L-1-23 eimeria tenella törzs (kokcidiózis okozója) vakcinák, diagnosztikumok és 1

A61K39 / 012 - Coccidia antigének

A RU 2312890 szabadalom tulajdonosai:

Orosz Mezőgazdasági Tudományos Akadémia Állami Tudományos Intézet All-Orosz Tudományos Kutatási Állat-egészségügyi Kutatóintézet (GNU VNIIVIP Rosselkhozakademii) (RU)

A találmány tárgyát állat-egészségügyi parazitológia és biotechnológia képezi. Törzs L-1-23 Eimeria tenella letétbe a gyűjtemény az All-orosz Research Állategészségügyi Intézet Baromfi Orosz Mezőgazdasági Akadémia szám alatt EC №1. A törzset a beteg ből izolált csirke, csirke fertőzött egy törzsének oociszta L-1 Eimeria tenella. A törzs csak a csirkék számára specifikus, a parazita teljesen kifejlődési cikluson eshet át csirke embriókban is. A törzs az immunbiológiai tulajdonságokkal, amelyek lehetővé teszik annak használatát kísérleti kutatás, és annak érdekében, hogy egy immunogén és antigén-hatású anyagot használt diagnosztizálására és megelőzésére az adott betegség. 2 lap.

A találmány tárgya a biotechnológia és a Veterinary Parasitology, és különösen, hogy a termelés a diagnosztika és a coccidiosis elleni vakcina csirkék által okozott Eimeria tenella (E. tenella), és is használható kutatási célokra.

Az E. tenella által okozott kokcidiózis minden országban elterjedt, és jelentős gazdasági károkat okoz az ipari baromfi számára.

Számos kutatóközpont magában foglalja mind a parazitát, mind a madarak által okozott betegséget. A tudományos kutatás fő célja a betegség diagnózisának, kémiai és specifikus megelőzésének eszközeinek és módszereinek létrehozása.

Egyik fontos módszere elleni küzdelem kokcidiózis csirke specifikus immun. Vakcina előállítása és felhasználása A technológia olyan, hogy az előállításukhoz használt törzsek kell rendelkeznie magas immunogén aktivitású, a reproduktív, ellenálló a különböző Anticoccidial Drugs (kemoterápia és ionofor antibiotikum).

A vakcinák előállításához használt E. tenella törzsek közül számos ismert [1, 2, 3, 4]. Ezeket a törzseket más országokban izolálják, és kutatási és oltóanyaggyártásban használják. Annak ellenére, hogy a különböző törzsek antigenikus különbségeit eddig nem igazolták, nem zárható ki, hogy léteznek. Ezért szükségessé vált az E. tenella törzs izolálása, amelyet ezekhez a célokhoz lehet használni.

Az itt használt prototípus törzs E. tenella A-1 betegekből izolált ürülék csirkék kokcidiózis baromfik gazdaságok audio Leningrád régióban [5]. Törzs L-1 dózisban 5000 felett oocisztákat rá a fejét következtében a fertőzött fogékony csirkék akut perebolevanie jellegzetes klinikai (depressziós típusú, borzolt tollazat, sápadt kagyló és a nyálkahártyák, szomjúság, étvágytalanság, véres ürülék) és patho-anatómiai jellemzők (a halott madarak megfigyelt erős duzzadás és vérzéses károsodások a nyálkahártya a vak folyamatok a bél). Csirkéknél a fertőzésre való immunitás képződik.

1. táblázat
Az E. tenella L-1 törzs tulajdonságai

Érzékenység a kokcidiosztatikán

Érzékeny az amproliumra, a nikarbazinra, a farmakokidumra, a kemokkuszra, a clinaxaxra és az összes ionofór antibiotikumra

Azonban az L-1 törzs az E. tenella magas virulencia beoltották madarak coccidiosis elleni alapul adagolása szigorúan adagolt mennyiséget oociszták a parazita, és ezért a lehetséges szabálytalanságok a vakcinázási okozhat kitörése coccidiosis immunizált csirkék.

A találmány célja olyan E. tenella vakcina törzs előállítása, amely alacsony immunológiai tulajdonságokkal rendelkező virulencia-fokot tartalmaz, azzal a céllal, hogy képes magas reprodukciós sebességet elérni a csirkékben.

A feladatot az E-1-23 Eimeria tenella törzs biztosítja vakcinák, diagnosztikumok és tudományos kutatások előállítására. Az Eimeria tenella L-1-23 törzsét izoláljuk egy fogékony csirke fertőzésével, egy oocisztával az L-1 Eimeria tenella törzsből.

Az L-1-23 törzset Eimeria tenella a Rosselkhozakademia Egész Oroszország Tudományos Kutató Állat-egészségügyi Intézetének gyűjteményében helyezkedik el az 1. szám alatt.

Az L-1-23 törzs tulajdonságai Eimeria tenella

Rendszeres helyzet. L-1-23 törzs E. tenella az Eimeria nemzetséghez tartozik, az Eimeriidae családba, a Coccidiida rendhez.

Morfológiai jellemzők. Széles, ovális oocisztái 19,0-26,0 μm hosszúságúak, szélessége 16,0-22,0 μm (átlagosan 22,6-18,8 μm).

Biológiai tulajdonságok. A parazita kialakulásának időtartama 130 óra. A parazita endogén fejlődése a betört csirkék belsejében egy vak folyamat.

Virulens tulajdonságok. Ha 15 napos csirkéket fertőztek oocisztákkal, amelyek legfeljebb 2 hónapig tárolódnak, 800 000 oociszták adagonként, a letalitás 50% (LD50).

Immunogén tulajdonságok. A csirkék oocisztákkal történő fertőzése specifikus immunitást (humorális és celluláris) okoz.

Kulturális és biokémiai tulajdonságok. Az L-1-23 törzset E. tenella táptalajon nem termesztik. A csirkék áthaladását fenntartják, ami 72-96 óra elteltével a bélben jellegzetes elváltozásokat okoz az oociszták felszabadulásával, a fertőzést követő 130. órától.

A törzs érzékeny az antikokkidális gyógyszerekre - amprolium, niacarbazin, farmakokin, kemokkusz, clinax - valamennyi ionofor antibiotikumra.

Sajátosságai. Az L-1-23 törzs E. tenella kizárólag a csirkék számára specifikus. A parazita a csirkeembriókban is teljes fejlődés cikluson át tud haladni.

1. példa Az E. coli L-1-23 törzs felhasználása a kokcidia tenyészetének előállítására a csirke kokcidiózis immunokémiai profilaxisára.

Immunizálására alkalmazott szárnyasok speciálisan kiválasztott törzsei coccidia, amelynek gyenge, nagy virulenciájú és immunogenitású dózisokban, amelyek nem okoz klinikai perebolevaniya kokcidiózis. Az ilyen tulajdonságokat az E. tenella L-1-23 törzs birtokolja. Az immunogén anyagot az alábbiak szerint állítjuk elő. 14-napos csirkéket, szabadon coccidiák orálisan törzzsel beoltott A-1-23 E. tenella rasplodki a mátrixból egy adag 2-3000 per 1 fejét. 6-10 nappal a fertőzés után a csirke ürülék gyűjtött az elválasztott oociszták által lebegés telített nátrium-klorid-oldattal. Spórásodását oociszták végezzük 2% -os kálium-dikromát-hőmérséklet és az egér mutatót 26 # x000B1; 2 # x000B0; C hőmérsékleten 3-5 napon. Spórás oocisztával A-1-23 törzs az E. tenella használnak a gyártásához a kultúra coccidia szánt csirkék vakcinálása.

Kultúra coccidia egy homogén keveréket steril szürkés narancssárga színű szennyeződések nélkül, penész, nem szétváló iszap ártalmatlan csirkék. Orális kultúra coccidia okoz szubklinikai perebolevanie csirkék izolálása követ oociszták a környezetbe, ami lehetőséget teremt a természetes reinvazirovaniya fogadó és alkotó, hogy immunitást, amelynek intenzitása az alapján lehet meghatározni ELISA teszt-rendszer, amely a A-1-23 törzset E. tenella.

2. példa A kísérleti körülmények között a készítmények antikokkidális aktivitásának vizsgálata.

Jelenleg a csirkék kokcidiózisának megakadályozásának legfontosabb módja az antikokkidális gyógyszerek alkalmazása. Az első lépés a tanuló a hatékonysági (kokcidiózis-elleni hatást) az újonnan szintetizált gyógyszerek, hogy végezzen kísérleteket intakt fertőzött csirkék coccidia laboratóriumi törzsekből ismert virulens. Ezekhez a törzsekhez az E. tenella L-1-23 törzse.

Az intakt csirkék orálisan fertőzött E. tenella L-1-23 törzs oocisztáival LD50 dózisban és azonnal megkezdődnek a vizsgált gyógyszerek élelmiszerével. A madarak megfigyelései 10 napig tartanak. A kábítószer antikccidiális aktivitásának felmérése érdekében használják a mortalitást / túlélési arányokat és a súlygyarapodást, amelyek az antikoccidiosis index (PKI) meghatározását szolgálják.

2. táblázat
A különböző kokcidiosztatikumok hatékonyságának összehasonlító értékelése, ha a csirket az L-1-23 törzs kokcidjával fertőzték E. tenella

Ebben a kísérletben azt találták, hogy mind a kémiai, mind a nitrobazin kimutatható antikokkidális aktivitást mutat, amikor a csirket az L-1-23 E. tenella törzs kokcidjával fertőzzük.

Így az E. tenella L-1-23 törzsének olyan immunbiológiai tulajdonságai vannak, amelyek lehetővé teszik kísérleti vizsgálatokhoz való alkalmazását, valamint a diagnózis és a betegség specifikus megelőzésére használt antigén és immunogén anyagok előállítását.

1. P. Long. További tanulmányok az Eimeria tenella embrió-adaptált törzsének patogenitására és immunogenitására vonatkozóan. Avian Pathology, 3. kötet, 4. sz., 1975.

2. T. K. Jeffers. Az Eimeria tenella csillapítása a precizitásra való kiválasztás révén. J. Parasitol. 6. kötet, 6. szám, 1975.

3. J. Johnson, W. M. Reid, T. K. Jeffers. A csirkék gyakorlati immunizátuma a kokcidiózissal szemben az Eimeria tenella gyengített törzsével. Baromfi sciense, 57. kötet, 1. kötet, 1979.

4. T. C. Ivore, P. L. Long, M. Kogut és Joyce Johnson. Az Eimeria necatrix és az E. tenella amerikai egyesült államokbeli gyulladása eredetét soros embriójárattal. Avian Diseases, 2. kötet, 3. szám, 1983.

5. TU 10-07-445-87 „Kultúra immunohimioprofilaktiki coccidia kokcidiózis csirke”, melyet a vezető a állat-egészségügyi bizottság a Szovjetunió Állami Agráripari 1987/07/20.

Törzs L-1-23 Eimeria tenella (gyűjtemény All-orosz Research Institute of Veterinary Baromfi, CE №1) a gyártási diagnosztikumok és vakcinák és a kutatás számára.