Enzim aktivitás, meghatározás - vegyész útmutató 21
Az acetilkolin és a kolinészteráz kölcsönhatásának elmélete szerint a korábban javasolt hipotézis alkalmazható [58]. Ennek megfelelően az enzim aktív központjai a szubsztrát és az enzim közötti interakció pillanatában keletkeznek, és az enzimmolekula tercier struktúrájának konformációs átrendeződése következtében a szubsztrátmolekula megközelítésével [59]. Javaslatot tettek. hogy a holidáris elrendezésben a konformáció bizonyos változásait úgy kell kialakítani, hogy az acetil-kolinnal vagy más kolinerg anyaggal kombinálható legyen. [C.98]
Számos tényező van a versenyképesség gátlásában. Így az aktivitási élesztő szacharáz gátolja fruktóz, a tevékenység a xantin-oxidáz - .. adenin, stb Ezek a tények azt mutatják, nem csak a kialakulását enzim-szubsztrát vegyületek, hanem annak bizonyítására, hogy a szubsztrátum van erősítve csak bizonyos meghatározott csoportok az enzim. Ugyanakkor a versenyképes gátlás az enzim-szubsztrátum vegyület természetének rendkívüli specificitására utal. [C.261]
Annak ellenére, hogy ezek a komplikációk, általános következtetés az, hogy a észterek hidrolízisét (és hasonló szubsztrátok) végezzük enzimek mechanizmus, amelyben a kombinált nukleofil és elektrofil csoportokat található egy bizonyos módon az aktív centrum az enzim-molekula, [c.324 ]
A belső szekréció különböző mirigyei közötti komplex kapcsolatok. szabályozza a szénhidrát anyagcserét. még nem tisztázott. Ismeretes, hogy egy normál egyensúly a szintézisét és hasítását a szénhidrát szükséges titkok pajzsmirigy (tiroxin), hasnyálmirigy (inzulin) és a mellékvese kéregben. Korábban Corey és Corey kimutatták, hogy a mellékvesekéreg extraktuma, valamint az agyalapi mirigy bizonyos frakciói retardáló hatást gyakorolhatnak a hexokináz aktivitására. az izomenzim, amely szabályozza a glükóz reverzibilis foszforilációját, fontos szerepet játszik a glükóz az állati testben történő alkalmazásában. Ezt a gátlást inzulinnal távolítják el, bár önmagában az agyalapi mirigy vagy mellékvesék gátló faktorainak hiányában az inzulin nem befolyásolja a hexokináz aktivitását. Az elülső agyalapi mirigy hatása nem függ az adrenocorticotrop hormonnal. mivel inaktív. A mellékvesekéreg oxigénatomjának hormonjai a szakirodalomban, amelyek glikogén aktivitást mutatnak, nem mutatnak retardáló hatást, az amorf frakció aktív. A mellékvesekéreg kivonatának hatása azonban egyszerű, a cukorbetegekből származó állatok kivonatán nyilvánul meg. de nincs jelen a normál állatok izomkivonataival végzett kísérletekben, hacsak az anterior hypophysis kivonat aktív frakcióját nem adjuk hozzájuk. [C.448]
Az iszkémiás myocarditis patogenezisében bizonyos szerepet játszik a xantin-oxidáz enzimrendszere. Abban a vizsgálatban, több mint 103 különböző flavonoidok legaktívabb gátlására ez az enzim megjelentek 6- és 8-szubsztituált fiavonok ingyenes 5- és 7-hidroxilcsoportok a Labiatae család növények) 180]. [C.137]
Vizsgálataink során a különböző enzimrendszerek aktivitásának arányát kémiai anyagok hatása alapján vizsgáltuk az enzimrendszerekre való hivatkozással. egy bizonyos anyagcsere-ciklusban. Például egyes mérgek hatására a biogén aminok cseréjében fellépő zavarokat észlelnek. Ezen metabolikus ciklusok enzimaktivitásának vizsgálata során három mio-oxidáz, kataláz és aldehid-dehidrogenáz (xantin-oxidáz) enzimkészletét vizsgálták. A NA Kachurina kísérletei megmutatták annak lehetőségét, hogy a kémiai anyagok káros hatásait a szervezetre cseréljék, egyetlen metabolikus ciklus számos enzimének aktivitásának megváltoztatásával. Az ilyen vizsgálatok néha olyan változásokat mutatnak be, amelyek elhárítják a kísérletezőt az egyes enzimrendszerek aktivitásának tanulmányozása során. [C.242]
A lényeges különbség az enzim és a szokásos heterogén katalizátor abban a tényben rejlik, hogy az első képes a takarmány az aktiválási energiája azok pro-steticheskie csoport még reakciókban kis hőhatás miatt a gyakorlatilag teljes energia-visszanyerésre alkalmazásával protein hordozó kristályos ugyanazon katalizátorok ennek pótlása csak akkor következik be, miután egy bizonyos a Qp minimális értéke (kb. +20 kcal × Hmol), a kristályrácsban észrevehető energiaeloszlás miatt. Feltételezzük, hogy a katalitikus aktivitás növekedése mindkét esetben a reakció aktivációs energiájának egymást követő csökkenésével történik. [C.43]
Kémiai úton minden enzim fehérje, de összefüggésbe hozható nem proteintartalmú anyagokkal (koenzimekkel vagy protéziscsoportokkal), amelyek jelentős hatást gyakorolnak az egész enzimre. Néha az enzimek katalitikusan inaktívak bizonyos fémionok hiányában. Számos bizonyíték van arra, hogy a [c.284] enzim katalitikus aktivitása,
A túlzott oxigénfelesleghez hasonló jelenséget a felesleges fény is okoz. A fotoszintézis sebessége egy bizonyos fény intenzitással növekszik, amely a közvetlen napsugárzáshoz adaptált növényeknek körülbelül 50 000 lux értékű. A további fokozott fotoszintézis fény intenzitása állandóvá válik, úgy tűnik, az a tény, hogy az egyik a fotoszintetikus enzim korlátozott tevékenységet, és ezért képezhet ispo.11zovat, vagy csak egy bizonyos számú köztitermékek. az elsődleges fotokémiai folyamathoz szükséges (vagy átadott) anyag szükséges. A fotoxidációnak nincs ilyen korlátai, és a sebessége tovább folytatódik, miután a fotoszintézis elérte a könnyű telítettséget. Ez magyarázza a fény és a fény fékezési jelenség povrezhdenie- solarization, t. E. A oldódását keményítő levelek maradékok erős fény [15] Ezek a jelenségek már régóta ismeretes, mielőtt kiderült, ezek kapcsolata a fotoszintézis. [C.539]
A hőmérséklet, egyrészt, gyorsítja magát enzimatikus (katalitikus) reakció különösen, mind a három egymást követő szakaszai a keletkezett intermedier komplexet az enzim egy szubsztrát, és annak átalakítása komplex enzimet, - a termék, és végül disotsiatsiyu termék. Másrészt felgyorsítja a denaturációt, azaz az enzimfehérje pusztulását és inaktiválását. Így. a hőmérséklet emelkedése az enzimatikus reakciók során. mint általában a kémiai folyamatokban. a reaktivitás növekszik. az igazi katalitikus aktivitás emelkedik, vagyis a szubsztrátum transzformációjának sebessége. De az enzimek irreverzibilis denaturálással járó fehérjék, és a denaturálás sebessége sokszor gyorsabb a fűtéssel, mint bármely más kémiai átalakulás sebessége. Ezért az ellenkező folyamat (inaktiválás), amely az enzim koncentrációjának csökkenésével társul, a reakció lassulását eredményezi, amikor a hőmérséklet tovább nő. Az enzimatikus hatás érdekében jellemző, hogy a fűtés először növeli a reakciósebességet. és aztán, miután átment egy bizonyos szinten, - gyorsan csökken. Ha ez grafikusan ábrázolódik, akkor a diagramon megfigyelhető egy látszólagos (hamis) hőmérséklet optimum, vagyis bizonyos hőmérsékleten az enzim hatása maximális. A hőmérséklet optimuma a reakciókörülményektől függően változhat. a rendszer összetétele. az enzim eredete. Ismeretes, hogy az enzimek, mint minden más fehérje. különböző hőállóságúak, vagyis nagyon eltérő érzékenységet mutatnak a fűtésre. [C.47]
Annak megállapítására, az erejét antikolinészteráz gyógyszerek hatását, használtuk az értéket / 50, amelyet úgy kapunk, meghatározzuk az enzim aktivitását a minták a korábban kitett 10-12 percig. 38-39 ° C-on, az inhibitor különböző koncentrációival. Meghatározása kolinészteráz aktivitás szerint végezzük az elvet, hogy használt Platte toll és galéria (1928), azzal a különbséggel, hogy az összeg az acetilkolin undefeated után fennmaradó az enzimmel érintkezésbe határoztuk nem pas biológiai objektumot. de fotokolorimetrikusan, a Hestrin módszer szerint (1949). Amint igaz kolinészteráz forrás tehén vért forrásaként használt hamis kolinészteráz - ló szérumot. [C.463]
Tempzratura. Általánosságban elmondható, hogy a reakciósebesség. enzimatikus vagy bármilyen más jellegű. növekszik a hőmérséklet növekedése a Van't Hoff szabály szerint. A reakciósebesség megduplázódik, amikor a hőmérséklet 10 ° -kal emelkedik. Az enzimek nem stabilak emelt telsheraturah elpusztulnak melegítéssel 100 ° a víz jelenlétében, és gyakran gyorsan inaktiválódik feletti hőmérsékleten 60. Azt találtuk, hogy az egyes enzimek esetében megvan a maga optimális hőmérsékletét. ahol a legnagyobb aktivitással rendelkezik. Ezt a hõmérsékletet azonban csak más változó tényezõkkel kapcsolatban határozzák meg. [C.332]
Booker és Haslam [53] módosította a Neubecker és Rechnitz módszert [51], és immobilizált ureázzal ellátott elektródot használt az argináz aktivitásának értékelésére. Meghatározási eljárását a következő volt argináz 1 ml oldatot fecskendeztünk a pufferoldattal (0,1 M Tris-pufferben. PH = 7,5), amely arginint, és ellenőrizni időbeli változása elektródpotenciál ureáz beépült vs SCE. Ha a szögérték (AE / At) vagy az AElAt kezdeti értékeit az enzim vagy szubsztrát koncentrációjától számított 30 másodpercen belül ábrázolja, egyenes vonalakat kapunk. Ez az argináz meghatározásának ez a potenciometriás módszere a spektrofotometriás módszer előnye, annak ellenére, hogy ez utóbbi nagy érzékenységgel rendelkezik. [C.339]
A hidrociánsav teljes disszociációja. amely biztosítja az összes N meghatározását egy elektród segítségével. az oldat pH-ját 12,7-es szinten kell tartani. [71] ismertet egy javított változata az elektróda, azzal jellemezve, hogy a korábban tárgyalt tény, hogy a p-glükozidáz immobilizált poliakrilamid gélen, és biztonságosan rögzítve a szenzor felületét N szelektív elektróddal. A pH> 10 fenntartásához szobahőmérsékleten pufferoldatot (borax + NaOH) adtunk az oldathoz. Kinetikai vizsgálatokban azonban. , amelynél a változás követjük amigdalin kezdeti hidrolízis sebessége [71], az N szelektív elektróddal regisztrált jelenlétében az oldatban N „, és pH = = 6,4, hogy használták, hogy meghatározzák a aktivitásának p-glükozidázt a változó száma N. A aktivitását enzim értékeltük összhangban egyenletek (XI.26) és (XI.27) a kezdeti képződési sebességét N, tükrözi a potenciális változási sebessége. ebben az esetben, amikor egy tízszeres koncentrációjának megváltozását N „potenciális változott 64 mV 37 ° C hőmérsékleten [c.345]
Llenado és Rechnits tanulmányozta az automatizált rendszerek működését, amelyben az enzimaktivitás gyors meghatározása lehetséges [731. A folyamatos automatikus áramlási rendszerek létrehozásának hasznosságát, amelyben a cianidionokra szelektív elektródákat alkalmaztak [vö. A (XI.28.) És (XI.23.) Egyenleteket és a jódot [lásd az A (XI.7.) Egyenletet a p-glükozidáz, a rodán és a glükóz-oxidáz aktivitásának meghatározásával mutatjuk be. [C.346]
Enzim (enzimatikus) aktivitás. Az enzimek vagy enzimek egy adott természetű szerves vegyületek csoportja. amelynek funkciója bizonyos biokémiai reakciók gyorsulása (katalízis). Számos enzimet izolálunk és tisztítjuk elegendő mértékben kristályok előállítására. Minden enzimet tiszta állapotban főzünk ilyen módon. kimutatták, hogy fehérjék, egyszerűek vagy összetettek. [C.69]
Válassza ki a szabványos állapotokat. Amint azt fentebb megállapítottuk, a fehérjék denaturálása és enzimek deaktivátódjanak érték ah. D5 és bizonyos mértékig AH változik az oldat pH. Mivel ezek az értékek függnek a termodinamikai államok reagiruyuits1h standard anyag és az aktivált komplex. akkor ez a tény némileg meglepőnek tűnhet. A nehézség abban rejlik, hogy a kiválasztott szabvány kimondja rendelt változók és hidrogén ion. mivel általában a reakcióelegyben koncentrációt vagy aktivitást mér. A konstans reakciósebesség bármely adott hőmérsékleten és nyomáson valóban állandó, ha az egyenlet a sebesség az összes aktív anyagok, amelyek részt vesznek a közötti egyensúly a kezdeti és aktivált állapotok. [C.427]
Ha a depresszió okozza, hogy a nukleofil centrumok nem vesznek részt egy sor fontos biológiai folyamatokat. amint az (1) egyenlet, az oldószer, vagy a biofaza a hatása kisebb lesz, mivel ez pas látszólag azonos vagy közel azonos minden organizmusban [121]. Enzimrendszerek, biológiailag aktív fehérjék. vagy peptidek (megtámadta reagens V), amelynek nukleofil centrumok (5H. például) a különböző szervezetekben különböznek az összeget és (vagy) karaktert úgy is, hogy bizonyos befolyásolást a toxicitást. Azonban a legfontosabb tényezők, amelyek szabályozzák a toxicitás a reagens HX, jellegétől függ a maradékot, és X-csoportok kapcsolódnak egy szénatom K. esetében meghatározott típusú. mint például a citrusfélék fonalféreg, az első két tényező változatlan marad, és csak az utolsó két hatással toxicitás. Megerősítése ezt vizsgálatakor kapott nagyszámú szerves halogén-származékok és más vegyületek, a talajban és értékelését a hatása nem csak a citrus fonalféreg, hanem gombák és baktériumok [132]. Ez a mechanizmus az új tekintetében fonálférgek, de nem az egyetlen, ha figyelembe vesszük az ügyet fényében számos tanulmány toxicitási szerves halogén-származékok, és más reaktív vegyületek más organizmusok. Úgy gondolják, hogy tiolcsoportok alkilezik. jelenlétében, amely ismert, hogy szükséges az sok enzimrendszerek 13] magyarázza a toxicitása halogénezett savak házilegyek [6], baktericid-vinil-szulfonok [133] hólyaghúzó szerek és lakrimatornye tulajdonságai számos szerves halogén-származékok [7, 44] és a fungicid aktivitást alkilizotiotsianatov [157]. [C.107]
Meghatározások oxidáz aktivitást IAA napraforgó növények termesztett hiányban bór, mangán és cink, azt mutatta, hogy a változások a aktivitása auxin-oxidáz nem csak másodlagos jellegű, de nem specifikusak a bór, mivel a kizárása a mangán és a cink a környezet, mint a bór, Ez eredményezte, hogy csökkent az enzim aktivitása (Krupnikova, 1964). [C.115]
És akkor fejlődne Kémiai Intézetében természetes vegyületek, a Tudományos Akadémia, a Szovjetunió, hagyjuk megfogalmazni elveinek építkezés klóramfenikol molekula, valószínűleg kölcsönhatásba meghatározott csoportjai enzimek, és magyarázza a természet befolyása a kapcsolódó központ csoportok. A kutatás alapján következtetéseket vontak le. hogy az antibakteriális hatást hloramfeni-KO.ua három tényezőtől függ 1) szigorúan meghatározott méretek és konformáció megfelelő aminopronandnolnoy Zepp [c.546]
Diklór-acetil klóramfenikol maradékot közvetlen közelében található az aktív csoportok a molekula, amely betartása specifikus antibiotikum bakteriális enzimek központok ezért acilmaradék nemcsak mutatnak egy bizonyos polarizáló hatást aminopropandiolnuyu lánc, de odnov) Jemen megfelelnek bizonyos geometriai trebovaniyame- 1121.1145 [c.401]
Így. nagy antibiotikus aktivitást kloramfenikol szimultán módon határozzuk meg három tényező 1) szigorúan meghatározott geometriai méreteit, valamint a megfelelő konformáció aminopropandiolnoy tszpi 2) egy erős polarizáló hatását p-nitro-fenil-csoport, a geometriai méretei, amelyek nem létfontosságúak 3) egy erős polarizáló hatás diklór maradékot egyszerre kell felelniük a konkrét geometriai követelmények. A polarizáló hatása p-nitro-fenil-csoport jelentősen befolyásolja az elektronikus jellegét az alifás lánc C1 atom és a kapcsolódó atom a hidroxilcsoport. míg a polarizáló hatás diklóracetil maradékot befolyásolja elsősorban elektronikus természetének a nitrogénatom, és jelentős csökkenést az elektronsűrűségi fordul elő mindkét esetben. Az ezek kombinációja hatások térbelileg szoros és a rendelkezésre álló acil-amino- és hidroxil-csoportok eredményeket az erős kölcsönhatást a molekulák specifikus peptid-antibiotikum bizonyos csoportjai enzimek, melyek végül az zavar a mikrobiális metabolizmus. [C.402]