Sterilizálása táptalaj, eszközök és segédanyagok
Amikor a tenyésztett növényi szövetek és sejtek különösen fontos sterilizáló eszközök és táptalajok. Üvegáruk vetjük alá száraz forró levegő vagy telített vízgőzt. Erre a célra több lehetőség alkalmazni sterilizálás: az ételek melegítjük egy forrólevegős kályhán, a hőmérséklet 180 ° C (30 perces expozíció) vagy 160 ° C-on (60 perces expozíció) vagy tartjuk 105 ° C-on 4-5 órán kívül, extra. sterilizálása edények halad az autoklávozás során környezetben.
Üvegáruk, amelyben a gombás vagy bakteriális fertőzés, szükséges először öblítsük le meleg vízzel és mosószerrel, majd több órán át, elegyébe öntjük krómsav ez (kálium-bikromát) volt kimutatható. Az utóbbi egy nagyon hangsúlyos oxidatív tulajdonságok. Ahelyett, hogy a króm keveréket használhatjuk nátrium-hidroxid vagy kristályos szóda. ételek majd 6-szor öblítse folyó víz, 2-szer - desztillált vizet teszünk és 2 órán át egy kemencében 105 ° C-on
Fém szolgáló eszközök izolálásához explantátumok és manipulálja őket (pengék, szikék, csipeszek) és üveg főzőpoharak, Petri-feldolgozás előtt csésze kell papír és vetjük alá autoklávban egy 2 atmoszféra nyomáson és a 121 ° C-on legalább 60 min. Sterilizálás után az összes anyag jól meg kell szárítani ejekciós.
Két fő módja a sterilizálás táptalaj - autoklávban és a szűrés. Az első esetben, az így kapott oldat öntjük előre sterilizált egy kemencében ételek tenyésztésére, majd autoklávban sterilizálunk nyomáson 0,75-0,9 atm (hőmérséklet 110-115 ° C) 20-25 percig. Először autoklávozással sterilezhetjük nagy mennyiségű közeg egy képernyőn, majd öntsük egy lamináris áramlási térben egy steril tenyésztőedénybe. Ugyanakkor véleményünk szerint, az utóbbi sokkal munkaigényesebb. Továbbá, ez a módszer a adagolására tápközegben megnövekedik fertőzés valószínűsége. Ez a szekvencia több elfogadható egy kis mennyiségű táptalajt.
A második esetben, a steril szűrő Seitz Berkefelda, Shamberlana gyertyák, membránszűrők, elengedhetetlen a készítmény egy hőmérsékletérzékeny komponenst folyadékok (néhány növekedésserkentők, vitaminokat, antibiotikumokat, aminosavak, növényi kivonatok), amelyek roncsolódnak, amikor az automatikus klavirovanii. Szűrőközeg (hideg sterilizálás) is használják a keverékek előállítására szolgáló enzimek és izolálására protoplasztokat izolálunk, a média a biológiailag aktív komponensek, a folyékony közegben.
Táptalajok tartalmazó szerves adalékanyagok, mint a kókusztej, burgonya főzet, stb Fertőtlenített szűréssel, egy speciális szűrővel diatomaföldet, olvasztott üveg, vagy cellulóz-észterek.
Azonban a teljes sterilizálást csak akkor érhető el a folyamat tyndallization, ami általában végezzük Koch berendezésben. A technika abból áll, 2-3-szoros fűtési edények vízgőz hőmérsékletre 90-100 ° C-on, 24 órás időközönként. Az első melegítési pusztulásához vezet vegetatív formák és az azt követő - a halál a mikroorganizmusok, amelyek alakultak hőmérsékleten 25 ° C-on a szklerócium között fűtés.
Tyndallization is használják sterilizálására tartalmazó táptalajon vegyületek, amelyek szétesik magas hőmérsékleteken (például, gibberellineket inaktiválódnak feletti hőmérsékleten 90 ° C-on). Ugyanez vonatkozik a cukrok, hogy caramelizing magas hőmérsékleten.
pasztőrözés idő függ az edények mennyiségétől, amelyek szórt tápoldatban. A kémcsöveket a táptalajt 15 percig sterilizáltuk 115 ° C-on Tartalmazó lombikba 100-500 ml tápközeget, fertőtlenített 30 percen át 121 ° C-on és 45 percen át 115 ° C-on Lombik, amely 500-5000 ml táptalaj és autoklávban sterilizáljuk 35-40 percen át 121 ° C-on és 50 percen át 115 ° C-on
Elmozdulás ételek ml
Sterilizálási idő 121 ° C-on (1 atm), min
Lezárását követően a sterilizáció közepes autoklávban kamrában kell fokozatosan csökkentik a nyomást és a hőmérsékletet. A fedél az autokláv kell nyitni csak azután, ha a nyomásmérő szintjén létrehozott „0”. Ellenkező esetben, a hirtelen változás nyomóközeget lehet forrni pillanatszerűen, ömlött ki a hajók, amelyekben a végzett sterilezést, és nedvesítő a fedél (amelynek következtében a további fertőzést). Ugyanakkor ügyelni kell arra, hogy az autoklávot nyomásmentesítjük a pillanatban a nyomásmérő szintjén „0”; egyébként az autokláv fedél szopni képződése miatt a nyomás gradiens. Ha ez megtörténik, akkor szükség van egy rövid (1,5-2 perc) kapcsolja a kapcsoló az autokláv, majd steriiizáiókamrába felnyitható erőfeszítés nélkül.
Tál táptalaj sterilizálás után kerül egy speciális tároló szekrény kész táptalajok és inkubáljuk 3-5 napig kimutatására gombás vagy bakteriális fertőzés.
Tömítéséhez a tenyésztőedényekbe lehet használni különböző dugók. Ma, a közös az eldobható műanyag termékek, de emellett széles körben használják a mindennapi életben szokásos doboz 250 ml-ón sapkák, Erlenmeyer-lombikokban (250 ml), és így tovább. Furat lyukak átmérője 0,5-0,8 mm, és az ón sapkák beleillesztett hab dugót (szellőztető). Ezen túlmenően, ez segít eltávolítani a nyomás gradiens, amikor sterilezett tápközeget vittünk. Ha a használt gyapot-géz dugók, akkor lehet tovább védeni a penetráció a fólia sapkák fertőzés. Alufólia nagyon könnyen kezelhető, és gyakran használják; ez biztosítja a megfelelő szellőzést a tenyészedény, és ugyanabban az időben, megakadályozza a gyors szárítás a táptalaj. Poliuretán dugók használt, hogy lezárja a csövek és a lombikokat kell először forró vízben mossuk kis mennyiségű mosószert, majd néhányszor leöblítjük csapvízzel, majd - desztillált vízben. Szárított őket hőmérsékleten 105 ° C-on 2,5-3 órán át. Egy hasonló eljárást vetjük alá, és kiterjed az alumínium fólia, ellenőrzése után a integritását
Létrehozása weboldal tervezés és fejlesztés Para-Diz.com.ua