Történelmi fejlődési stádiuma szövettan
ELŐADÁS 1. Bevezetés a SZÖVET
Meghatározása szövettan, mint tudomány
Tárgyak kutatás szövettan
Előállítása hisztológiai preparátumokban
Történelmi fejlődési stádiuma szövettan
1. szövettan a tudomány a mikroszkópos és szubmikroszkópos struktúra kialakítását és működését szöveteiben élő szervezetekre. Ezért szövettani vizsgálatok egyik szervezeti szintek az élő anyag szövet. Vannak az alábbi hierarchikus szervezeti szintek élő anyag:
· A strukturális és funkcionális egység szervei;
Szövet-, mint tudományos diszciplína. Ez magában foglalja a következő szakaszokat: citológia, embriológia, szövettani általános (tanulmányok szerkezetét és funkcióját a szövetek), privát szövettani (a mikroszerkezetét szervek tanulmányok).
A fő vizsgálat tárgya szövettanok a test egy egészséges ember, és ezért ez a téma nevezik emberi szövettan.
A fő feladata a szövettani a tanulmány szerkezete a sejtek, szövetek, szervek, kapcsolatok kialakítása a különböző jelenségek, a létesítmény általános törvények.
Szövet-, mint anatómia utal, hogy a morfológiai tudományok, amelynek fő feladata, hogy tanulmányozza a struktúrákat az élő rendszerek. Ezzel szemben a anatómia, szövettan tanulmányok szerkezete élő anyag mikroszkopikus és elektronmikroszkópos szinten. Ugyanakkor, a tanulmány a szerkezet a különböző szerkezeti elemek vannak folyamatban, tekintettel azok funkcióit. Ez a megközelítés a tanulmány a struktúrák élő anyag az úgynevezett gistofiziologicheskim és szövettani gyakran nevezik histophysiology. Ráadásul a vizsgálat élő anyag a sejtek, szövetek és szervek szintjén tekinthető nemcsak az alakja, mérete és elrendezése a szerkezet az érdeklődés, de cito- és hisztokémiájának gyakran összetétele határozza meg és anyagok alkotó ezeket a struktúrákat. Végül szerkezetének tanulmányozására szokták tekinteni, tekintettel azok fejlődését, mind a méhen belüli (embrionális) időszak alatt a poszt-embrionális egyedfejlődés. Ez magyarázza a szükségességét, hogy a szövettani embriológia során.
Szövet-, mint minden tudomány, saját céljai és módszerei a tanulmány. Közvetlen tárgyak tanulmány sejtfragmentumok a szövetek és szervek különleges módon elkészített tanulmányozni őket mikroszkóp alatt.
2. A tárgy kutatási vannak osztva:
· Living (sejtek egy csepp vért, sejtek tenyészetben, stb);
· Dead or rögzített, amely lehet venni, mint a test (biopszia) és állati tetemeket.
Mindenesetre, miután a darabokat ki vannak téve a fixáló oldatot vagy fagyasztás. Valamint a tudományos és oktatási célokra használják a rögzített tárgyak. Főtt egy bizonyos módon gyógyszereket használnak mikroszkópos vizsgálatra, az úgynevezett szövettani készítmények.
Szövettani készítmény lehet a formában:
· Vékony színes szerv vagy szövet részben;
· Smear az üveg;
· Nyomtatás az üveg törés a test
· Vékony film a kábítószert.
Hisztológiai készítmény bármely formájának meg kell felelnie az alábbi követelményeknek:
· Tartsa élettartam állami struktúrákat;
· Legyen kellően vékony és átlátszó, hogy tanulmányozza azt mikroszkóp alatt áteső fényben;
· Legyen a kontraszt, azaz szerkezetének tanulmányozására mikroszkóp alatt egyértelműen meg kell határozni;
· Előkészítés fénymikroszkópos fenn kell tartani sokáig, és használni az ismételt vizsgálatra.
Ezeket a követelményeket érjük a készítmény előállítására.
3. kiosztása sleduyuschieetapy előállítására szövettani előkészítés
A befogó anyagot (darab szövet vagy szerv) a készítmény előállításához. Ez figyelembe veszi a következőket: egy kerítés anyag kell végezni a lehető leghamarabb halála után, vagy az állat levágását, és ha lehetséges az élő tárgy (biopszia), hogy jobban megőrizte szerkezetét a sejt, szövet vagy szerv; darab a kerítés kell tenni egy éles eszköz, hogy ne traumatize szövet; szeletvastagság nem haladhatja meg az 5 mm-, hogy a rögzítő-oldatban is behatolnak a belső tér egy darab; szükségképpen egy darab jelölés (adja nevét a szervezetben egy állat vagy egy ember számot eredetű, a mintavétel időpontja, és így tovább).
A rögzítés anyag szükséges, hogy állítsa le az anyagcsere-folyamatokat, és megőrzi a struktúrák a pusztulástól. Rögzítés érjük merítéssel gyakran darab rögzítő folyadék, amely lehet egyszerű alkoholokat és a formaldehid és a komplex Carnoy-féle oldat, és más Tsinker rögzítőt. A rögzítő okoz fehérje denaturációt, és ezáltal felfüggeszti anyagcsere-folyamatok és tárolja a szerkezet az állam életében. Fixation lehet elérni is fagyasztással (hűtés áramban CO2, folyékony nitrogén, stb). Időtartam rögzítés kiválasztott empirikusan egyes szövetek vagy szervek.
Kitöltése darab tömítő közegben (paraffinviasz, celloidin, gyanta) vagy fagyasztva későbbi előállítására vékony szeletekre.
Előállítása szakaszok speciális eszközök (mikrotomkés vagy ultramikrotóm) speciális késekkel. Metszeteket fénymikroszkóppal ragasztott üveg csúszdák, és elektronmikroszkópos - szerelt különleges háló.
Színező vagy kontrasztos szakaszok (elektronmikroszkópos). Festés előtt szakaszok eltávolítjuk tömítő közeget (viaszmentesítésével). Színkontraszt a szerkezetek nem érjük. Színezékek vannak osztva bázikus, savas és semleges. bázikus színezékek (általában hematoxilin) és savas (eozin) alkalmazzák a legszélesebb körben. Gyakran használja komplex színezékek.
Ébredés szakaszok (xilol, toluol), megállapítva a gyanta (balzsam, polisztirol), záró egy fedőlemezzel.
Ezek után az egymást követő gyógyszeres kezelések is tanulmányozható a fénymikroszkóp alatt.
Céljára elektronmikroszkópos az előkészítő szakaszában gyógyszerek néhány jellemzője, de az általános elv ugyanaz. A fő különbség abban rejlik, hogy a szövettani felkészülés fénymikroszkóppal lehet tartósan tárolni és újrahasznosítani. Metszeteket készítettünk elektronmikroszkópos csak egyszer használható. Ebben az esetben először fényképezte a fontosabb tárgyak a gyógyszer, és a tanulmány a struktúrák végzik már az elektron.
Folyékony állagúak a szövetekből (vér, csontvelő, stb) készülnek formájában készítmények kenetet üveg tárgylemezre, amely szintén rögzítettük, festettük, majd vizsgáltuk.
Tól elszakítható parenchymás szervek (máj, vese, stb) készülnek formájában készítmények test lenyomata: után törési hézag vagy szervben szervi hibahely alkalmazott tárgylemez, amelyre vannak ragasztva néhány szabad sejtek. A készítményt ezután rögzítettük, festettük és vizsgálták.
Végül, néhány, a szervek (bélfodor, Pia), vagy a laza kötőszövet készítmények készülnek nyújtás a film vagy zúzás a két üvegtáblák, és ezt követő rögzítését, festést és szakadó gyantába.
· Fénymikroszkópia (felbontás 0,2 mikron), a leggyakoribb típusú mikroszkóp;
· Ultraibolya mikroszkópia (felbontás 0,1 mikron);
· Fluoreszkáló (fluoreszcein) mikroszkópia, hogy meghatározza a vegyi anyagok e struktúrák;
· Fáziskontraszt mikroszkópos vizsgálatával kapcsolatos struktúrák festetlen szövettani metszetek;
· A polarizációs mikroszkóppal, hogy tanulmányozza, főként szálas szerkezetek;
· Sötét látóterű mikroszkóppal a tanulmány az élőlények;
· Mikroszkóp a beeső fény a tanulmány a vastag tárgyak;
· Elektronmikroszkópos (állásfoglalást 0,1-0,7 nm), a két variáns áttetsző (átvitel) elektronmikroszkóppal és scanning mikroszkóppal vagy raszteres térképezés ad ultraszerkezetek felületre.
Hisztokémiai és citokémiai eljárásokkal lehetővé teszi, hogy meghatározzuk a készítmény a vegyi anyagok és ezek mennyiségét, még a vizsgált struktúrák. A módszer alapja az elvégzése kémiai reakcióba az alkalmazott reagensekből és a vegyi anyagok a szubsztrátum reakcióterméket alkot (kontraszt vagy fluoreszcencia), amely ezután úgy határozzuk meg világos vagy fluoreszcens mikroszkóppal.
differenciális centrifugálással a módszer lehetővé teszi számunkra, hogy tanulmányozza az egyes organellumok vagy származó fragmentumok a sejtben. Erre a szelet vizsgálandó szervet eldörzsöljük, öntsük normál sóoldat, majd diszpergáljuk egy centrifuga különböző sebességgel (2-től 150-ik.) Ahhoz, hogy a számunkra érdekes frakciók ezután vizsgáltuk különböző módszerekkel.
interferometria módszerével tömegének meghatározására a száraz anyagok élő vagy rögzített tárgyak.
Immunomorfologichesky módszerek lehetővé teszi az előre immunreakciók végzett alapján az antigén-antitest kölcsönhatás, hogy meghatározzuk egy szubpopulációja limfociták mértékének meghatározására idegenség sejtek végezzen szövettani tipizálása a szövetek és szervek (meghatározza hisztokompatibilitási) szervátültetés.
Módszere sejttenyészet (in vitro, in vivo) a sejtek tenyésztése in vitro vagy in speciális kapszulák egy szervezetben, és későbbi vizsgálatban az élő sejteket mikroszkóp alatt.
Az egységek használt szövettani
Ahhoz, hogy mérjük a struktúrák fénymikroszkóp segítségével főleg mikrométer: 1 m értéke 0,001 mm; a elektronmikroszkópia nanométer használt 1 nm-en 0,001 mikron.
5. A történelem szövettan hagyományosan három periódusra osztható:
Domikroskopichesky idő (IV. BC. E. 1665 YG) társított nevek Arisztotelész, Galen, Avicenna Vesalius, azzal jellemezve Fallopian és izolációs kísérletek állatokban és emberekben inhomogén szöveti (kemény, lágy, folyékony, és így tovább) és eljárások alkalmazásával a boncolással.
Különös figyelmet fordítottunk a tanulmány a sejt szerkezetét. Yang Purkinje jelenléte leírt állati sejtekben „protoplazma” (citoplazma) és a sejtmagban, és a később megerősítette a jelenlétét R. Brown mag és a legtöbb állati sejtekben. Botanist M. Schleiden érdekelt kletoktsitokenezisom eredetű. Az eredmények ezen vizsgálatok lehetővé tették T. Schwann, alapján azok az üzenetek, cell elmélet megfogalmazott formájában három posztulátumok (1838-1839 gg.):
· Minden növények és állatok sejtekből áll;
· Minden sejtek fejlődnek az általános elv tsitoblastemy;
· Minden cellában van egy független létfontosságú tevékenység, és a szervezet létfontosságú funkcióit az összege a sejt aktivitást.
Azonban röviddel Virchow (1858), azt mondta, hogy a fejlődés a sejtek végzik elosztjuk az eredeti sejtek (bármilyen sejt a sejt). Által tervezett T. Schwann rendelkezések cell elmélet releváns a jelen, bár megfogalmazott másképp.
A jelenlegi helyzet a sejt elmélet:
· A sejt a legkisebb egység az élet;
· Állati szervezetek sejtek hasonló szerkezetük;
· Sejtek szaporodását előfordul, hogy elosztjuk az eredeti sejt;
· Többsejtű szervezetek komplex részegységek a sejtek és származékaik egyesítjük a szövetekben és szervekben rendszerek összekapcsolt celluláris, humorális és neurális szabályozási formákat.
· További javulást mikroszkópok, különösen létrehozása akromatikus lencsék, kiderült sejtekben kisebb szerkezetek:
· Cell Center Hertwig 1875..;
· Mesh lemez berendezést, vagy a Golgi komplexen 1898.;
· A mitokondriumok Benda, 1898
A jelenlegi fejlődési szakaszában Szövet- kezdődik 1950 eleje óta a használata a elektronmikroszkóp a tanulmány a biológiai objektumok, bár az elektronmikroszkóp feltalálója korábban (E. Ruska, M. Knoll, 1931). Azonban a jelenlegi fejlődési szakaszában jellemzi a bevezetése szövettan, nem csak az elektronmikroszkóp, hanem más módszereket: cito- és hisztokémiai, gistoradiografii fenti és más modern technikák. Ez általában használják a különböző komplex technikák lehetővé teszik, hogy ne csak a minőségi képet a vizsgált struktúrák, hanem hogy pontos mennyiségi jellemzőit. Különösen széles körben használják jelenleg különböző morfometriai módszerekkel, beleértve az automatizált információ feldolgozó rendszer használatával kapott számítógépeket.