Fluoreszcens mikroszkóp, a tudomány, a rajongók powered by Wikia
Olympus BX61 fluoreszcens mikroszkóppal digitális fényképezőgéppel
Fluoreszcens mikroszkóp (latin fluo -. Flow, görög μικρός - .. És egy kis görög σκοπέω - megjelenés) - egy speciális optikai mikroszkóppal. célja, hogy tanulmányozza tulajdonságainak szerves vagy szervetlen anyagok felhasználásával a jelenségek a fluoreszcencia (lumineszcencia). amely lehetővé teszi, hogy láthatóvá a láthatatlan normál fényben mikroszkopikus tárgyak miatt lumineszcencia. A működés elve alapul besugárzása a mintát ultraibolya fény; további lehetőségeket a tanulmány a biológiai struktúrák teszi a különleges festés. képes adszorbeálni szelektíven bizonyos organellumok biológiai preparátumot.
Bevezetés szerkesztése
A folyamat a foton abszorpciós energiaszint a szerves és szervetlen anyagok, majd kibocsátása gerendák, amelynek más hullámhossza, ismert, mint a fizikai jelenség a fluoreszcencia (lumineszcencia). elektron emisszió fényében a folyamat a fluoreszcenciát az idő függvényében egyidejű az elején az abszorpciós-gerjesztés. Így kibocsátott sugarak egy hosszabb hullámhosszú felszívódik (a kibocsátott fotonok alacsonyabb energiát, mint az elnyelt). Abban az esetben, amikor az idő közötti abszorpciós és emissziós több, mint egy mikroszekundum, a folyamatot nevezzük foszforeszcencia.
Ezt a jelenséget először fedezte fel az angol George Stokes 1852. Észrevette, hogy az ásványi fluorit pirosan világít, miután meggyújtotta ultraibolya fénysugarakat. Tanulmányok a tizenkilencedik században, megállapították, hogy sok anyag. Crystals, gyanták, nyers drog, olaj, klorofill, vitaminok, szervetlen anyagokat és egyéb ásványi anyagok fluoreszkál, ha világít ultraibolya fénysugarakat. Csak 1930 óta nachalosos felhasználása a jelenség a fluoreszcencia, ami kezdték használni a biológiai kutatásokban. A vizsgálati anyag elemek, baktériumok, patogén mikoorganizmy észlelni őket a élőhely acél festés flyuorokrasitelyami. Néhány használt festékeket mikroszkóppal megszámláltuk, majd a fő motor a létrehozását szolgáló eljárás egy fluoreszcens mikroszkópos felbontás a nanométeres szinten (1-10nm) ment Fluoreszkáló nanoscopy.
Alkalmazása több világító flyuoromolekul, atomok engedélyezve mikrorészecskék felismerik és különböző celluláris elemeket, amíg egy elem - a molekula. Annak ellenére, hogy ez a módszer nem képes továbbítani a perspektivikus nézete az elem alatti diffrakciós határ azonban nanoscopy fluoreszcens módszer képes teljesíteni a képernyőn vagy olvassa az optikai mikroszkóp szemlencsén képeket az egyes molekulák a 3D mérési, zónában elhelyezett, és az alábbiakban a diffrakciós határ. Alkalmazás színező flyuorokrasitelyami molekulák által gerjesztett modul nincs együtt, például ultraibolya fénysugarak okozza a hatás a gerjesztés a molekula, amely bocsátanak ki fotonokat átalakítja sugárzási energia elegendő leképezésére a kívánt fényerőt és bizonyos nyomelemek. Lehet tervezni előre elosztásának megfelelő molekulák miatt elszíneződés flyuorokrasitelyami, hogy a titkos őket mikroszkóp alatt.
Bázisok gerjesztési és emissziós szerkesztése
A membrán élesztő sejtek, láthatóvá néhány membrán fehérjék (mivel a adszorpciója fluoreszcens markerek hu: RFP és en :. GFP Sárga színes kép keletkezik, amikor az optikai összegzési megosztás mindkét marker a sugárzás)
Ezek mikroszkópok fontos eszközévé vált a biológia területén, megnyitva a lehetőséget a fejlettebb területeken mikroszkópia, mint a konfokális mikroszkópia segítségével, hogy képeket nem csak a felszínen, hanem egy bizonyos mélységben a minta.
Floremikrokopa fő cél az, hogy megvilágítsa a tárgy szerinti vizsgálat, és kellő bizonyos hullámhossz-tartományban, és ezután szétválasztjuk gyengébb emittált fluoreszcencia (látható fény tartományban) a gerjesztő fény. Normális flyuoremikroskope van kialakítva, nevezetesen a kibocsátási gerendák színes molekulák kell adnia a látómező a szem vagy a fotodetektor. Fontos, hogy a fluoreszcens festék, ha izgatott lumineszcencia hozzá fényesség színű részecskék, úgy, hogy azok a nagy fényerejű, kontrasztot egy sötét (vagy fekete) háttér. Ragyogó mikrotápanyagok miatt a szűrt látható fénysugarak láthatóvá válnak létrehozásával alacsony fényerejű (sötét) háttér. A gerjesztő fény - általában néhány százezer egymillió szer fényesebb, mint a kibocsátott fény fluoreszcencia (látható fény tartományban).
A működési elve a modern flyuoromikroskopa szerkesztése
A rendszer úgy működik, fluoreszcens mikroszkóp szűrők
Modern flyuoremikroskop célja, hogy tanulmányozza a használata a epitaxiális módszerével továbbítására egy képet, és tükröződik flyuoremikroskopii. Ennek alapján a kialakítás az a képesség, hogy egy mikroszkóp függőleges áramlási sugarai a hullámhossz-tartományban ultraibolya, kék vagy zöld látható fénysugarat, amely képződik az átvitelre multispektrális fényforrások, mint például a ívlámpa, vagy más forrásból, amelynek hullámhossza szűrt szűrő gerjesztési gerendák. Ez az áram a visszavert fénysugarak a szűrőből - a dikroikus tükör, vagy sugárosztó, áthalad a minta (cél), a bőséges világítás. Amikor reflexió és visszatérő fénysugarak kibocsátási (gerjesztés) áthalad a két színű tükör, szűrjük egy szűrő, amely blokkolja a nem kívánt gerjesztési hullámhossz. Ebben az esetben a fluoreszcencia - ez az egyetlen módja az optikai mikroszkópia, ahol a mintát gerjesztés után kezd világítani saját fényével. Ezek kibocsátott fény árad gömb ismételten minden irányába, és függ a kereset a gerjesztő fényforrás gerendák.
Mikroszkóp egyes molekulák szerkesztése
Ideális üzemeltetési feltételek flyuoremikroskopa láthat rekord egyes molekulák. Festett, egyetlen molekulák gerjesztett emissziós lehetséges alacsony értékek a háttér optikai zaj és gyenge fényérzékelő szűrő látható sugarak által észlelt a fényérzékelő és a hangsúly a sötét háttér előtt a fókusz síkjában, lehetővé téve számukra, vizuálisan látható. Egyetlen molekula képes kibocsátó fotonok 300.000 kudarcra fotofehérítő, amely elegendő a rögzítéshez.
Modern fluoreszcens mikroszkóp működik együtt a hatékonyság optikai mikroszkópos módszer elemeit mikrockopa számítógépes rendszerek és digitális rendszerek sodaniya ADC. így nagyobb mértékben alkalmazzák a vizuális megfigyelés kép digitalizálás, ezek átalakítása sztereó képek fájlokat a hozam monitor képernyőjén.
Fejlesztések és elérni az optikai mikroszkópia kombinált fluoreszcens vezetett a képességét, hogy kezelje a szubcelluláris struktúrák vagy részecskéket blagldarya és használata miatt széles körű spektroszkópiai mennyiségben.
Eljárás képek fluoreszcens mikroszkóp kapható méretei egy szokásos laboratóriumi fénymikroszkóp, és tartalmaz:
Az eljárás azzal jellemezhető, hogy a különböző részei az objektum periodikusan előállított külön fluoreszcens láthatóvá molekulák és nanorészecskék. A lézer biztosít ilyen azok gerjesztés, amely elegendő nemcsak a regisztrációs nem átlapoló képek, hanem elszíneződés már felvett fluoreszcens molekulák. Így több tízezer keretek regisztrált képek az egyes molekulák és nanorészecskék (például foltok átmérője nagyságrendileg fény hullámhossztartományában flyuorestsenii szorozva a nagyítás a mikroszkóp), számítógépes feldolgozás keresni a koordinátáit foltok központok és hozzon létre egy a tárgy képét a több millió számított koordinátáinak foltok központok megfelelő koordinátákat egyedi fluoreszkáló molekulák és nanorészecskék.
- Ez lehetséges a két- és háromdimenziós 3D kép felbontása 1-10 nm.
- Imetcya lehetőségét felvétel egy színes képet a különböző festékek prokraske fehérjék, nukleinsavak, lipidek. [2] [3]
Flyurestsentny mikroszkóp - olyan eszköz, egyedülálló képességekkel szövettani vizsgálatra az emberi szövetek, állatok és növények. Ezt alkalmazzák a immunoassay, immunológiai, immunmorfológiai és immungenetikai vizsgálatok.
Általában az alapelv fluoreszcenciamikroszkópban besugárzása minta mivel egy bizonyos hullámhosszúságú sávban okozó fluoreszcencia a mintában. Ezután meg kell kiosztani egy sokkal gyengébb fluoreszcens sugárzás. Egy tökéletesen hangolt mikroszkóp, csak a fluoreszcens fényt a szem, hogy elérje a kutató vagy detektor úgy, hogy a kapott fluoreszcens struktúrák allokálva nagyon nagy kontraszt egy sötét (vagy fekete) háttér. A probléma az, hogy a gerjesztő fény rendszerint néhány százezer, vagy akár millió szer fényesebb, mint a kibocsátott fény fluoreszcencia miatt festék. Alkalmazható szűrők használatával rövidség erős fluoreszcens festékek és egy alsó fordulatszám gyengébb fluoreszcens élő fehérje vizsgálati minta (például vágott csirke retina a szem), egy képet kapunk, mint például a csapok és pálcikák színű, hangerő magas molekuláris szinten. Az ábrán egy diagram (metszetben) a modern fluoreszcens mikroszkóp kutatási áteresztett és visszavert fény.
szabályai
Az eszköz egy fluoreszcens mikroszkóp Olympus BX 51 vizsgálatához mintákban epi-fluoreszcens in továbbított és a visszavert fényt
Egy fluoreszcens mikroszkóp, amely tartalmaz egy vagy több forrásból ultraibolya vagy kék fényt. Elnyeli ezt a sugárzást, az egyes szerkezeti elemek a minta látható fényt bocsát ki, mivel önálló lumineszcencia [4] vagy a sugárzás a fluoreszcens festékek - markerek képesek adszorbeálódni bizonyos szövetek (például a membrán fehérjék, egyes kromoszómák, stb).
Alkalmazás szerkesztése
A fluoreszcens mikroszkóp - olyan eszköz, egyedülálló képességekkel szövettani vizsgálatra az emberi szövetek, állatok és növények. Ezt alkalmazzák a immunoassay, immunológiai, immunmorfológiai és immungenetikai vizsgálatok.
Miatt a műszaki jellemzőinek, fluoreszcens mikroszkópok széles körben használják a gyógyszeriparban, az állatgyógyászatban. növény. biotechnológia. Fluoreszkáló mikroszkópok, elvén működő közvetlen reflexió, szinte nélkülözhetetlen a vezető törvényszéki vizsgálatok és egészségügyi és járványügyi vizsgálatok. [5]
Fluoreszkáló mikroszkópok elő egészen a közelmúltig, volt egy elég komoly hátránya: ők voltak terjedelmes és nehéz. A modern kutatások során speciális fluoreszkáló és enzirrscímkék jelentősen csökkenti a méretét fluoreszcens mikroszkóp, hogy azok egyszerű és helytakarékos. Ötvözi a klasszikus fiuoreszcenciamikroszkópon ki a digitális technológia lehetővé tette, hogy számukra nagy lehetőséget, hogy rögzítse az eredményeket megfigyelések és tartsa azokat digitális formátumban.
A fő alkalmazási területek a fluoreszcens mikroszkópia (amelyben egyszerűen pótolhatatlan) a következők:
- diagnózisa bakteriális, vírusos és egyéb fertőzések az antigén készítmény
- elemzése csontvelő vérsejtek
- Szövettani vizsgálata az élő sejtek a retina szemek. Például,
1. ábra A képen, ami a fluoreszcens mikroszkóp összes adatot csapok és pálcikák a mennyiség és a szín. A kövér cseppek (olajcseppek) meghatározza besorolás csirke csap fotoreceptorok színű. Sticks színtelen, mert nem vesznek részt a színlátás.
Mivel a fajta fotoreceptorok csapok szín a tipikus viszony színlátás madarak
galéria szerkesztése
