gombatörzs Aspergillus niger - termelő citromsav

Felhasználás: biotechnológia, citromsav termelésére. A találmány összefoglalása: egy új termelő törzset a citromsav - Aspergillus niger BKPMF-681. A törzset kapott kiválasztási, ez egy fekete színezete a telepek, konídium -3,4-4,6 mikron átmérőjű. Rendkívül produktív biomassza formák 11,8-18,7 g citromsavat per 1 gramm légszáraz micélium. 1. táblázat.

A találmány tárgya a mikrobiológiai ipar, és a kiválasztási a gomba Aspergillus niger -produtsenta citromsav fermentációs módszer mélysége média: cukor és ásványi hidrolízisével nyert keményítőt tartalmazó különböző mennyiségű glükóz.

Ismert természetes törzs Asp gomba. niger 82 (D) termelő citromsavat fermentációs szacharóz ásványi média. A 10 napos törzs fermentációjával képezi 50-60% citromsav a töltött cukor (1). Amikor termesztett sörlé agar törzs 82 (D) képez bőséges konídium feketére festett mérete 4,3 mikron.

Ismert termelő citromsav Asp. niger S-59 (a mikroorganizmusgyűjteményből CCF 1600) a szubmerz tenyésztés olyan tápközegben, amely 15% szacharózt. 7 nap elteltével a fermentációs citromsav hozam akár 70 75% a cukor bevezetett (2).

Egy hátránya ismert törzsek 82 (E) és az S-59 viszonylag alacsony termelékenység hosszas fermentáció.

A prototípus a találmány szerinti ismert Asp törzs. niger VKPMF-501, szánt elmerült termesztés egy szacharóz-ásványi média képző citromsavat kitermelés 82,5% cukrot törzs rendelkezik egy bézs színű konídiumok (3).

Hátránya törzs VKPMF-501 annak erőteljes növekedés, költséges cukor képződése károsodás eredményül kapott biomasszát a citromsav. Mivel a bőséges növekedés hozama citromsav cukrokból kimerült tenyészetekben VKPMF-501 törzs nem elég magas.

Új törzs Aspergillus niger választottak az All-Russian az Ipari Mikroorganizmusok rendelt gyűjtőkódja VKPMF-681.

Tenyésztési és morfológiai jellemzői AZ új törzs VKPMF-681 Aspergillus niger Az 5. napon, a növekedés cefre agar óriás telep átmérője 90 mm. Töreki feketére festett. Sugarú körön belül 10 mm konidienoshenie bőséges. A többi képződött telepek konídiumszuszpenziókat főcsoportok nem túl szoros. „Steril” kolónia szélén éretlen konídiumtartói körülbelül 5 mm. A talpát kolónia központjában feszes, a perifériás része a kolónia egy vékony micélium.

10 nap után a termesztés a sörlé agar tenyészet jellemzi bőséges konidium érését. Konídiumtartói a 54h54 180h234 mikron mikron átmérőjű, átlagosan 119 mikron. Kidudorodásokat konidiofóra 34-39 um gömb vagy hosszanti elnyúló alakja van. Sterigmata kétrétegű. A hossza az első réteg sterigmata 9h2,3 11,5h4,6 mikron; sterigmata hossza a második réteg 4.6 mikron. A konídiumok kerek, azok átmérőjű szakasz -3,4-4,6 mikron, átlagosan 3,99 mikron. A héj szürke, van egy csomó tövis. Konídiumtartók egyenesek, azok hossza 240-1000 um; átlagos hossza 450 mikron. A keresztmetszet konidiofórok 19-34 mikron; átlagosan 29 mikron.

Konídiumtartók festetlen, sötét barna pigment felhalmozódik a felső része a konídiumtartója szomszédos a buborék.

Összehasonlítva a szülői törzs 82 és kezdődik egy új törzs 163/9 van a kisebb érték a morfológiai struktúrák (konidiofóra hossza, hasi konidiofóra sterigmata második réteg konidium) bézs színű, prototípus VKPM B-501 különböző sötét szürke színű konidium.

Törzs Asp. niger VKPMF-681 determináns által azonosított gombák az Aspergillus nemhez tartozó (4).

Fiziológiai és biokémiai az Aspergillus niger VKPMF-581 aerobok tenyésztési hőmérséklet 28-32 ° C, pH = 5,5 7,5.

A szén-dioxid-források: asszimilálja a glükóz, fruktóz, szacharóz, maltóz, kevesebb, mannit, galaktóz, szorbit.

Drinking nitrogénforrások: asszimilálja a szerves nitrogén vegyületek, például protein, pepton, aminosavakat, élesztő-autolizátum, karbamid, asszimilálja ammóniumsók, nitrátok.

tárolási módszer. Az új törzs tároljuk formájában légszáraz konidiumok elválasztjuk a gomba tenyészetet növesztjük sörlé agar 10 napig (6-7 napig 32 ° C-on, és 3-4 napon át szobahőmérsékleten) van közvetlen napfénytől védve.

Genetikai tulajdonság törzs prototrófiát A találmányt közelebbről a következő konkrét példákkal alkalmazásával VKPMF-681 törzs.

1. példa Egy laboratóriumi teszt inokulumot növesztünk kémcsöveket cefre agar; a poluproizvodstvennyh és tesztelése a vetőmag sejtekben szilárd táptalajon növesztett, készítettünk sörlé neohmelennogo tartalmazó 7% szilárd anyagot és a tömörített agar-agar (20 g / dm 3), pH = 5,8 közegben. A magasság a közeg 12 réteg 13 mm-es. A steril táptalajt beoltjuk a gomba konídiumával elit kultúra és inkubáljuk 32 ° C-on 7 napig. A relatív páratartalom egy kemencében fokozatosan csökken: az első négy nap, 80 és 60% -a az utolsó három nap 60-40% a teljes érés a gomba tenyészetet szobahőmérsékleten 2 napig. Miután 9-10 napig, konídiumok eltávolítható a felületekről a gombás filmek egy speciális vákuumberendezésben.

Nedves konídium szárítjuk hogy a maradék nedvesség augusztus 5% szobahőmérsékleten tároljuk.

A fermentációs eljárást hajtjuk végre laboratóriumi körülmények között egy rázógépen mély módszerrel AVU-50p számával ingadozások percenkénti 160-180. Hőmérséklet rázott szobában 32 ° C-on

Tápkörnyezet készítettünk lombik 750 ml űrtartalmú; közepes térfogat 50 ml legyen.

Kultúra a gomba termesztett sörlé agar 10 napig, vagy a levegő-száraz konidiumok (október 7 konídium / cm3 nyomtáv), oltunk be a kultúra közegbe, és tenyésztettük 2 napig a micélium inokulum, a levegő hőmérséklete a hőkamrában 30-32 ° C-on

A fő nyersanyag előállítására a média ebben a példában egy cukor.

Összetétele táptalaj (g / l): cukor 50 17 A cukorrépa melasz, ammónium-nitrát 2,5, magnézium-szulfát-heptahidrátot, 0,25 Kálium-dihidrogén-foszfát 0,16, csapvíz 1 literre, pH = 5,0 5,5.

A nagy előnye az új törzs a korlátozott növekedés és a magas hatásfok a micélium, elérve 18,7 g citromsavat per 1 gramm légszáraz 5 napig micélium fermentáció; Oxálsav formák nem törzs; tömeghányada a citromsav mennyiségének savak 94-99% -os hozammal a citromsav a cukor ciklusban töltött 84-92,5% (lásd. táblázat.).

Az új törzs nagyon sokoldalú és kínál fermentációs szacharóz ásványi hordozókkal és eredő keményítőt hidrolízis, amely 15-75% -os glükóz.

Információforrások Zhuravsky GI Mély előállítási módja a citromsav. - Microbiology, 1955 t.XXIV. 3. kötet, s.332-340.

Csehszlovák szabadalmi 202.709, cl. C 12 P 7/48. Způsob výroby kyseliny citronove submersnum zpusobem zkvasovanum cukernych roztoku pliseni Asp. niger. - Zerpold S. (CSSR), Musilkova M. (CSSR), Fencil Z. (CSSR), Ujcova E. (CSSR), Publ. 05.30.80.

Asp törzs a gomba. niger VKPMF-501 előállítására citromsavat. - V.M.Golubtsova (USSR); V.P.Ermakova (USSR); E.S.Mints (USSR); T.A.Nikiforova (USSR); A.V.Galkin (USSR); V.M.Finko (USSR); V.N.Zhdanova (USSR).

Bilai VI EZ Koval A nemzetség Asperilli -Kiev. Naukova Dumka 1988.

A gomba Aspergillus niger VKPM F-681 előállítására citromsavat.