Jakovenko l, az orvostudomány és a klónozás, "Biology" újság № 12
Telepeket differenciálatlan humán embrionális őssejtek növekvő x 20
A cél az, hogy szerezzen ilyen klónozó humán blasztociszták (gömb alakú, üreges szerkezetek, amely körülbelül 100 sejt), amely tartalmazhat egy belső sejttömeg. Miután eltávolítottuk a blasztociszta belső cellák kialakulhat a tenyészetben, fordult őssejtek, ami viszont, lehet alakítani bármilyen differenciálódott humán sejtek: ideg, izom, vér, mirigyek, sejtek, stb
Orvosi alkalmazás őssejtek nagyon ígéretes és rendkívül változatos. Ezeket fel lehet használni, például a diabetes kezelésére, csökkentésére populációi elhalt vagy sérült hasnyálmirigy sejtek termelő inzulin. Ezeket fel lehet használni, hogy cserélje ki az idegsejtek az elváltozások az agy vagy a gerincvelő. Ebben az esetben nem áll fenn a kilökődés szervátültetések és más nemkívánatos szövődmények kísérik az normális működését a sejttranszplantátu, szöveteket és szerveket.
Az utóbbi időben a „terápiás klónozás” arra használható, hogy jelezze a klónozási embriók szánt beültetésre a méh egy nő, aki azután klónozzuk szülés. Ez a tény igazolja, hogy ez lehetővé tenné a klónozás gyermekek terméketlen párok. Azonban ez nem kapcsolódik a kezelést is. Ezért a legtöbb tudós vesz részt klónozási gyógyászati célokra, úgy véljük, hogy a „reproduktív” klónozás még nem jött el -, hogy megoldja a legbonyolultabb meghatározott biológiai, orvosi és etikai kérdéseket.
Klónozással megérteni részesülő embrió vagy a tojás helyett a sejtmagban a szomatikus sejtek sejtmagjában, vagy parthenogenezissel, azaz elosztjuk a trágyázott tojást. Mindkét esetben szükséges klónozására életképes pete hogy csak akkor lehet beszerezni adományozóktól.
Az adományozók tették speciális hormon injekciókat látszanak, amikor az ovuláció nem egy, hanem mintegy 10 tojást. Forrásként magok átültetéshez egy tojást használnak fibroblasztok. A kötőszöveti sejteket kapott bőr biopszia anonim donorok, amelyek között voltak cukorbetegek, és a betegek gerincvelő sérülések. Izolálása után fibroblasztok kapunk a sejttenyészetből.
Az első kísérletekben fibroblaszt sejtmagokat használunk. Azonban a transzplantáció után a tojás nucleus osztódni kezd, bár, de a folyamat befejeződött gyorsan, és nem alakul ki még két különböző sejtekben. Miután egy sor kudarcok amerikai kutatók úgy döntött, hogy a megközelítés T.Vakayamy és R.Yanagimachi (úgynevezett Hawaii módszer), amellyel az első klónozott egér kapunk.
Ez a módszer abban áll, hogy ahelyett, hogy a szomatikus sejtek sejtmagjában (fibroblasztok) az egész tojás átültetett petefészek sejt. Petefészek sejtek energiaellátására fejlődő tojás és olyan határozottan társított tárolt a felületen még a peteérés után. Ezek a sejtek olyan kicsi, hogy ahelyett, hogy a kernel lehet használni az egész cellában.
Azonban ebben az esetben minden jelentős nehézségeket okoz. Ez több mint 70 kísérlet előtt tudták, hogy a választóvonal tojást. 8 tojás, amelyeket be petefészek sejtekben, két tetrachoric kialakult embrió és egy - shestikletochny. Után, hogy abbahagyta az osztódást.
Parthenogenetikus megközelítés alapja az a tény, hogy a tojás lesz haploid azonnal, de egy meglehetősen késői szakaszában érlelés. Ha egy érett petesejt szinte képes aktiválni, azaz stimulált osztani, az egyik kapna blasztociszta és az őssejtek. A hátránya ennek a megközelítésnek, hogy a kapott őssejtek lenne genetikailag rokon csak a donor petesejt. Kap az őssejteket, hogy más emberek olyan módon nem lehetséges - feltétlenül szükség van egy transzplantáció magok a tojásba.
Korábban voltak sikeres kísérletet, hogy aktiválja petesejtek egerek és nyulak különböző anyagokat, vagy elektromos áram. Vissza 1983-ban E.Robertson kapott őssejtek parthenogenetikus egér embriók és azt mutatta, hogy ezek képezhetnek különféle szövetekben, ideértve izom- és ideg.
Az összes emberi embrió volt nehezebb. A 22 tojást, aktivált kémiai úton, mindössze 6 kialakítva öt napon olyasmi, mint egy hólyagcsíra. Azonban, a belső sejttömeg a blasztociszták az nem volt ...
Háromféle emlős klónozás: embrionális klónozás, DNS klónozás érett (reproduktív klónozás Roslin módszer) és a terápiás (orvosbiológiai) klónozás.
Ha az embrionális klónozása keletkező sejteket felosztása egy megtermékenyített petesejt, elválasztjuk, és továbbra is fejleszteni külön embriók. Tehát lehetséges Monozygóta hármasok, stb 8-ig embriók fejlődnek normális szervezetből. Ezt a módszert már régóta használják az állatok klónozása különböző fajok, de kapcsolatban, hogy az ember annak alkalmazhatóságát vizsgálták elég.
klónozás chartDNS klónozása áll át szomatikus sejtmag egy megtermékenyítetlen tojást, amelynek a saját korábban eltávolított magja. Az ilyen sejt műveletet először végzett G.Shpemannom genetikus a 1920-as években.
Eltávolítása után a petesejt magja kényszerülnek különböző módon G0 a sejtciklus fázisban. Ebben az állapotban a sejt nyugalmi állapotban van, ami nagyon fontos a felkészítő transzplantációs új kernel. Transzplantáció mag elvégezték, vagy transzplantáció fentiekben leírt, petesejt vagy fúzionáltatva másik sejt tartalmazó mag.
Az egyes laboratóriumi felhasználva módosítani ezeket a közös megközelítések. A legismertebb Roslin módszert, amellyel Dolly bárány kapunk.
A siker a mag transzplantációs sebészet fontos, hogy szinkronizálja a sejtciklus a donor sejt és a petesejt. Ezt a módszert fejlesztettek ki és alkalmaztak I.Uilmutom és K.Kempbellom. Először is, a donor sejtek (ha klónozó juh - a tőgy) helyeztünk tápközegben, ahol kezdenek osztani. Ezután kiválasztja az egyiket, és helyezzük egy kimerült közegben, ahol a sejt éhező telt G0 a sejtciklus fázisban. Eltávolítása után a petesejt mag azonnal mellé a donort, és után 1-8 órán át egy elektromos impulzus által kiváltott sejt fúzió és az aktiválás az embrionális fejlődés.
Azonban csak néhány sejt éli túl az ilyen eljárást. Túlélés a ketrecben helyeztük petevezeték juhok és hagytuk növekedni körülbelül 6 napig, majd át a méhbe, ahol folytatta embrió fejlődését. Ha minden jól ment, a végén én született klónozott birka - pontos genetikai másolata a juhokat a donorsejtet vették.
Mivel a magas kockázatú genetikai hibák és a rák az használja ezt a technikát az emberi klónozás által kedvelt sok tudós és közéleti személyiségek. A legtöbb országban az emberi reproduktív klónozás tilos.
Wakayama és Yanagimuchi képes leküzdeni ezt a nehézséget, és az egér klónokat kapunk még magas hozammal (3 100 kísérletek), mint Wilmut (1 ből 277 kísérletek). Wakayama megközelítette a sejt szinkronizálási probléma eltérően Wilmut. tőgy felhasznált sejtek Wilmut, szükséges volt, hogy mesterségesen kényszeríteni, hogy mozog a G0 fázisban. Wakayama a kezdetektől használta háromféle sejt - Sertoli-sejtek, az agysejtek és a petefészek sejtek - amelyek maguk vagy mindig a G0 fázisban (az első két típusú sejtek), vagy majdnem mindig a G0 vagy G1 fázisban. Továbbá a donor sejteket használtunk, néhány perc megjelenése után az egér test, és nem tartott tenyészetben.
Miután eltávolítjuk a sejtmagot a petesejt fecskendezünk bele nucleus donor sejtek. Körülbelül 1 óra múlva a sejtek kezdenek normálisan működni az új mag. A reakciókeveréket további 5 órán keresztül, a cellát behelyeztük egy speciális közegben, ami stimulálja a sejtosztódást, mint az egyik, mint fordul elő természetes megtermékenyítés. A közeg egy speciális anyag - cytochalasin B, - hogy megelőzte a sarki testeket. Ennek eredményeként a tojás fejlesztett embrió lehetne beültetik a méhbe a jövő anya.
Biomedical klónozó fent leírt. Abban különbözik a reproduktív klónozás csak, hogy a tojás a transzplantált nucleus kifejlesztett egy mesterséges környezetben, majd eltávolítjuk a blasztociszta őssejtek, és a pre-embrió így meghal. Az őssejteket fel lehet használni regenerálni a sérült vagy hiányzó szerveket és szöveteket igen sok esetben azonban az eljárás az előállításukra vet fel erkölcsi és etikai kérdések, és sok országban, a törvényhozók tárgyalunk megtiltható orvosbiológiai klónozás. A kutatás azonban ezen a területen továbbra is fennáll, és több ezer halálos beteg (Alzheimer-kór és a Parkinson-kór, a cukorbetegség, a sclerosis multiplex, reumás ízületi gyulladás, rák, valamint a gerincvelő sérülések), abban a reményben várnak, hogy pozitív eredményeket.