Kutyák kötődése és mesterséges megtermékenyítése
Néhány csepp minta hígítása után a spermát mikroszkóppal vizsgáljuk, és a hígított spermát műanyag centrifugacsövekbe öntjük, amelyeket 35 ° C-ra melegített vízben tartunk. Ezután a edényt hűtőszekrénybe helyezzük és 2 órán át 4 ° C-on tartjuk. Ez alatt az idő alatt a spermát 4-5 ° C-ra hűtik, és a glicerin, amely védő tényezőként hatol be, áthatol a spermatozoid membránján.
A spermát a hűtőszekrényből eltávolítjuk, óvatosan rázzuk, és azonnal 0,5 ml-es műanyag szalmákba (paillettes) helyezzük. Az eljárás végrehajtásához használjon speciális szívást vagy szívja be a szájat a latex csövön keresztül. A sperma elosztásakor győződjön meg arról, hogy a szalma szűrők végei között lévő por folyadékkal átitatott és megkeményedett. Először is, a szalmák feltöltik félúton, azt követően, hogy egy buborék a levegő, hozzá, nem hozott 1 cm-t a csúcsra. A légzsákok - folyók megakadályozzák a spermium transzfúziót (a leolvasztás során bekövetkező nyomásváltozás miatt). Ezt követően a szalmát lezárják.
Két alternatív mód van a fagyasztásra: kézi és automatikus. A hígítóban lévő glicerin százalékos aránya az alkalmazott módszertől függ. A kézi fagyasztás érdekében használjon egy polisztirolból készült, 30 cm x 40 x 30 cm-es, cserélhető fém polcot, 10 cm-rel az él alatt. A tartályt folyékony nitrogénnel töltötték 4 cm-re a polc alatt.
A kitöltött szalmát (8-10 max) csipeszekkel húzzuk fel, vízszintesen egy polcon helyezzük el, és 8 percig párologtatjuk a nitrogént. Ezután a csipeszeket folyékony nitrogénben lehűtjük, felemeljük és egymás után segítsük össze, hogy megvédjük tartalmuk teljes kristályosodását. Ezután a pajettes folyékony nitrogénbe merül. Az ilyen eljárást statikusnak nevezzük, mivel a hűtő- és fagyasztási periódus alatt a párologtató nitrogén állandó, ellenőrizetlen áramlása jelenik meg.
Az automatikus fagyás a készülék használatát jelenti. Ezt a módszert dinamikusnak nevezik, mivel a nitrogén elpárologtatása a különböző mélységben történik, attól függően, hogy melyik program lehetővé teszi a fagyasztási sebesség beállítását. A pajettekat vízszintes helyzetben fagyasztják egy polcon, cserélhető fedéllel, és több ilyen polc is elhelyezhető a fagyasztóban. A fagyasztási program a következő módokat tartalmazza:
• -2 0 С / min, kezdve a +4 0-tól -7 0-ig
• -50 0 / perc, -7 0-tól -100-ig
• -25 0 / perc, -100 0-tól 180-ig 0-ig.
Az eljárás befejezése után a polcot közvetlenül folyékony nitrogénbe helyezzük.
Payette felolvasztjuk, vízfürdőben (a ter-Mose) 70 „C-on 8 másodpercig. Felengedés után tegye függőlegesen szűrni, nyomtatás fedél vstryahi-vayut a légbuborék nőhet fel. Straws felboncoljuk, és számos minta cseppek feltöltött melegítjük tárgylemezre értékeléséhez sperma paramétereinek kiolvasztás után CIÓ. visszaállítása előtt mobilitás spermato-Zoid bizonyos időt vesz igénybe, általában 2 E csicseriborsó elég. annak a ténynek köszönhető, hogy a különböző laboratóriumokban használt különböző technikákat th orazhivaniya ha felolvasztás ellopta kaptunk egy bizonyos la laboratóriumaiban mindenki kapott ajánlásokat, hiszen a folyamatok fagyasztás és felolvasztás a TEN-de összekapcsolódva szigorúan be kell tartani.
Mesterséges megtermékenyítés friss spermával. Olyan esetekben alkalmazzák, amikor a természetes szilfa számos okból lehetetlen: a férfi és a nõ elég messzire él; A tenyésztő szándékozik megtermelni néhány szuka, vagy attól tart, hogy a nőstény közvetlen kapcsolatba kerül a termelővel a fertőző betegségek előfordulása miatt.
A fagyasztott sperma mesterséges megtermékenyítése
Jelenlétében friss sperma eljárás Osem-neniya töltik a napot az ovuláció, majd ismételje meg cherez2 nap. Ha Zamora-zhennoy sperma, amelyet az jellemez, SNI-zhennoy életképességet PROTSES-sy fagyasztás és felolvasztás, kiváltása révén negatív hatással a sperma akroszómális membrán és, - megtermékenyítés wasp-fected 1 -2 nappal ovuláció után, és az Auto-Rui eljárás töltse 24 óra után az első. A szérumban lévő progeszteron minták jó jelzést adnak az ovulációra. Con A központosítás progeszteron, által meghatározott rádiós immun fenn kell tartani szinten 30 nmol / l (10 ng / ml) az első napon, és 55 és 75 nmol / l (18-25 ng / ml) a második napon a megtermékenyítés. A gyors enzim immunvizsgálat alkalmas a progeszteron minőségének és mennyiségének értékelésére.
Friss spermiumot viszünk be a hüvelybe egy merev műanyag katéter segítségével, amelyet tehenek megtermelésére használunk, de a kívánt méretre rövidítve. A katéter 2-5 ml-es gumi dugattyúval van ellátva. (6. ábra). Szükséges szem előtt tartani. hogy nem minden fecskendő használható, mivel bizonyos típusú gumik toxikus hatással vannak a spermiumokra.
Ábra. 6 Három különböző típusú katéter, melyet a kutyák transzkervális méhen belüli mesterséges megtermékenyítéséhez használnak. Alatta - normál műanyag katéter a tehenek számára. a kutyák intravaginális megtermékenyítéséhez szükséges hosszúságra rövidítve.
Az injekció térfogata nem haladja meg a 3 ml nagyobb fajták és 2 ml a kis, különben a sperma kerülhessen ki a női nemi traktus. A Vulvát felemeli a jelző botkátéter. Bevezetése után a caudalis végén kaetera felvonó és ólom mentén dorsalis fala a hüvely a vaginális boltozatot annak érdekében, hogy elkerüljük az érintkezést a katéter a hólyagba, húgycsőnyílással mint található a ventrális falát a hüvely. Használt üzemeltető palpates a méhnyak a hasfalon keresztül, kijavítása a haladás a katéter. Sperma injekciót lassan, majd állni hagyjuk a nőstény csirke 10 percig helyzetben egy emelt far. Poglazhivanie terület a vulva okoz összehúzódásokat a méh, elősegítve a haladás a sperma.
Termékenyítésre a friss és fagyasztott sperma-ottayanoy belül alakított speciális anya katétert (ábra6) álló nylon-útmutató és a fémes IU katétert csatolt Spire. A technika magában foglalja a vezetőcső behelyezését a hüvelybe, egy belső katéterrel belül; után a cső hozzáér Xia vaginális boltozatot, fémkanült vyd Vigano-előre, és bevezetjük a méhnyak, Pryderi-élni vele hüvelyk- és mutatóujjával a hasfalon keresztül (ábra7).
7. ábra A kutya mesterséges megtermékenyítése méhen belüli katéterrel. Fent a katétercső van ellátva masztix megakadályozza Contamines-CIÓ a hüvelyi mikroflóra travmuslizistoyvlagalischa fém vagy katéterek.
A nyakcsatorna egyenes, enyhe lehajlással, és teljesen nyitott az extrudálási szakaszban, ezért katéter bevezetése általában nem okoz nehézségeket. Az eljárás végrehajtásához az állatot felemelik az asztalra, a szedáció általában nem szükséges (8. ábra).
A manipuláció végrehajtása bizonyos készségek jelenlétét feltételezi, 1-2 percnél hosszabb tapasztalt üzemeltetőt foglal el, és nem okoz az állatok kellemetlenségét. A méhen belüli megtermékenyítés után nem szükséges felemelni a kurva kismedencei régióját.
Annak ellenére, hogy a fagyasztott-felengedett spermium intravaginális megtermékenyítéssel rendelkezik, a legjobb eredményeket a méh-megtermékenyítésen belül biztosítják, ami emellett csökkenti a spermium adagját.
Ha katéterezés nem lehetséges, vagy az opera-tor ismeri a technikát annak végrehajtását, aján-lott a mesterséges megtermékenyítés során laparoszkópia vagy endoszkópos. Az Egyesült Államokban és Kanadában a mesterséges megtermékenyítés sebészeti módszerei a leggyakoribbak. Azonban a legtöbb európai országban az intravaginális ozméiát, valamint a katétert és az endoszkópot használó technikákat etikusabbnak tartják.
