Egészségügyi-bakteriológiai vizsgálat a víz - f
Tanulmány kötött víz:
1) központosított víz;
2) a kutak különböző típusai;
3) nyitott tartályokban (folyók, tavak, tengerek);
4) uszoda;
Megjegyzés. A mintákat a klórozott víz figyelembe fiola dechlorinators (hiposzulfit).
Víz mintavétel. A nyitott víztározók hozott speciális üvegek vagy vizes palackok ellátva Platina. A mintát vízzel ajánlott, hogy mélységben 10-15 cm-re a felszíni (mivel a felület van kitéve a légköri körülmények között), és a parttól 1,5 m-re a parttól (víz közelében a part lehet szennyezett talaj mikroflórájának).
A kiválasztás a csapvíz minták alkalmazásával steril fiolákban 500ml zárt vatta-bevont papír és zárhüvelyek.
Crane előégetjük alkoholos törlővel, majd csökkentette a vízbe 10-15 percig, és egyre fiolákban. A megtöltött ampullákat zárva steril dugóval.
Megjegyzés. Vizsgáljuk 333 ml víz (táblázat. 54).
54. táblázat: Az empirikus asztal GOSZT 16963-73
Az elosztóhálózat a vízvezeték víz mintavételt is végeznek függően élők száma a szolgáltatási területen.
Standard módszereket, a központi kutatási szabályozott vízellátást (GOST 18963-73), és tartalmazza:
1. meghatározása a mikroorganizmusok teljes számának (1 ml vizsgálati folyadék kisebbnek kell lennie, mint 100).
2. Meghatározás coli és coliform indexet titer (ha index 3, ha titere 333 vagy magasabb, nem több, mint 2, és ha több mint 500-titer coli indexe Moszkva és Leningrád).
3. Tanulmány a járványügyi jelzések patogén mikroflóra (kórokozók ne legyen kimutatható).
Meghatározása a teljes baktérium
GOST 18963-73 összes baktérium - a mikroorganizmusok számát tartalmazott 1 ml vizsgálati folyadék, amely képes éjszakán át a hőmérsékletet 37 ° C-kolóniákat formálni látható szabad szemmel (vagy növekvő egy nagyító).
Az első nap a vizsgálat
Ha a csapvíz oltunk 2 csésze tanulmány. Az egyikben 1 ml hígítatlan készítés víz egy másik 1 ml vízzel készült oldatát 10-szeresére hígítottuk (t. E. 0,1 ml az eredeti minta).
A tanulmány több szennyezett víz beoltjuk 1 ml vízzel 100-szorosára hígítottuk. Ez megfelel 0,01 és 1 ml .vody 1000-szeresére hígított (0,001 ml), és t. D. Ezek megszerzéséhez kötetek tízszeresére készített hígítási sor, és 1 ml-higitást be egy csésze és öntsük egy vékony réteg (12-15 ml ) és ostuzhennoy megolvasztjuk, hogy 45 ° C-tápanyag agar. Az egyenletes eloszlás a vizsgálati folyadék kevertetett feltöltötte agarlemezeken forgatásával őket. Megszilárdulása után agar termények valósult meg a termosztát és inkubáljuk 37 ° C-on 24 órán át.
A második napon a vizsgálat
Csészék és termények eltávolítjuk az inkubátorból, és számolja a kolóniák számát. Figyelembe véve csak a csészék, ahol a kolóniák számát 30-300. Ha a telepek egy kicsit, ők számítanak a szabad szemmel vagy nagyítóval.
Ha telepek sok, a gróf is lehet készíteni a segítségével egy speciális eszköz számlálására baktériumkolóniákat (ábra. 54).
Ábra. 54. Az eszköz számlálási mikroorganizmus telepeket. 1 - táblázat Petri-csészék; 2 - a tűt készülék egy rugóval; 3 - index számláló; 4 - kapcsoló kapcsoló a impulzusszámláló; 5 - pohár, hogy bekapcsolja a mérő lámpák
Telepeket megszámoltuk számot megszorozzuk a hígítási és megtalálja a baktériumok száma 1 ml vizsgálati folyadék.
Meghatározása coliform baktériumok
A jelenléte coliform baktériumok (Escherichia coli) indikátora a széklet szennyeződés, amelynek intenzitása jellemzi:
Coli index - száma coliform baktériumok található 1 liter vízben.
Koli-titer - a legkevesebb vizet, amelyek jelenlétének kimutatására az E. coli *.
* (Koli-titer és coli-index - egyik mutatója, különböző kifejezéseket.)
Detektálásához coliform vízben tudjuk használni a két módszer: Microtitre (fermentatív), és a membrán által szűrők.
A víz felhalmozódása vizsgálatok közeget használó glyukozopeptonnuyu (SBS) közepes indikátorral Eijkman és fermentációs csövek. A táptalajt úgy állítjuk tömény (10-szer), és a koncentrációja a normál - vetésre 1 ml vizet.
Az első nap a vizsgálat
Vizsgált víz beoltottuk 100 ml 3 lombikokba 10 ml-t, 3 cső (tömény közepes) és 1 ml 3 injekciós üveg (normál közepes koncentráció) - összesen 333 ml. Növények inkubáljuk egy inkubátorban 37 ° C-on 24 órán át.
A második napon a vizsgálat
Vegye ki a növények a sütőből, és nézni őket.
Jelenlétében homályosság a palackokban vagy fiolákban inokuláljuk hurok a szektor Endo közeget Petri-csészékben. Növények inkubáljuk inkubátorban, 37 ° C-on
A harmadik napon a vizsgálat
Vegye ki a csészét a kemencéből. A gyanús telepeket hogy kenetet. Jelenlétében Gram-negatív pálcák perbe oxidáz aktivitást. Pozitív teszt oxidáz megadja a jogot, hogy a nemleges választ.
Minta-oxidáz. 1 st módszer: A közeget eltávolítjuk a hurok Endo 2-3 telepek mindegyikét típusa és felvisszük a felületre a szűrőpapír tompított dimetilparafenilendiaminom. A pozitív reakció jellemzi kékes stroke készült a telepeket.
2. módszer: A reagens lehet alkalmazni, hogy egy izolált kolónia Endo közegben (piros kolónia - esztergálás kék) (ábra. 55).
Ábra. 55. meghatározása a víz, ha index titrálással
Negatív teszt oxidáz jelenlétét jelzi coliform baktériumok a vízben. Ebben az esetben, az index számítása coli és coliform titer standard (empirikus) GOST 16963-73 táblázatok (lásd. Táblázat. 54.).
Ezek a táblázatok tartalmazza azokat a lehetséges kombinációját növényi kötetek, amelyek az E. coli van kiválasztva.
Membrán filter módszerrel
A víz szűrésére lehet használni Goldmann tölcsér kapacitása 700-800 ml.
Az első nap a vizsgálat
Az összeszerelt tölcsérrel és szűréssel sterilezzük eszköz Seitz öntjük mért térfogatú vizsgálati folyadék. A szivattyú használata hozza létre a vákuumot a befogadóedény (jellemzően víz szűrjük át № 2 és 3). A szűrés befejezésekor vagy steril csipesszel égett a tűz eltávolítjuk szűrőn, és azt a Endo közepes Petri-csészébe, úgy, hogy a felület a mikrobák telepedett rajta felfelé (az egy csésze helyezhető membránszűrő 3-4).
Növények inkubáljuk egy inkubátorban 37 ° C-on 18-24 órán át.
A második napon a vizsgálat
A csészék a növények (szűrő), az inkubátorból eltávolítjuk. Hiánya gyanús telepeket ad a jogot, hogy a nemleges választ.
Figyelembe kell-e minden piros és rózsaszín telepek fémes fényű, vagy anélkül. A telepek do kenetet, Gram-festés (ábra. 56).
Ábra. 56. meghatározása víz által coli index membránszűrők
Jelenlétében Gram-negatív pálcák perbe oxidáz. Oxidáz pozitív mintát ad a jogot, hogy a nemleges választ. Ha negatív oxidáz mintát oltottuk félszilárd közegen glükózzal és egy kijelzést a FPC vagy fermentációs közegben a csövek - kimutatására szénhidrát fermentáció sav és gáz. A sav jelenlétében, és a gáz számított coli indexet. Például, minden szűrő Endo közegben, a kolónia nőtt 3, a szűrőn áthaladt 300 ml vizet.
Megjegyzés. A mikrotiter módszer a pontosabb és fel lehet használni a szennyeződések jelenléte a vízben. membrán filter módszerrel sokkal gazdaságosabb, és lehetővé teszi, hogy választ adjon a 2. napon.
Feltárása friss széklet szennyeződés
Annak megállapításához, a jelenléte a vízben friss széklet coliform beoltott vízzel (3 térfogat), hogy laktozopeptonnuyu közepes bórsavval. Inkubáljuk 43 ° C-on 24 órán át. A sav jelenlétében gáz és a friss jelzi széklet szennyeződés.
Szerint epidemiológiai jelzések vízben határozzuk Salmonella, Shigella, enterovírusok.
Megjegyzés. Hagyományos további mutatója bélsárszennyeződés ivóvíz az Enterococcus baktériumok. Amikor végző bakteriológiai vizsgálat meghatározza az összes csoport enterococcusok, bár egészségügyi fontossága elsősorban bélsár streptococcusok, amely felismerés egy jelzést a friss bélsárszennyeződés.
1. Mi az a fő feladata az egészségügyi mikrobiológia?
2. Mi az egészségügyi-indikatív mikroorganizmusok?
3. Mi a coli-index és coli-titer?
4. Milyen meghatározására szolgáló módszerek coliformok?
Határozzuk meg az összes mikrobák a vizsgált mintában a víz. SBS közepes (Eijkman).
GPS (Eijkman) bepároljuk. 1 liter vízben feloldunk 100 g pepton, 50 g nátrium-kloridot. Az elegyet forrásig melegítjük, szűrjük, hozzáadunk 100 g glükóz, pH-ját 7,4-7,6, és öntjük 10 ml-es lombikokat 250 ml 1 ml 3 csövekben (koncentrált tápközeg) és 1 ml 3 csövekbe, amelyek normál tápközegben koncentráció (valamennyi közeg tartályok állítottuk be, hogy a kívánt koncentrációjú steril vízzel).
Megjegyzés. Amikor tanulmányozása különösen szennyezett vizet, hogy nagy hígításban (például, 10 -6. 10 -7 és t. D.).