A tumorok immunológiája
Az autoimmun betegség patológiás folyamat, amelyben az autoantitest és / vagy a sejtes autoimmun válasz kórokozója fontos szerepet játszik.
A jeleket, amelyek szerint ez vagy az a betegség autoimmunnak minősíthető, L. Vitebsky (1961) megfogalmazta.
1. Az autoantitestek vagy a citotoxikus T-limfociták jelenléte a betegséghez kapcsolódó antigénnel szemben.
2. Az autoantigén azonosítása, amelyhez az immunválasz irányul.
3. Autoimmun folyamat átadása szérummal, amely antitesteket vagy citotoxikus T-limfocitákat tartalmaz.
4. Képesség hogy hozzon létre egy saját antigén beadásával egy kísérleti betegség modellben a fejlesztési megfelelő morfológiai rendellenességek jellemző a betegségre.
C-reaktív protein - az egyik az akut-fázisú gyulladásos fehérjék tartalmazott a szérumban kötődik, és tok-poliszacharidot (C-poliszacharid) Streptococcus pneumoniae. A legtöbb esetben minél magasabb az ESR, annál magasabb a C-reaktív fehérje szintje. A következő kivételekkel: 1) szintje C-reaktív protein gyorsan emelkedik, még azután is, egy kis aszeptikus szöveti károsodás, vérsüllyedés, azonban normális marad, 2), vérsejtsüllyedés növekszik, és a szint a C-reaktív protein nem változtatja meg, bizonyos vírusfertőzések, súlyos mérgezést, néhány formája krónikus ízületi gyulladás. Ezekben az esetekben a C-reaktív fehérje szintje kevésbé informatív, mint az ESR. Néha mérjük a C-reaktív fehérje szintjét a reuma aktivitásának felmérésére. Mivel a C-reaktív fehérje szintje drasztikusan változhat a nap folyamán, ezt dinamikában kell meghatározni.
A reumás faktor az IgG autoantitest IgM az Fc fragmenshez. A szérumban a reumatoid faktor rendszerint IgG komplex formájában jelen van.
2. Az észlelési módszerek. Az IgG-vel bevont bármely részecskék agglutinálhatók reumás faktorral. Kezdetben, a kimutatására reumatoid faktor használt antitesttel bevont birka vörösvértestek vagy humán eritrociták csoportja 0. Ezután ezeket helyébe a latexrészecskék és bentonit, amely növelte az a módszer érzékenysége (lásd. Ábra. 15.1). A közelmúltban számos laboratórium pontosabb módszert alkalmaz a nefelometriai reumatoid faktor meghatározására (lásd 20. fejezet, IG bekezdés). A reumatoid faktor nefelometrikus meghatározása során a szérum zavarosságának növekedését az IgG hozzáadását követően értékeljük. A rheumatoid faktor meghatározására szérumot legfeljebb -20 ° C hőmérsékleten tároljuk.
3. Diagnosztikai jelentőség. Alacsony titerben (legfeljebb 1:80) a reumatoid faktort a 60 évnél fiatalabb, illetve 30% - több mint 80 éves egészséges betegek 5% -ánál észlelték. Több, mint 75% a rheumatoid arthritisben szenvedő betegek a reumatoid faktor titerei latex agglutinációs reakció meghaladja 1:80. Magas titer esetén reumatoid faktort észleltek súlyos progresszív rheumatoid arthritisben szenvedő betegeknél. Ez általában megfigyelhető ízületen kívüli megjelenési formáiban a betegség, mint például reumatoid csomók, szisztémás vasculitis, Sjögren-szindróma. Sjogren-szindrómával a reumatoid faktort a legmagasabb titer határozza meg. A reumatoid faktor a szérumban általában 3-6 hónap múlva megjelenik a rheumatoid arthritis kezdetén. A szeropozitív betegek (a betegeknél, akiknél a szérum rheumatoid faktor észlelhető) során elengedése reumatoid faktor titer jelentősen csökken, bár általában nem normalizálódott. Rheumatoid faktor nem specifikus rheumatoid arthritis és más autoimmun detektáltuk magukban foglaló betegségek ízületi betegség, fertőző endocarditis, bizonyos krónikus májbetegségek és akut interstitialis pneumonitis (lásd. Táblázat. 15.1).
4. Egyéb immunglobulinok elleni autoantitestek. A latex agglutinációs reakció és a nephelometriával elsősorban az IgM IgG-t detektálják. Néhány beteg esetében ezek az ellenanyagok egy monomer molekula. Ezenkívül IgG és IgA-IgG is kimutatható a rheumatoid arthritisben szenvedő betegek szérumában (különösen szisztémás vasculitis kíséretében). Az IgG Fab fragmensének antitestjei is vannak, de a betegség patogenezisében betöltött szerepük nem bizonyított. Jelenleg a reumatoid faktorhoz nem kapcsolódó IgG autoantitestek vizsgálatát csak tudományos célokra végzik.
5. A rheumatoid faktor szerepe a rheumatoid arthritis patogenezisében. Az érintett ízületek szinoviális folyadékában reumatoid faktorral rendelkező immun-komplexek jelenléte azt sugallja, hogy a rheumatoid faktor szerepet játszik a rheumatoid arthritis gyulladásának kialakulásában. Azonban nincsenek olyan tények, amelyek megerősítik ezt a feltevést. Bizonyos esetekben a reumatoid faktort csak a szinoviális folyadékban definiálják, de a szérum hiányzik. A rheumatoid faktor észlelése az érintett ízületek szinoviális folyadékában megerősíti a szeronegatív reumatoid artritisz diagnózisát.
D. Antinukleáris antitestek
a. Definíció. A LE sejtek (L upus E rythematosus sejtek - lupus sejtek) neutrofilek vagy monociták, amelyek nagy homogén bazofil zárványokat tartalmaznak. Ezek a zárványok az antinukleáris antitestekkel bevont, megszakított sejtek fagocitizált magjai. A LE sejteket a pleurális, perikardiális, peritoneális effúzióban, a szinoviális folyadékban és a CSF-ben szenvedő betegeknél észlelték. Ezeket a sejteket in vitro lehet beszerezni a beteg szérumának hozzáadásával az egészséges személy leukocitáinak és a megsemmisített sejtek magjának. Az 1948-ban kifejlesztett SLE diagnózisának első laboratóriumi módszere a LE-sejtek meghatározásán alapul.
b. Diagnosztikai jelentőség. Azonosítása LE-sejtek - elég időigényes és érzékeny módszer a laboratóriumi diagnózis az SLE, így most a legtöbb laboratóriumban a diagnózis ezt és más autoimmun betegségek egy egyszerű, olcsó és reprodukálható módszerek, a meghatározás alapján az antinukleáris antitestek.
2. Antinukleáris antitestek meghatározása immunfluoreszcenciával
a. Definíció. Az antinukleáris antitestek olyan antitestek, amelyek a sejtmag egyes struktúráihoz kötődnek. Leggyakrabban indirekt immunfluoreszcenciát alkalmaznak antinukleáris antitestek meghatározására.
b. Kimutatási módszerek. Amint a sejt alkalmazott szubsztrátum a fagyasztott metszeteket, például nyelőcső majom, patkány máj vagy készült készítmények a sejtszuszpenziót nagy magok, mint például a humán sejtvonal HEp-2. Az antinukleáris antitestek meghatározását az alábbiak szerint végezzük: 1) a sejt szubsztrátumot inkubáljuk a tesztszérummal; 2) mossa le a nem kötött tejsavóproteineket; 3) inkubálják fluoresceinnel jelölt antitestek jelenlétében humán immunglobulinokkal, majd újra mossák; 4) fluoreszcens mikroszkóppal vizsgáljuk. A tesztszérumban található nukleinsav elleni antitestek kötődnek a sejt szubsztrátjához, majd - immunglobulinokkal jelzett antitestekkel. Ha a szérum nem tartalmaz antinukleáris antitesteket, akkor a sejtes szubsztrátumhoz hozzáadott jelzett antitesteket a mosás során eltávolítják (lásd a 15.2. Ábrát). Az antinukleáris antitestek titerének meghatározásához a vizsgálatot a vizsgálati szérum soros hígításával végezzük. Mindegyik laboratórium maga határozza meg az antinukleáris antitestek normál titerét, mivel ezek függnek a sejt szubsztrát típusától és a rögzítés módjától. A legtöbb esetben, a kimutatására antinukleáris antitestek használunk kultúra humán HEp-2 sejtek (sejtek gégerák) tartalmazó számos nukleáris antigének: Ro / SS-A, proliferáló sejtmag antigén és centroméra antigének. A címkézett antitestek különböző immunglobulin-osztályokba történő alkalmazása azt mutatta, hogy a legtöbb antinukleáris antitest IgG.
a. Diagnosztikai jelentőség. Az elsődleges cél a tanulmány antinukleáris antitestek - kizárják SLE, mivel ez a betegség antinukleáris antitestek előfordulnak szérumában betegek 95% -a 3 hónapon belül megszűnt. Az antinukleáris antitesteket nemcsak az SLE, akkor lehet kimutatni az idősek fordulnak elő az alkalmazás bizonyos gyógyszerek, valamint bizonyos arthritis (lásd. Táblázat. 15.2). Ha a titere antinukleáris antitest felmerült, szükséges meghatározni, hogy melyik antigén ők irányítják (lásd. Táblázat. 15,3), mivel a különböző autoimmun betegségek detektáljuk antinukleáris antitestek különböző specifitású (lásd. Ch. 15, p. II.D.). Az antinukleáris antitestek titere nem teszi lehetővé a betegség aktivitásának és a kezelés hatékonyságának megítélését.
1) A festés típusa (a fluoreszcens címke eloszlása a sejtekben) különböző betegségek esetén nem azonos, és meghatározza az antinukleáris antitestek további kutatásának irányát. A tesztszérum különféle specifikus antinukleáris antitesteket tartalmazhat, azonban a festés típusát azon antitestek határozzák meg, amelyek a legnagyobb titerben vannak jelen.
a) Diffúz festéssel (egyenletes eloszlását tag) a legkevésbé specifikus, és fordul elő a leggyakrabban SLE, kábítószer-lupus szindróma és más autoimmun betegségek, valamint az idősek (lásd. táblázat. 15.2). A sejtek diffúz festése esetén a reakciót megismételjük a teszt szérum nagy hígításával. Ha a festés típusa megegyezik, akkor valószínűleg az antigén, amely ellen az antinukleáris antitestek irányulnak, dezoxiribonukleoprotein.
b) Perifériás festés figyelhető meg, ha a DNS-ellenanyagok dominálnak a tesztszérumban (lásd 15. fejezet, II.D.1. Ez a fajta festés gyakori a lupus nephritisben.
c) Pettyes által okozott elszíneződés elleni antitestek extrahálható nukleáris antigén (lásd. Ch. 15, p. II.D.2) és tipikusan megfigyelt szisztémás scleroderma, kevert kötőszöveti betegség, Sjögren-szindróma, lupus szindróma gyógyszer.
g) nukleoláris festéssel (címke elosztási területén nucleolusok) által okozott antitestek ribonukleoprotein (lásd. Ch. 15, p. II.D.2). Ez a fajta festés jellemző szisztémás szklerózis, ritkán található más autoimmun betegségek.
E. Az antinukleáris és más autoantitestek specificitásának vizsgálata
1. DNS elleni antitestek
b. Diagnosztikai jelentőség. Az antitestek a dsDNS jellemző a lupus nephritis és más súlyos megnyilvánulásai SLE. Soros antitestek meghatározására DNS-t alkalmazzuk, hogy értékelje a kezelés hatékonyságát a betegség. Noha a antitestek DNS kevésbé érzékeny, mint a meghatározását antinukleáris antitestek immunfluoreszcenciával, ez a következő előnyökkel jár: 1) egy antitest, hogy dsDNS több specifikus SLE, mint más antinukleáris antitestek; 2) a szint ezen antitestek tudja mérni a kockázatot és súlyossága a lupus nephritis (a titer növelése elleni ellenanyagok DNS növeli a kockázatát és súlyosságát a lupus nephritis). Vegye figyelembe, hogy a kereskedelmi DNS készítmények tartalmazhatnak nem csak két-, hanem a molekulák egyszálú, és ellenanyagok az egyszálú DNS detektálható a szisztémás szklerózis, reumás ízületi gyulladás, dermatomyositis, krónikus aktív májgyulladás, a gyógyszer lupus szindróma, okozta prokainamid. hidralazinnal. izoniazid. trimetadion. metildopa és fenotiazinok. Az egyszálú DNS-keverék kromatográfiával távolítható el. Ha kétség merül fel az a tanulmány eredményeit, szükség van, hogy ellenőrizze a tisztaságát DNS-készítmény.
a. Szerepe az autoimmun betegségek patogenezisében. DNS-antitestek találhatóak a vesékben (immunkomplexek formájában) és az SLE-ben szenvedő betegek szérumában. Mivel ezek az ellenanyagok kötik és aktiválják a komplementet, segítenek a sejtek elpusztításában és neutrofilek és makrofágok aktiválásában.