Színező baktériumok - a kivonatok helyszíne
Peshkov módszere
- A löketeket hővel kell felönteni, öntsük a metilénkék oldatot, és melegítsük fel az előkészüléket az alkohollámpa lángja fölé, és a színezéket felforraljuk. Forraljuk 15-20 s-ot, mivel a párolgás új festékrészeket ad;
- A készítményt alaposan leöblítjük vízzel, míg a citoplazma elszíneződik, és a festék megtartja a spórát;
- a citoplazma vastagsága 30 ° C, 0,5% -os semlegesvörös oldattal;
- készítmény mosás vízzel, száraz szűrőpapírral és mikroskopirovat lencse 90 H. A látómező látható rózsaszín vegetatív sejtek rendelkező endospórák, festett sötét kék (a fiatal spórák) vagy kék (képződött spórákat) színe.
A Peshkov-Trujillo módszer
- hővel megkenni, telített vizes zöld malakit oldatot önteni, és felmelegíteni a készítményt az alkohollámpa lángja fölé, és nem forraljuk 3 percig;
- A terméket vízzel mossák, míg az endoszpora megtartja a festéket. A citoplazmát kontrasztosan festjük 0,25% -os foszszinos vizes oldattal 1 percig;
- készítmény mosás vízzel, száraz szűrőpapírral és mikroskopirovat lencse 90 H. A látómező látható rózsaszín (érett) vagy piros (fiatal) vegetatív sejteket tartalmazó kék-lila (fiatal) vagy zöld (érett) spórák.
Omelyansky módszere
- Egy csepp félhígított karbolikus fuchsin Tsil-t alkalmazzunk a diához;
- egy csepp festékkel csepp egy bakteriális szuszpenziót;
- 2-3 perc után adjunk hozzá csepp folyékony fekete szövetet vagy 10% -os vizes nigrozin oldatot;
- a cseppek gyorsan keverednek, és a második csúszkával készítsék el a keneteket a vérelnyelés típusában - helyezzük a tárgy fedőlapját a szuszpenzió cseppjéhez 45 ° szögben, és mozgassuk előre a csúszda végéhez;
- a hatóanyagot levegőn szárítjuk, és 90X-es lencsével mikroszkóposan végezzük. A hasított test sötét hátterénél világos vörös baktériumsejteket látunk színtelen kapszulákkal körülvéve.
A Hins módszer
- Vigyen fel egy csepp fekete hasított testet a csúszda végére, és helyezze be a vizsgált anyagot. Keverjük össze a folyadékot a második csúszda vagy fedőüveg bordájával, hogy kenetet készítsen a készítmény teljes felületén;
- kipréseljük levegőn, Nikiforov keverékével 5-10 percig keményítsük;
- a Zilya karbolic fuchsin festékfestékkel, vízzel hígítva 1,,3, 2-3 percig;
- Öblítse le a terméket vízzel, szárítsa meg levegővel és mikroszkóppal öblítse le. Sötét szürke háttéren a baktériumok rózsa-magenta sejtjeit kontrasztosítják, színezett kapszulákkal körülvéve.
Antony módszere
- levegőn szárítjuk kenet tenyészet vizsgálatban rögzített pár 40% -os formalin-3-4 percig, amelyre a hatóanyag kerül egy Petri-csészébe a berendezés ablak legördülő át a kenet formalin;
- egy fix kenetet 2-3 percig 1% -os kristályos ibolyát-oldattal festünk, majd 2% -os réz-szulfát-oldattal mossuk;
- A hatóanyagot levegőn szárítjuk, és mikroszkóposuk egy merülő rendszerrel. Fényes lila háttéren, különösen a kenet széleinél, a lila baktériumsejteket színtelen kapszulák veszi körül.
BAKTERIÁLIS SZÍNBEN GRAMS
A Saccharomyces cerevisiae és Azotobacter chroococcum sejtfalának mikroszkópos vizsgálatához és rajzolásához a Gutstein módszerrel festettük:
- A keneteket 15 percen keresztül Carnoy folyadékban (10 ml jégecetben, 60 ml 96 0 etilalkoholban, 30 ml kloroformban) rögzítjük;
- készítmények merítettük 10% -os vizes tannin, hogy csökkentsék a affinitással citoplazmatikus alapvető színezékek;
- 20-30 lemezeket vízzel mossuk, megfestjük 0,02% -os vizes kristályibolya oldattal és 1:40 arányban vízzel Ziehl fukszin (módosítás Peshkov) 30 másodpercig (élesztő) és 60 (baktériumok);
- a készítményt mossuk, szárítjuk és mikroszkóposuk 90 x-es lencse segítségével. A látómezőben egy enyhén rózsaszín vagy színtelen citoplazmát körülvevő piros vörösvérsejt látható.
- egy rögzített kenet 1-2 percig festett karbolikus gentian ibolyával;
- a festéket leöblítik, és a készítmény vízzel való mosása nélkül, 1-2 percig kezeljék a kenetet Lugol oldatával a feketésig;
- Lugol oldatot dekantáljuk, a hatóanyag vízzel mossuk és elszíntelenedik készítmény 0,5-1,0 perc 0 96 th etil-alkohol, az alkohol öntjük, tampont, enyhe rázás üveg, és a változás, több alkalommal. Ahhoz, hogy kizárja a nemkívánt elszíneződés sejtek a-alkoholt adunk hozzá jódot (2 ml 10% -os jód 100 ml etanolos oldatban). Az alkohol helyettesíthető acetonnal, amely szinte azonnal működik;
- a készítményt vízzel mossuk, és további 2-3 percig festjük a vizes fuzinszel;
- a festéket leöblítjük, a készítményt vízzel mossuk, megszárítjuk és egy merülő rendszerrel mikroszkóposan elkülönítjük.
- fix kenetek hővel tegye szűrőpapírcsíkra impregnált genciániboíyával (kristályibolya, metilibolya), festék 1-2 min. Jobb kihasználása elkékülése módosítás: alkoholos oldatával genciániboíyával (1 g genciánibolya kristályok, 100 ml 96 0 etil-alkohol, 5 ml glicerin) vagy oldat karbololajból genciániboíyával papírt elő blueness - szűrőpapír csíkokat merítettünk alkoholos festék oldattal mossuk, levegőben vagy termosztátban 37 ° C-on (jó papírfoltok egyenletesen). Színes papírcsíkot helyezni a kenet, töltött neki 2-3 csepp víz és szorosan nekinyomódik a papírt kenetet. Dye 1-2 perc;
- vegye le a papírt, engedje le a festéket, és anélkül, hogy a készítményt vízzel leöblítené, 1-2 hónapig öntsön egy Lugol-oldatot a kenetre a kenet foltosodása előtt;
- összegyűjteni a Lugol oldatot és öntsön 1-2 csepp 96 0-etil-alkoholt a készítményre 30-60 másodpercig, enyhén rázva a hatóanyagot;
- öblítsük le a készítményt vízzel, és ezután további 1-2 percen keresztül festékezzük foszszin vizes oldatával;
- öblítse le a terméket vízzel, száraz szűrőpapírral és mikroszkóppal 90X-es lencsével.
- egy fix kenetet festünk 1 percig kristályibolyával;
- 3-4 másodpercig mossa le a festéket vízzel, amelynek feleslegét eltávolítják;
- a gyógyszert Lugol-oldattal 1 percig megfestettük;
- A Lugol-t lecsöpögtetjük, a készítményt vízzel mossuk és 96 ° C-os etilalkohollal színtelenítve 30 másodpercig csepegtetjük, amíg megállítja a festést;
- az alkoholt vízzel leöblítjük, és a hatóanyagot 30 s szafranin oldattal kezeljük;
- a festéket lemossuk, a készítményt vízzel mossuk, szárítjuk és mikroszkóposan elszitáljuk.
Hooker módosítás
- egy fix kenetet festünk 1 percig kristályibolyával;
- 3-4 másodpercig mossa le a festéket vízzel, amelynek feleslegét eltávolítják;
- a gyógyszert Lugol-oldattal 1 percig megfestettük;
- A Lugol-t lecsöpögtetjük, a készítményt vízzel mossuk és 96 ° C-os etilalkohollal színtelenítve 30 másodpercig csepegtetjük, amíg megállítja a festést;
- az alkoholt vízzel leöblítjük, és a hatóanyagot 30 s szafranin oldattal kezeljük;
- a festéket lemossuk, a készítményt vízzel mossuk, szárítjuk és mikroszkóposan elszitáljuk.
A Kalina módosítása
- Tegyen egy csepp bakteriális szuszpenziót és 1 csepp reagenset egy tiszta, zsírtalanított tálcán, majd egyenletesen szétterítse az elegyet 1 cm2-es területen;
- szobahőmérsékleten száradni, hővel hűteni;
- a II. oldatot 1-2 percig alkalmazzuk;
- vízzel öblítsük le, száraz papírral és mikroszkóppal 90X-es lencsével szárazak, látómezőként fekete-ibolyaszín (zöld) gram-pozitív és világvörös gram-negatív baktériumok.
(gyémánt zöld) - 0,5 g;
Etilalkohol, 96 0-100 ml.
0,5% alkoholos kálium-jodid oldat - 96 ml;
0,5% -os alkoholtartalmú foszszin - 2 ml;
5% alkoholt tartalmazó jódoldat - 2 ml.
Omelyansky módszere
- a hőgörcsökön öntsük a Tsilya fasznát és a sejteket 30-60 másodpercig festjük;
- öblítsük le a készítményt vízzel, majd 20-30 másodpercig merítsük egy üvegbe 1% H2SO4-vel, miközben a sejtek elszíneződnek, és a színezőanyag megtartja színét;
- öblítsük le a terméket vízzel, és ezenkívül 15-30 másodpercen keresztül a kontrasztot a metilén kék színnel (1,40) megnöveljük;
- a festéket vízzel leöblítjük, a készítményt szűrőpapíron szárítjuk, és 90 x-es lencsével mikroszkóposan eljutunk. A látómezőben a vörösvérű granulák és a kék citoplazma láthatóvá válik a sejtekben.
A Neisser módszer
- Az 1. és 2. oldat keverékét 1-5 percig melegítjük fel fixált tamponokra;
1. megoldás 2. megoldás
Metilén kék - 0,1 g; Crystal. ibolya - 1g;
Etil-alkohol, 96 0-2 ml; Etil-alkohol, 96 0-10 ml;
Jégsavas illóolaj. víz - 300 ml.
Desztillálódó. víz 100 ml.
- Engedje le a festéket és alkalmazzon Lugol oldatot 1 percig;
- a készítményt vízzel és színezékkel krizoxidinnel (1 g krizzoid, 300 ml desztillált víz) 2 percig öblítsük ki;
- öblítsük le a terméket vízzel, szárazra és mikroszkóposan egy 90 X-es lencsével, a látómezőben láthatóak a sárga színű bakteriális sejtek fekete-kék színű szemcsék.