Tárgy mikrobiológiai diagnózis tífusz, és - egy workshop Orvosi Mikrobiológiai és

TÉMA: mikrobiológiai diagnózis a tífusz és paratífuszt.

Célkitűzés: A tanulmány módszerével bakteriológiai kutatás tífusz és paratífusz az 1. héten a betegség.
Tífusz, paratífusz A és B - akut fertőző betegségek, hasonló a klinikai megnyilvánulásai, patogenezisében, biológiai tulajdonságok, azzal jellemezve, elváltozások nyirokrendszer a vékonybél, bacteriaemia fordulnak elő súlyos intoxikáció, megnagyobbodott máj, lép, gyakran roseolous bőrkiütés. Ezért tekintik őket együtt. De ez független a betegség. A kórokozó a tífusz Salmonella typhi (Ebert-Gaffki coli), paratífusz A - S.paratyphi A (stick-Brion Kaiser); gerjesztő Paratyphi B - S. raratyphi B (bot Shotmyullera) nemzetségbe tartoznak, Salmonella Enterobactericeae család. A nemzetség nevét kapta tiszteletére az amerikai tudós J. Salmon.

Ez a kis rúd, lekerekített végekkel, peritrich, spórákat és nem képeznek kapszulákat, gramm.

Salmonella tífusz és paratífusz - fakultatív anaerob. Az optimális növekedési hőmérséklet 37 ° C-on a számukra. MPA formájában kör alakú, kupolás, nedves, sima S-formában kolónia. S.paratyphi B (Shottmyullera coli) nőhet nagy telepeket nyálkahártya hengerrel kerületileg. A differenciál-diagnosztikai média Endo és Levine Salmonella telepek színtelenek, kékes árnyalattal, közepes-Wilson Blair (bizmut-szulfit agar) redukáljuk, nátrium-szulfit, hogy a nátrium-szulfid - fekete vagy barna-zöld; okozhat még homályos BCH. Röviden száma Hiss Salmonella typhi elbontjuk glükóz, maltóz, mannit sav addig, amíg gáz, de parathyphoid rudak - a sav és gáz.

Salmonella tífusz és paratífusz A megsavanyítjuk és paratífusz a schelochat Lakmusz. Zselatin nem cseppfolyósított, nem képeznek indol, termelnek H2 S.

Salmonella tartalmaznak egy hőstabil szomatikus O-antigén, flagelláris, H-labilis antigén. Az általánosság antigénstruktúráját vezet az a tény, hogy a szalmonella tífusz és paratífusz összeragadt nemcsak homológ, hanem a kapcsolódó antiszérumok. Hogy megszüntesse kereszt-agglutináció-csoport, előkészített monoretseptornye tartalmazó szérum elleni specifikus antitestek Salmonella frakciókat. Kórokozók partifov tífusz és A és B antigén tulajdonságokkal rendszer Kaufman-fehér.

A forrás a betegség - beteg emberek és a média.

átviteli mechanizmus: széklet-orális. Víz uralja az átviteli út kevésbé gyakori élelmiszer és háztartási érintkező módon.
3. táblázat

Reakcióvázlat patogenezisében typhi

Lehetséges kimenetele a tífusz:

  1. Teljes gyógyulás;

  2. Kapcsolatos komplikációkat fejlesztése fekélyek, perforáció, bélrendszeri vérzés.

  3. Mozgó bacteriocarrier.

A lappangási idő a tífusz átlagosan 14 nap. A betegség kezdete jellemzi fokozatos hőmérséklet-emelkedés során a növekvő jelenségek endotoxin mérgezés érinti az általános gyengeség, fejfájás, zavartság, álmatlanság, delírium. A végén az első héten a betegség a test hőmérséklete eléri a 40-41 ° C-on A második héten a betegség a bőrön a has jelenik roseolous bőrkiütés, tünetei enterocolitis kifejezve. A kiválasztó-fázisú allergiás nyirokszövet tüsző és plakk megy nekrózis, ami oda vezethet, hogy a további bélperforáció, peritonitis és halál (3-4 héttel a betegség). Lehetséges szövődmények: tüdőgyulladás, szívizomgyulladás, toxikus sokk.

Vizsgálati anyag stádiumától függően patogenezis (a 3. táblázatban felsorolt).

Táptalajok: az epe húsleves, Rapoport környezetben (Gall húsleves, glükózt vagy mannitot, Andred indikátor). Az epe kedvező környezetet Salmonella. Differenciáldiagnosztikai közepes Ploskireva, Endo, Levin.

Attól függően, hogy a fázis a betegség kialakulásának, a diagnosztikai módszerek eltérőek. Az első héten a betegség, hogy tanulmányozza a vér és vért vesz kultúrák izoláljuk. A második héten a betegség, amikor a vér jelenik antitestek így Widal reakció - részletes agglutináció, hogy meghatározzuk szérum antitestek a beteg. A harmadik héten a betegség - a diagnózis megerősítésére a tanulmány figyelembe a székletben vagy a vizeletben, és a széklet kultúra vagy izolált urinokulturu.
Önálló munka a diákok

  1. Ahhoz, hogy tanulmányozza a bakteriológiai vizsgálatok a vér áramkör a beteg tífusz (№2 rendszer).

  2. Végre a beteg vérével kultúra tífusz a epe húsleves vagy közepes Rapoport.

  3. Újraoltottuk táptalajjal Rapoport szerdán Endo.

  4. Színtelen telepek Endo közegben, hogy készítsen egy kenet, Gram-festés, promikroskopirovat, vázlat. Újraoltottuk színtelenek Russell környezetre vagy ferde IPA.

  5. Fedezze fel a kultúra tisztaság a környezet Russell ferde vagy az IPA. Növénytermesztésére IPA meghatározására érzékenység antibiotikumok kultúra papírkorong módszerrel, a tápközeg Hiss vagy MTS-12E, a BCH, hogy meghatározzák a biokémiai és proteolitikus tulajdonságait.

  6. Készítsen agglutinációs reakciót az üveg a tiszta tenyészet polivalens és monoretseptornymi szérumok.

  7. Leltárt készít „tarka sorozat” vagy MTS-5 - 12E (a demók). Számviteli antibiotikogrammy.

  8. Jelentést készít bakteriológiai vizsgálat során a beteg vérét gyanúja tífusz és mondjon véleményt.

  9. Ábra bakteriológiai vizsgálata ürüléket a beteg gyanúja tífusz.

Irányelvek az önálló munkavégzésre

Bakteriológiai vizsgálata tífusz az első héten a betegség tartott több szakaszban.

1. nap - 5-10 ml vért veszünk egy véna a beteg steril az ágy mellett vetni 50-100 ml epe húsleves vagy szerdán Rapoport. Növények kerülnek inkubátorba helyeztük egy napon át 37 ° C-on

Rapoport közeg valamilyen hús-pepton húsleves, 10% epe, 2% glükózt, vagy 1% mannitot és 1% Andred indikátor. Amikor nőtt egy közepes S. typhi Rapoport jelölt zavarosság, bőrpír, nincs gáz. A növekedés. S.paratyphi A és B, a közegben a piros, ennek eredményeként a gázképződést úszók lebegnek.

2. nap. Rapoport szubkultúrákat közepes Endo közepes és inkubátorba helyezzük egy napon át 37 °.

3. nap. színtelen telepek nőnek a közepes Endo (mert nem laktózfermentálási), hogy újraoltottuk Russell közegben izolálására a tiszta tenyészet.

4. nap. Növénytermesztésére miatt Russell környezet tisztaságának meghatározására a kultúra. Russell egy közepes nem bomlik laktóz (piros közepes), glükózt elbontjuk (kék közepes). Kultúra Net. Készítsünk kenetet, színes Gram, mikroskopiruyut meghatározza a mobilitást. A kenetet a Gram-negatív pálca, közepes méretű, lekerekített végekkel, mozgékony, peritrich.

A tiszta tenyészet így indikatív agglutinációs reakció diagnosztikai agglutináló sera tífusz, paratífusz A és B sera, hogy pozitív agglutinációt kaptunk reakciót, adj telepített. Pure tenyészet táptalajra szélesztjük Hiss vagy MTS-5U, hogy meghatározzuk a biokémiai tulajdonságainak a hús-pepton húsleves - proteolitikus ingatlan a MPA - az antibiotikum rezisztencia és azonosítása kapcsolatokat tífusz bakteriofág.

A média Hiss lebomlanak glükóz, maltóz és a mannit, hogy a savas gáz nélkül. Laktóz és szacharóz nem bomlanak. A MPB felszabadult hidrogén-szulfid. A kultúra érzékeny bizonyos antibiotikumok és lizált hatására tífusz bakteriofág. Expanded agglutinációs teszt pozitív a szérummal a tífusz.

Készítmények specifikus terápia és megelőzésére tífusz és paratífusz A és B


Jelzések


Bakteriofágok - a szűrletet fagolizatov Salmonella typhi


Kezelésére és megelőzésére a sürgősségi


Immunity nem hoz létre hatásmechanizmusa - specifikus lízis baktériumok vírusok

Kérdések az önuralmat

  1. Mi a kórokozók a tífusz és paratífuszt.

  2. A különböző Salmonella typhi Salmonella paratífusz A és B a biokémiai tulajdonságok?

  3. Mi az antigén szerkezete kórokozója a tífusz?

  4. Pathogenesis typhi (a betegség stádiuma).

  5. Milyen anyagból kell venni a beteg korai diagnózis a tífusz és hogyan ezt az anyagot vizsgálni?

  6. Mi az a tápoldat összetétele Rapoport?

  7. Milyen anyagból készítették bakteriológiai vizsgálat a beteg gyanúja tífusz 3-4 héttel a betegség?

3. ülés
TÉMA: mikrobiológiai diagnózis a tífusz (folytatás). Szerológiai diagnosztizálására tífusz. A szerológiai és kimutatási lábadozók bacillicarriers reakció segítségével passzív Vi-hemagglutináció meghatározására szérum Vi-antitestek. Diagnosztikai értéket titer passzív Vi-haemagglutination 01:40 és magasabb.
Önálló munka a diákok

  1. Készítsen Widal reakció rendszer.

  2. Tedd agglutinációs Vidal diagnosztizálására tífusz és paratífuszt.

  3. Vidal leltárt készít a reakció a minta adatok, hogy véleményt.

  4. Tedd TPHA (RNGA) - passzív reakció (közvetett) a vörösvérsejt-hemagglutináció diagnosztikum.

  5. PHA-t termel venni, véleményt ad.

Irányelvek az önálló munkavégzésre

Ahhoz, hogy a kar Widal reakció vért vesznek egy ujj vagy egyetlen tűt a ulnaris véna mennyiségben nem kevesebb, mint 1-1,5 ml elején a második héten a betegség. A vért egy steril kémcsőbe, melyet inkubátorba helyeztük 30-60 percig. A alvadékot elválasztják a falak, a csőbe Pasteur pipettával, a csövet hűtőszekrényben. Ülepítés után a szérumot leszívjuk, és termelésére használt reakció.

A szérum steril sóoldattal hígítottuk, 1:50 és 1: 800. A reakció során két kontroll: Az első kontroll csoport - kontroll antigénnel (CA) tartalmaz egy sóoldatot (1 ml) és diagnosztikum (2 csepp); második kontroll - kontroll szérumot (KS), amelyek 1 ml szérumot 1:50 hígítást. Monitoring legyen teljesen átlátható.
5. táblázat

Widal reakcióvázlatban stádium


Hozzáadása után diagnosticums csöveket összeráztuk, és inkubátorba helyezzük egy napon át 37 ° C-on

A reakciót lezõen +. ++++ - élesen pozitív, +++ - pozitív ++ - kétes - negatív.

A magasság a titer agglutinin nem lehet bizonyíték a betegség. Megbízható eredmények érhetők el agglutinációs vizsgálat ismételt szérum időközönként 5-7 nap. Egyértelmű növekedés titer agglutinációs jelenlétét jelzi a fertőzés.

A reakció kimutatására bacillicarriers lábadozók passzív Vi-haemagglutináció, amellyel meghatározzák Vi-antitestek a szérumban. Mivel az antigén használt Vi-eritrocita diagnosztikum, amely szuszpenzió a humán eritrociták I (0) a kezelt csoportban formaiinnal és Vi-antigén szenzitizált tífusz baktériumok.

Ujjhegytől hogy 1 ml vér. Beállítása előtt reakciók vizsgált szérumok melegítjük 56 ° C hőmérsékleten 30 percig, hogy elpusztítsa a csoport agglutinin.

Reakcióvázlat passzív haemagglutináció


Egy kemencében a hőmérséklet 37 ° C-on 2 órán át.

Megjegyzés. hemagglutinin titer szérum 1:80.
Agglutinációs reakció került a kémcsövek vagy kutak polisztirol lemezek. A szérumot hígítjuk 1:10 és 1: 160 - 1: 320. Eritrocita diagnosztikum alaposan meg kell rázni, és adunk minden lyukba 0,5 ml. Lune csövek és inkubátorba helyezzük egy és másfél-két órán át 37 °. Elszámolása a reakciót nem korábban, mint a pillanat eritrocita ülepedési a kontroll csövekben (2 órán át), és 24 óra elteltével ismét át szobahőmérsékleten állni hagyjuk.

Kezelőszervek:

  1. Stádium a reakció az adszorbeált monoretseptornoy Vi-szérum. A reakciót úgy kell pozitív szérum titert, hogy korlátozzák a címkén az ampulla.

  2. Stádium a reakció O-szérummal és sóoldattal. Az eredmények negatívnak kell lennie.

A pozitív reakció jellemzi hemagglutinációs vörösvérsejtek üledék alján lune vagy fiolák formájában „esernyő” csipkézett végei. Amikor negatív válasz, mint a kontroll, a vörös vérsejtek rendezi és kompakt csapadékot van a korong formájú, sima élek és sima felület ( „gombok”) (6. táblázat). Diagnosztikai értéket titer passzív Vi-haemagglutination 1:40 és nagyobb.
Kérdések az önuralmat

  1. A mi héten a tífusz tegye Vidal reakció?

  2. Ezért, amikor a szerológiai diagnózis a tífusz használt O és H antigének?

  3. Mi az anamnesztikus, fertőzés, oltás Vidal?

  4. Határozza meg a diagnosztikai módszerek tífusz hordozó állapot.

  5. Mik az alkalmazott gyógyszerek egyedi megelőzésére tífusz.

A program előkészítése vizsgálatok Orvosi Mikrobiológiai és virológiai.
L. Pasteur, az alapító a tudomány a mikrobiológia. A hatás a munkáját Pasteur fejlesztésére irányuló orvosi mikrobiológia

Módszertani útmutató a laboratóriumi munka a General Microbiology.
Laboratóriumi vizsgálatok A mikrobiológia, virológia és immunológia kezdeni megismertetik a hallgatókkal a szervezet mikrobiológiai és logikus.

Veleszületett toxoplasmosis és megelőzés (segíteni az előadó)
Docens, Mikrobiológiai Tanszék, immunológia és virológia DSMA Saidov MS docense OMZ és létrehozása DSPU Rabadanova PM helyettes.

orosz Föderáció
Sevcsenko AA doktor, Állatorvos-tudományi egyetemi tanár, Mikrobiológiai Tanszék, Virológiai és epizootology Kuban államban.

A tanfolyam és a kezelés a mikroorganizmus ekcéma a lakosok a Arhangelszk régióban
Munkavégzésnél székek Bőr és nemi betegségek Mikrobiológiai és Virológiai és Immunológiai SEI HPE