Technika kenet készítmény
Dolgozni kell egy tiszta és zsírmentes diák és fedél üveg. Új üveg forraltuk 15-20 percig 2,5% -os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal vagy szappanos vízzel, vízzel öblítjük, és helyezzük a gyenge sósavval, majd alaposan vízzel mossuk.
A szemüveg használt és szennyezett festékek vagy immerziós olaj, lehet kezelni kétféleképpen: 1) merítse 2 órán át tömény kénsav vagy krómsav keveréket, óvatosan átöblítjük, majd; 2) forraljuk 30-40 percig 5% -os szódát, vagy alkálifém. A kezeletlen üveg zsírtalanítása, dörzsölte szappannal, majd takarítják el egy száraz ruhával.
Figyelem! Ha az üveg jól zsírtalanított vízcsepp terjed egyenletesen, törés nélkül apró cseppek.
Üvegtartályokban tárolt egy üvegdugós Nikiforov mix (egyenlő térfogatú alkohol és éter), vagy a 96% -os alkohol. Üveg megoldások eltávolítjuk csipesszel.
Figyelem! Amikor az üveg tartja az ujjait a szélén.
Anyaga kutatási alkalmazzák tárgylemezre bakteriális hurok, tű, vagy Pasteur pipetta. bakteriális hurok a leggyakrabban használt (ábra. 7) készült platina vagy nikróm izzószál hossza 5-6 cm. A hurok van rögzítve a hurokfogó vagy forrasztva üvegbottal. huzalvég hajlított formában a gyűrűk, amelyek mérete 1 × 2 × 1,5 vagy 3 mikron.
Ábra. 7. Needle vetési ciklus. 1 - tű; bakteriális hurkok 2, 3 - loop főtt rendesen; 4 - loop megfelelően előkészített
Figyelem! Megfelelően főzött hurok, amikor vízbe merítjük és kitermelése azokból megtartja a vizet film.
Elkészítése előtt munkaütem része a hurok ég a láng az égő függőleges helyzetben: már az első ciklus, majd egy fém rudat. Ez manipuláció történik, és miután vetés befejeződött.
Előállítása kenetek egy tenyészetet, folyékony tápközegben. Sovány slide éget a láng és lehűtjük. Tárgylemezre, felvittük a hordozóanyagra (Petri-csészébe rack), ami a kultúra. Tenyésztőcsövekből tartsa a hüvelyk- és mutatóujjával a bal keze. Hurok tartja a jobb kezében. Elengedése nélkül a hurok, a kisujja a jobb kezét szorítva parafa a tenyerével, és óvatosan húzza ki a csövet. Mozgások legyen sima és csendes. Torokváladék tüzelt a láng. Adjuk a hurok csőbe. Hűtsük le a hurok a cső fala majd mártott be a kultúra. Eltávolítása után a hurok, érintése nélkül a falakat annak kémcsőbe. Ledugózott korábban végző át a lángja. Tedd az ampulla a tartóba. Hurok bevont kultúra tárgylemezre, körkörös mozdulatokkal egyenletesen eloszlatjuk. Aztán egy hurok ég a láng. Kenet hagyjuk megszáradni.
Figyelem! A kenet egyenletesen kell pépesítjük, vékony és a kis (a dvuhkopeechnuyu érme).
Előállítása kenetek egy tenyészetet egy szilárd táptalajon. Tárgylemezre előállított bevont Pasteur pipettával vagy hurok csepp izotóniás nátrium-klorid-oldattal (0,9%). Kultúra óvatosan távolítsuk el a hurok az agar kémcsőbe vagy Petri-csészében és emulgeáljuk egy csepp a pohár. Az elkészített kenet legyen egységes és sűrű. Amikor megszárad a tárgylemezen egy halvány patina.
Előállítása kenetek származó köpet vagy genny. Vett anyagok egy steril pipettával vagy hurok és felvisszük a közepén a dia. Egy második bevont csúsztatható üveg az első úgy, hogy a szabad bal harmadik az első és második üveg. Üveg erővel nyomja kifelé. Kap két nagy kenetet.
Előállítása vérkenet. Egy csepp vért felvisszük egy üveg tárgylemezre a parttól egy-balról a harmadik. Ezután speciálisan polírozott üveg szélét, billenjen meg szögben 45 °, megérinti a vér csepp. Szorongatta a csiszolt üveg érdemi előre előre. Megfelelően elkészített kenet sárgás színét és fényét.
Előállítása kenetek a belső szervek hullák és az élelmiszer-szilárd állagú. A felület a szerv vagy elhervadt az élelmiszer forró szikét, és ezt a részt az kivágott anyagdarab. Csipesz óvatosan megragad a darabot, és a vágott felületet érintette a slide két - es három helyen, így egy sor kenetet.
Kenetet levegőn szárítjuk szobahőmérsékleten. Ha szükséges, meg lehet szárítani a láng égő körül, miközben az üveg vízszintes helyzetben a széleinél hüvelyk- és mutatóujja között felfelé szélütés.
Figyelem! Magas hőmérsékleten előfordulhat megsértését cellaszerkezet.
Kenetek rögzített teljes száradás után annak érdekében, hogy: 1), hogy rögzítse a mikroorganizmusok az üvegen; 2) semlegesíteni az anyagot; 3) megölt mikroorganizmusok jobban érzékelik a színeket. Rögzített kenet úgynevezett gyógyszer.
rögzítő módszerek. 1. Fizikai - az égő lángja: üveg veszi csipesszel vagy hüvelyk- és mutatóujjával háromszor végzett keresztül a felső része az égő lángja 6 másodpercig.
2. Kémiai - a folyadék: sejtes elemek kenetek a vérkenetek és az intézkedés alapján a magas hőmérséklet elpusztul, így azok valamelyikével kezelik a rögzítő folyadékok: a) metil-spirtom- 5 perc; b) etanol - 10 perc; c) keverékét Nikiforov - 10-15 perc; d) aceton - 5 min; d) sav és formalin párokat - néhány másodpercig.
A rögzítés után indul a készítmény színének.
Színező szerek, hogy készítsen egy speciálisan felszerelt asztal borított linóleum, műanyag, üveg, stb A táblázatban szükséges edény desztillált vízzel ..; Állvány a két cső vagy rúd összekötve gumicső mindkét oldalán (befogadására gyógyszerek); csipesz, hengerek, pipetta, szűrőpapír, egy sor festékeket, kapacitás lefolyni. Táblázat festés legyen mellette egy vízcsapot.
Az arány az mikroorganizmusok színezékekké nevezték színező tulajdonságai. In Microbiology anilin festékek széles körben használják. A legtöbb mikroorganizmus fogékonyabbak a bázikus színezékek.
A leggyakrabban használt a következő színezékek: vörös (bíbor bázikus, savas fuchsine, kongóvörös, semleges vörös); kék (metilén és toluidin); Violet (Gentian, metil-, kristályos); barna-sárga (vezuvin, megszerezni krizoidin); zöld (gyémánt, malachit).
Minden színezékek termelt formájában amorf vagy kristályos porok. Közülük készíteni telített oldatok alkoholt és fenolt, majd felhasználásra hidroalkoholos vagy vizes oldatok fenolos színezékek. Ha a szín kerül alkalmazásra, tömény oldatok színezékek, a termék a korábban borított szűrőpapír, amelyre a festéket. Ha ez a festék darabok maradnak a papíron.
Figyelem! pipettával csepp festék úgy, hogy lefedte a teljes előkészítése.
1. Telített alkoholos oldatokat (kezdeti):
Dye - 1 g alkoholt 96% - 10 ml
Az elegyet inkubátorba helyezzük, amíg a teljes oldódás néhány napig. Megijedt naponta. Tárolt lombik csiszolt dugóval.
2. Ziehl-oldat (saválló festés mikroorganizmusok, spórák és kapszulák):
telített alkoholos oldat bázikus fukszin - 10 ml karbolsavat 5% - 90 ml
Figyelem! Karbolsavat öntjük a festék, és nem fordítva.
Az elegyet néhány percig erőteljesen rázzuk, szűrjük, és öntjük palack tárolására.
3. Magenta Pfeiffer (Gram-festés és egyszerű festés módszer):
Magenta Tsilya - 1 ml desztillált vízben - 9 ml
A színezéket készítettünk, közvetlenül a felhasználás előtt.
4. A karbololajból genciániboíyával (Gram-festés):
telített alkohol oldat
Genciániboíyával - 10 ml
karbolsavat 5% - 100 ml
Az oldatokat összekevertük, és szűrőpapíron átszűrjük.
5. Lugol-oldat (Gram-festés-reagens és keményítő):
Kálium-jodid - 2 g kristályos jódot - 1 g desztillált vizet - 10 ml
Az elegyet egy palackba helyeztük, matt üveg, jól lezárva, és tegye egy inkubátorban egy napig, majd hozzáadunk 300 ml desztillált vizet.
6. A lúgos oldatot metilén-kék Leffler:
telített alkohol oldat Metilénkék - 30 ml kálium-hidroxid-oldatot 1% - 1 ml desztillált vizet - 100 ml
7. A papírok a kékség (Gram-festés):
1% alkohol oldat kristályibolya
Szűrőpapír csíkokat ezzel az oldattal impregnáljuk, majd szárítjuk.
festési technikák osztani indikatív (egyszerű) vagy differenciális (komplex), amely észleli a kémiai és szerkezeti jellemzői a bakteriális sejt.