Feltételek szövettenyészetben
Gazdag tápközegben - egy tökéletes szubsztrátja a mikro-organizmusok ott. kémiai hatás (fertőtlenítő), a hőmérséklet és más fizikai szerek (ultrahang, ultraibolya sugárzás, ultraszűrés) fertőtlenítésére táptalajok. A fenti módszerek mindegyike igen szelektív alkalmazására.
A biotechnológia módszerek széles körben használják a termikus fertőtlenítés (autoklávozás, sterilizálás, forráspont, pasztőrözés, stb).
Mint ismeretes, az egyes komponensek a tápközeg is különbözőképpen reagálnak a termikus hatás. Különösen hőlabilis szerves vegyületek: vitaminokat, szénhidrátokat, hormonok és más, összetett cukrok és poliszacharidok részben hidrolizálnak autoklávozással .. A hidrolízis foka függ a szénforrás, hőmérséklete és időtartama a autoklávozás. Magas hőmérsékleten a karamellizálódása cukrok.
Tartalmazó oldatokat aminosavak és a redukáló cukrok a termikus expozíciós szerez egy barnás színű miatt saharoaminnyh reakciók.
Ahhoz, hogy elkerüljük a nemkívánatos ártalmas változásokat táptalaj komponensek (szubsztrátok) használt lehetőleg lágyabbnak módok sterilizálás (táblázat. 4.4), vagy egy külön sterilizáló a komponensek. Magas de átmeneti hőmérsékleti körülmények inaktiválja bakteriális spórák, amely minimális hatással van a biológiailag aktív komponensek a közeg. A laboratóriumban, sterilizálása táptalajok és néhány egyéb tárgyak végezzük autoklávban gőzzel nyomás alatt, miközben a kívánt üzemmódot. Bizonyos esetekben a igénybe száraz meleggel sterilizálás.
4.4. sterilizálás tápközegek módok
Megállapítást nyert azonban, hogy a hőmérséklet felett 121 ° C lehet az oka a zavaró a minőségi média, és ennek következtében gyenge kultúra növekedés. Sőt, elvileg, kívánt Autoklávban történő sterilizálás kis térfogatú táptalajok, hogy azonos körülmények között, lehetővé teszi, hogy csökkentsék sterilizálási idő, mivel a meleg-up idő lerövidíthető mintákat (táblázat. 4.5).
Az elmúlt évtizedben nagy figyelmet szenteltek membránszűréssel steril levegő és a különböző folyadékokat. Ez a fajta hideg sterilizálás, amely hatásos sterilizálás hôlabilis anyagok.
Az ipari termelés membránszűrők indult végén 40-es években. a múlt században. Szerint újra Kesting (1971), a leggyakoribb folyamatok hagyományos szűrési (makrofiltratsiya -1-10 mikron), mikroszűrő (20 -10 m), ultraszűréssel, dialízissel (10 m-1 nm).
Ha makrofiltratsii alkalmazni hagyományos papír vagy üveg szűrő, akkor használják a többi nitrocellulóz, cellulóz-acetát, polivinil-, poliamid, fluorokarbon membrán vastagsága kisebb, mint 0,1 mikron, a magas fokú porozitás és pórusátmérője belül 04/10/10 mikron. Alkalmazhatók sterilizációs célokra a biotechnológia elég mikroszűrés.
Alapvető követelmények tenyésztési körülmények
Minden manipuláció a kultúra izolált növényi szövetek végzik steril körülmények között. Komplex intézkedéseket annak érdekében, aszepszis biotechnológiai eljárások közé tartozik a mechanikus, fizikai és kémiai védelmet bioobject és élőhelyének, és ha szükséges - és a végtermék.
Asepsis biztosít nedves tisztítás, kezeljük őket ultraibolya sugárzás, fertőtlenítő, steril eszközök, a média feldolgozás ruházat, steril levegő (táblázatok lamináris áramlás steril levegő a bekeretezett területek, a szállítás a fermentor steril levegőt vezetünk - francia barbotage. - keverés) és így tovább.
Ahhoz, hogy megvédje a mechanikus eltávolítása mechanikai szennyeződések közé tartoznak például, a levegő, talajlazító; tömítő berendezések, elkülönítési csomópontok és linkek; fizikai - a levegő és a felületkezelés eszközök és berendezések az ultraibolya sugarak, forráspont, gőzsterilizálást nyomás alatt, ultrahanggal; a kémiai - kezelése a munka felületek és biosamples kémiai antiszeptikumok.
A gyártás folyamán, források szennyező mikroorganizmusok lehet a talaj, a víz, a levegő, a nép. A talajból a gömb biotechnológiai eljárások tartoznak spóraképző bacillus, Bacillus, konídiumok gombák, Actinomycetes; Ugyanezek a mikroorganizmusok a por juthat be a levegőt, ahonnan képesek behatolni a bioobject kultiváiómédiumból vagy a végtermék gyártási
Termesztése izolált növényi szövetek fordul elő a fényt. Faktorostatnoy megvilágítás (fény) a szobában kell lennie, attól függően, hogy a kultúra 1 000-10 000 lux. Meg kell figyelembe venni a fényperiódussal, ami szükséges a megművelt objektumot.
Nedvesség fényében szobában kell lennie 60-70%. Továbbá, száraz levegő elősegíti a szárítási ki a tápközeghez kémcsövek és lombikok, különösen, ha azok vannak lezárva vattadugóval, a változás annak koncentrációja, és így zavara tenyésztési körülmények között. Használhatja a tálcák vízzel, hogy növelje a páratartalom a szobában.
Az optimális hőmérséklet a többsége a tenyésztett szöveti -25-26 ° C, a kultúra trópusi növények szövet - 29-30 ° C-on Abban az esetben, indukcióját morfogenezis elegy hőmérsékletét 18-20 ° C-on
A sikeres termesztése az izolált sejteket és szöveteket a növények bizonyos feltételeknek kell teljesülniük. A legtöbb kallusz szövetet nem kell a fény, mivel nincs kloroplasztiszok és táplálja heterotrophically.
A kivétel néhány zöld kallusz szövetet, például szöveti mandragóra. Kallusz szövetet a sötétben vagy szórt fényben, és a sikerének morphogenesis át területeket intenzív világítás 1 000-4 000 lux.
Fény és hőmérséklet rezsimek, valamint egyéb feltételeket, attól függően, hogy a feladatokat. A legjobb paramétereinek, valamint az optimális nedvesség viszonyok segítségével lehet létrehozni kamrákba.
NA Warriors, TG Volová