protein kicsapásos reakciónak
1. kisózás fehérjék ammónium-szulfáttal.
Egy fontos tényező a fehérjék stabilitása oldatban jelenlétében a hidratációs héj körül a fehérje részecskék. Ha a fehérje oldat hozzá-sóval, például (NH4) 2SO 4. Na 2SO 4. NaCl és mtsai. Nagyobb és kicsapódnak miatt a megsemmisítés vízi kagyló fehérje részecskék általában ragasztva egymással. Más fehérjék kisózás egyenlőtlen koncentrációjú ugyanazon sók. Globulinok, például, lerakódnak a félig telített ammónium-szulfát-oldatot, míg az albuminok - telített oldatban ennek a sónak. Kisózás fehérjék reverzibilis reakció. Fehérjék denaturálása, amikor ez megtörténik.
Haladás. Öntjük csőbe 1-1,5 ml fehérje oldathoz hozzáadunk azonos térfogatú telített ammónium-szulfát oldat. Megfigyelt elvesztése fehér pelyhes csapadék globulinok. A zavaros folyadékot szűrjük át egy száraz redős szűrőn. A szűrlethez keverés közben fölös mennyiségű ammónium-szulfát a por megszűnése előtt annak oldódási. Úgy tűnik, zavarosság vagy pelyhek alá az albumin csapadékot. A maradékhoz adunk 2-3 alkalommal a víz térfogata és üledék vannak győződve arról, a kioldódási.
2. Kicsapás fehérjék alkohollal.
Alkohol dehidratál fehérjék történik, amellyel a koagulációs, aggregálódását és kicsapódását. Reakció fehérje kicsapás alkohol rövid érintkezési ez a fehérje reverzibilis.
Haladás. A csövet öntöttük körülbelül 2 ml fehérje oldathoz hozzáadunk néhány kristály NaCl és hozzáadjuk etil-alkoholhoz kapcsoljuk, miáltal pelyhek. Ülepedés után a protein pelyheket, folyadékot leszívatjuk felettük, a maradékhoz vizet adunk, megfigyelése oldódását a fehérje.
3. Csapadék fehérjék által nehézfémek sói.
Nehézfém-sók, így például SuSO4. HgCl2. (CH 3 COOH) 2 Pb al. A kicsapódott fehérjéket megoldások irreverzíbilisen, képződése miatt a fehérje-fémkomplex vízben oldhatatlan vegyületek. Így denaturált fehérjék. Fehérje szerkezet (kivéve elsődleges) teljesen elpusztult. Ilyen fehérje elveszti a képességét, hogy végre az ő szokásos funkciójukat. Változhat a fizikai és kémiai tulajdonságai, a fehérje elveszíti oldhatóságát. A folyamat a denaturációs, jellemzően visszafordíthatatlan.
Eljárás: A kémcsőben öntöttük körülbelül 2 ml fehérje oldathoz, és hozzáadunk lassan, cseppenként a nehézfém-só-oldatot (1% -os réz-szulfát-oldat vagy 5% ólom-acetát-oldat).
Követési fehérje véralvadási. A kicsapódott pelyhek víz hozzáadásával nem oldódik.
4. Csapadék fehérjék szerves savak.
Triklórecetsavat egy specifikus reagenssel, hogy a fehérje. Csak kicsapódik fehérjék és a termék kicsapására a fehérje lebomlás és az aminosavak, így használják a teljes eltávolítása a fehérjék biológiai folyadékokból (például, a szérum, tej). Ilyen körülmények között a fehérje bomlástermékeket oldatban maradnak.
Proceedings: A pour csövet 2-3 ml fehérje-oldatot és néhány csepp 5% -os triklór-ecetsav-oldatot. Megfigyelt elvesztése fehérjemaradék.
5. Deposition fehérjék hevítésre.
Amikor melegítjük, denaturált fehérjék. A denaturálás kíséri változás a szerkezet a fehérje molekulák károsodott aránya a hidrofil és hidrofób csoportok növelése irányába az utóbbi. Az ilyen molekulaszerkezet változás veszteséget okoz a natív fehérje tulajdonságok, beleértve a veszteség annak oldhatóságától.
A kémcsövet öntjük 3,5 ml oldatot a tojásfehérje, hogy be van helyezve a hőmérőt, és az oldatot melegítjük pelyhek. Megjegyzés: a hőmérséklet, amelynél a képződött pelyhes csapadékot. Ellenőrizze reakció reverzibilitásra.
A fehérje nem csapódik, ha azt a környezetet, amelyben feloldottuk, lenne erősen savas vagy erősen bázisos. A fehérje-molekula hordoz egy bizonyos díjat - pozitív savas környezetben, és negatív - a lúgos környezetben. Így megnövekedett fehérje stabilitásának eredő elektrosztatikus taszítás erők és a fehérje csapadékot.
Eljárás: A négy cső öntsük fehérje oldat. A második adjunk hozzá néhány csepp híg ecetsavban, a harmadik - erős jégecetet, a negyedik - néhány csepp lúggal. Mind a négy csöveket főtt. Megjegyzés: a változások.
Az ampullát egy erős ecetsavval, hogy semlegesítse a lúgos gondosan megjegyezve változásokat.