Az anyag bakteriológiai vizsgálatának algoritmusa
Módszertani ajánlások a gyakorlati órára №12
A témában: "A bélbaktériumok családja (Escherichia, Salmonella)".
1.Zakrepit tudás az Escherichia, a szalmonella, a laboratóriumi diagnózis módszereinek és az általuk okozott betegségek megelőzésének morfológiájáról, biológiájáról és rezisztenciájáról.
2. Az anyag felvételére, irányítására, rögzítésére és továbbítására vonatkozó szabályok tanulmányozása a bélfertőzések bakteriológiai laboratóriumához.
3. Az ürülék mikrobiológiai vizsgálatának első szakasza és technikája elsajátítása az enterobaktériumok izolálása céljából.
4. Az Escherichia, Salmonella által okozott betegségek specifikus megelőzésének és terápiájának eszközeinek tanulmányozása.
Tanulmányozza az Escherichia, Salmonella morfológiai és tinctorial tulajdonságait a kész készítmények mikroszkópiájával és az asztal szerint rajzoljon, aláírja.
o akut bélfertőzések (vagy gyanú);
o 2 év alatti gyermekeknél a kórházba való belépéskor;
o bélbetegségben szenvedő betegekkel való érintkezés;
· Tegyen egy számot a számnak megfelelõen az üveg irányába egy kémcsõbe;
· Távolítsunk el egy steril tampont a kémcsőről, nedvesítsük meg a törlőt (30% glicerin + 70% ICH), feleslegessé tesszük a tesztcsövet a falhoz.
· A rotációs mozgások a vizsgázó végtagján lévő tampont vezetik be, amely a bal oldalon fekszik, és a lábak a kanapén a hasra jutnak;
· Távolítsa el a tampont, tegye be száraz steril csőbe, anélkül, hogy megérinti az éleit;
· A laboratóriumba való bevétel előtt a kémcsöveket két órán át hűtőszekrénybe helyezzük.
Ezenkívül a bélmozgásokat közvetlenül az érlelés, a fazék, a speciális tálca, vagy az üvegrúd, a drótkötél, a fából készült spatula használatával azonnal összegyűjtik. Ha kórokozó szennyeződések (nyálka, vér, genny) vannak a kivágásokban, azokat fel kell venni a mintavételes mintába. A tartósítószerben nem helyezkednek el a steril ICN-ben 1: 5 vagy 1:10 arányban szuszpendált széklet, amelyeket a gyűjtés után legkésőbb 2 órával beoltanak. Az anyagot tartósítószerbe helyezzük, és tároljuk, amíg a vizsgálat 4-6 ° C hőmérsékleten kezdődik a hűtőszekrényben.
1. Vizsgálja meg a tartályba bejuttatni kívánt anyagok irányának, befogadásának és nyilvántartásának szabályait. laboratóriumban (lásd a 2. sz. mellékletet).
2. Vizsgálja meg a bélbetegségek anyagának bevitelére és szállítására vonatkozó szabályokat (lásd az 1. sz. Mellékletet).
Végezze el a natív anyag (excreta) bakteriológiai kutatásának első szakaszát az enterobaktériumok izolálásához.
· Csepp inokulumot bakteriológiai kacs segítségével (üveg rúd, cső, pipettával) felvisszük az egyik felület a lemez táptalajt Petri-csészébe, hogy eltérnénk 1,5 2 cm-re a szélétől a csésze;
· A vetést spatulával végezzük, az anyagot a tápközeg teljes felületén dörzsöljük az általánosan elfogadott eljárás szerint;
· Figyelem! A széklet vizsgálata során az egyik téma anyagát Petri-csészékkel oltják be a következő hordozókkal.
Az Escherichia izolálása (37 ° C, 18-20 óra).
A Shigella izolálása (37 ° C, 18-20 óra).
- Ploskireva antibiotikumokkal;
- Ploskirev antibiotikumok nélkül.
A szalmonella izolálása (37 ° C, 18-20 óra).
A vizsgálati anyag egyik hurokját szelennéit tartalmazó csőbe oltjuk (a shigella és a 370C szalmonella tárolóközeg, legfeljebb 18 óra alatt.
Töltse ki a táblázatot, jelezve az escherichiozis, a tífuszos láz, az A és B paratifóma specifikus megelőzésének és terápiájának eszközeit.
ANYAGBAKTERIOLÓGIAI KUTATÁS
- Az anyagot Gram-ból festették, mikroszkóposan festették és előzetes választ adtak.
- Egy vizsgázó anyagát 6 Petri táptalajjal tápláljuk be: Endo és Levina - az EPE izolálása; Ploskireva antibiotikummal és Ploskireva antibiotikum nélkül - a shigella izolálása; BCA - a szalmonella izolálása; SPA - a yersiniy kiosztására. Minden növényt 37 ° C-on 24 órán át inkubálunk, kivéve egy ICA-t tartalmazó csészét, amelyet 48 órán keresztül inkubálunk.
- Az anyagot beoltottuk a szelenit-tápközegbe, és 37 ° C-on 14-16 óra hosszat inkubáltuk.
- Az anyag fagodiagnosztikai (pestis, tífusz, szalmonella, polivalens shigellosis bakteriofág). gyorsított azonosítási módszer, amely lehetővé teszi az előzetes választ, de nem zárja ki a bakteriológiai kutatások magatartását.
- Egy Petri-csészében Endo (Levin's) táptalajával, 10 izolált, tipikusan az EPE telepek számára.
- Az egyes kolóniák 1/3-át ellenőrizzük az E. colihoz való tartozáshoz. a polivalens escherichia OCA-szérumra helyezett RA-on.
- Az ugyanazon telepnek a második harmadát az elsődleges azonosítási médium egyikére - Kligler, Russell vagy Olkenitsky - vitték át a generikus tenyésztés meghatározásához, és 37 ° C-on 24 órán át inkubálják.
- Az ugyanazon telep kolónia fennmaradó (harmadik) része egy tág tenyészet izolálásához és felhalmozódásához egy lejtős SPA-hoz, annak szerológiai azonosításához és 37 ° C-on 24 órán át inkubálódik.
- A kultúra elsődleges azonosítása (generikus tartozéka meghatározása) a Kligler (Russell, Olkenitsky) környezeti növekedésének természete szerint történik,
- Vegyünk tiszta tenyészetet Giss és SPB táptalajon két indikátorpapírral (indol és hidrogén-szulfid), és inkubáljuk 37 ° C-on 24 órán keresztül.
- Vetés Simmons táptalajon és inkubálás 37 ° C-on 24 órán keresztül.
- Vetés egy félfolyékony agar oszlopban és inkubálás 37 ° C-on 24 órán keresztül.
- Minta az oxidázra.
PS. Az első öt vizsgálat az enterobaktériumok minimális differenciál sorozatának tesztjeire vonatkozik.
- RA hozott üveg többértékű esherihioznymi OKA, RCF, ACS, CPR, a CKE szérumok (nemzetségbe tartozó megerősítette, és az összeget a szérumok, hogy meghatározzuk szerovariáns EPE).
- RA fel az üveget egy élő kultúra és OK-immunglobulin meghatározására K antigén és RA üvegre egy fűtött kultúra (100 ° C hőmérsékleten 30 percig vízfürdőn) és a csoportos és faktoriális O - szérumok meghatározására O - EPE antigént.
- Ha nem OK - immunglobulinok faktor és csoportban és 0 szérumokat, lehet meghatározni beállításával szerovariáns EPE telepített RA élő kultúrák és fűtött (100 ° C-on I óra) és a csoport OK - szérumok.
- Egy mintát az izolált törzs érzékenységére antibiotikumokra és 37 ° C-on 24 órán át inkubáltuk.
- Az összes teszt eredményeinek számbavétele.
- Mozgatható törzsekben az Escherichia H-szérumon lévő üvegben lévő H-antigént további meghatározzák.
- Írja le a választ (következtetés):
"Elkülönített E. coli .020: K84, érzékeny a levomicetinre és a kanamicinre, köztitermék a tetraciklinre, ellenálló a penicillinnel és az ampicillinnel."
