Festési csontszövet szövettani vizsgálatokra
Feldolgozása és festés csontszövet
szövettani vizsgálatokra.
Mielőtt a csontritkulás, a csont, mint bármely szövetet, kell alávetni rögzítéséről. Választható zár függ célját és jellegét a tanulmány. Így huncut gyógyszerek és azonosítására csont fibrilláris használt komponensek tiszta formalin (15-20% -os oldat), míg a citológiai vizsgálatok előnyös bonyolult bilincsek, továbbá a formaiint tartalmazó, mert csökkenti a duzzadás mértékét szálas szerkezetek, melyek ezt követően a szövet feldolgozása ( . rögzítőt Shtive például: a higany-diklorid telített vizes - 76ml, formalin 20 ml tömény, vízmentes ecetsav és 4 ml)
Rögzítő kirakós játék, hogy ki kell vágni a kis darab csont (0,5-1 cm vastag), hiszen a nagy sűrűségű zár behatol szövet lassan. rögzítéséről idő függ a darab vastagságának (nem kevesebb, mint 48 órán át)
Végén a tárgy rögzítést alaposan mossuk folyó csapvízzel, vagy alkohol (például, miután komplex fixálókat higanytartalmú diklorid), valamint az ezt követő eljárásban savak képezhet nehezen oldható csapadékok. Ezt követően, abból a célból, zsírtalanító előállítását úgy végezzük keresztül egy sor emelkedő koncentrációjú alkoholok (50, 70 és 96%), majd koncentrációra állítjuk be a víz keresztül a lefelé irányuló alkoholok.
Dekalcifikáció érjük el csont kezelésére használva mészkõtelenítés fluidum, amelynek tulajdonságait feloldjuk a szervetlen sók károsítása nélkül a szerkezeti csont elemek.
Amikor a csontritkulás kell betartani az alábbi alapvető szabályok:
1. Vigyen nagyszámú mészkõtelenítés folyadékot, és helyette minden nap (a folyadék mennyiségét meg kell haladnia a hangerőt a tárgy legalább 50-70 alkalommal);
2. Dekaltsiniruemy elhelyezett objektumként a felső folyadékréteg, hogy csökken az alsó az oldható sók (lóg darab egy menet vagy egy pohár szitán);
3. magatartási mésztelenítés teljesen eltávolítani ásványi sók (de nem perederzhivat anyag folyadékokban, mivel ez vezet duzzanat és romlása fibrillum struktúrák festés)
Dekalcifikáció tekinthető teljesnek, ha a tárgy puha és könnyen vágható késsel és anélkül, hogy a válság. Proceedings of a folyamat lehet ellenőrizni a mértéke merítés a preparáló tűt objektumot. Forgatása a gyógyszer és nyomja nem javasolt, mivel ez károsíthatja a kényes csontozat.
Vízkőmentesítés egyetlen oldatban salétromsavat (5-7,5%), a leggyakoribb módszer. Hogy előkészítse a munkaoldat a mérőlombikban öntik 5-7,5 ml tömény reagens minőségű salétromsavat (sűrűsége 1,40), és hígítsuk 100 ml desztillált vízben (A-oldat állítható elő nagy mennyiségben: Proc, hogy kiszámítjuk a teljes kereslet). Használata alacsonyabb és magasabb koncentrációk a megoldások nem ajánlott vízkőmentesítésére csontok, mint az első oka duzzanat és vtorye- károsodását sejtstruktúrák. Magasabb koncentrációk (akár 10%) alkalmazunk csak vízkőtelenítő fogak.
Öntés a kívánt mennyiségű folyadékot egy megfelelő üvegedénybe, ez lógott egy elkészített darabját a csont csontritkulás. Az oldatot naponta cseréltük, amíg a teljes vízkőmentesítés. mésztelenítés idő függ az objektum tulajdonságait (sűrűség-érték) és koncentrációban salétromsav. Az átlagos időtartama csontritkulás kis darab kortikális csont 10-12 nap.
Az adagolás befejezése után a vízkőoldó, hogy megszüntesse a duzzanat rostszerkezetek gyógyszert szuszpendálva 24 órán át 5% -os nátrium-szulfát-oldat Na2SO4 vagy lítium Li2SO4 (hiányában az ilyen sók a csont kell helyezni egy alkohol 96%), és csak ezután óvatosan mossuk 1-2 napig folyó csapvízben.
Lerövidítheti kapjunk kalciummentesített csont, elhelyezi a közdarabot fűrészelt közvetlenül 5% triklór-ecetsav-oldatot tartalmazó 10-20% formaldehidet. Ezt az elegyet egyszerre rögzíti és vízkőtelenítési. Kis darab közepes sűrűségű vízkő eltávolítása 3-5 napig. Miután mésztelenítés után vízkőmentesítéshez alkohollal mossuk (nivkoem ESEMÉNY vízben).
Számos más módon is vízkőmentesítés, de ezek mind alapuló ugyanazt az elvet, és követelnie a meghatározott általános szabályok szerint.
Miután vízkőmentesítésére csontszövet vágható fagyasztó mikrotommal, és töltse ki celloidin vagy celloidin - paraffin a szokásos módon. Töltsük ki a viasz nem ajánlott, mert rosszul áthatja dekalcifikáltuk csont.
A leggyakoribb módszer festésére szakaszok kalciummentes csont -on SHmorlja (TIONINPIKRINOVAYA ACID).
A telített oldatot a tionin 50% -os alkohol.
B-1% -os vizes oldatot fenol.
B- telített pikrinsav.
Használat előtt az oldatot kiürítjük 1 rész (A) 10 tömegrész (B) oldat. A szakaszok pedig a vízben átvisszük 10 perc elteltével a kapott keveréket, majd desztillált vízzel öblítjük, és helyezzük 30-60 telített oldatával pikrinsav. A metszeteket azután újra öblítettük desztillált vízzel, és differenciált 70% alkoholt, amíg a sötétvörös szín. Ezt követően, azok átadásra kerülnek a 96% -os alkohol, ahol a továbbra is különbséget (ellenőrzés alatt a mikroszkóp, amíg általános háttér cutoff szerez barna (vagy mocsári) színes, és a csont sejtek és eljárások -. Vörössel festett metszeteket ezután hajtjuk végre 96% és abszolút alkohol, karbon - xilol, xilol és beágyazott polisztirol.
Ha rossz festett metszeteken miatt elhúzódó elmésztelenedés salétromsavban, először is meg kell helyezni a 2 és körülbelül 3 óra, 5% vizes ammónium-hidroxid, majd jól desztillált vízben mostuk, majd foltot.