérje. Helyreállítása fizikai, kémiai és biológiai tulajdonságai a nevezett fehérje renativatsiya (renaturálás). Néha renativatsii egyszerűen távolítsa károsító szert.
, fehérjedenaturációja
A denaturálás - irreverzíbilis fehérjekicsapássai miatt a törés a kötvények, hogy stabilizálják a kvaterner. tercier. Protein másodlagos szerkezet, majd egy változás oldhatósága. viszkozitás, kémiai aktivitást, csökkentése vagy teljes a biológiai funkció elvesztése.
A fizikai denaturálási
Növekedést okoz a hőmérséklet, az ultraibolya és a mikrohullámú sugárzás, mechanikai hatással, ionizációs töltött részecskék.
kémiai denaturálási
Attól függ, hogy a természet a denaturáló szer:
- savak és bázisok hidrogénkötéseket képeznek peptid csoportokat;
- szerves oldószerek hidrogénkötések és oka kiszáradás;
- alkaloidok kötést alkothatnak poláris csoportokat, és könnyezést rendszer hidrogén és ionos kötések;
- nehézfémek kölcsönhatásba töltésű gyökök, semlegesített negatív töltések és fékrendszer hidrogén és ionos kötések.
A kémiai denaturálási hatásának alapja egy kicsit idősebb, de egyszerű és intuitív timol teszt és Veltman mintában. A klinikai és laboratóriumi diagnosztika értékelésére állapotát fehérje anyagcserét.
sózás
A kisózási - a mellett a fehérje oldatot semleges sók (Na 2SO 4 (NH4) 2SO 4.). kisózási mechanizmus tartalmaz reagens anionokat (SO4 2-) és a kationok (Na +, NH4 +) a felelős a fehérje (csoport NH4 + és COO -). Ennek eredményeként a töltés eltűnik, és ennek megfelelően a kölcsönös taszítása molekulák eltűnik. Ugyanakkor jelentősen csökkentette hidrátburok. Mindez azt eredményezi, hogy „blokkoló” molekulák és a lerakódás.
Mivel a vér plazmaproteinek különböznek méret, töltés, szerkezet, lehetőség van, hogy vegye fel az ilyen mennyiségű sót, amelynek hatására csapadék kevésbé stabil fehérjék, míg mások még megszűnik.
Például, korábban a diagnosztikai célokra, mint aránya határozza meg a fehérje frakciók, albumin / globulin a vérplazmában. Albumin, kevésbé poláris molekulák maradnak oldatban 50% telítettség oldat semleges sók, mivel a globulinok ilyen körülmények között kicsapódott. Általában az arány a plazma albumin / globulin egyenlő 1,2-1,8.
A lerakódása egy dehidratálószer
Hozzáadásakor dehidratálószerek (aceton, etanol) fordul elő kilépését a hidratációs héj a fehérje, de nem számít fel. Oldékonyság valamelyest csökken, de a denaturálási nem fordul elő. Például, ez a antiszeptikus hatása etanolt.
A pH-változás
Puha változó a pH-t az izoelektromos pontra a protein megszűnéséhez vezet a töltés, egyidejű csökkentése a hidrát héj és ebből eredően csökkenti a molekula oldhatóságát és.