Hogyan látja DNS technológiával „egyebeket”

Örökletes, géneket, DNS # 133; Úgy tűnik, hogy ezek a szavak már régen megszűnt a tudományos kifejezés, a mindennapi életet, és most, hogy minden ismerős vezető, nem is beszélve a diákok. De nem a DNS, a legtöbben még soha nem látott, bár látni - ez az igazi, akár otthon. Az egyik genetikai laboratóriumokban a falon, például úgy, hogy ez az utasítás:

Hogyan érhetem el, hogy a legtöbb DNS

1. Talál valamit. amely tartalmaz egy csomó DNS-t. Például, zöldborsó (de lehet csirkemáj, Milt selodochnye vagy íj).
2. Tedd be a keverőbe körülbelül 100 ml (fél csésze) ennek a terméknek, adjunk hozzá 1/8 teáskanál só és 200 ml (csésze) hideg vízben. Habverővel 15 másodpercig. Mixer „szakács” a borsó-sejt leves.
3. Törzs keverék egy szűrő, vagy egy darab nylon (Állománysűrűség igen alkalmas). Az így kapott pépet hozzá 1/6 annak mennyisége (ez lesz kb 2 evőkanál) folyékony mosószer termékek (mosogatószerek. Például), és jól összekeverjük. Hagyja 5-10 percig.
4. Öntsük a folyadékot a tubusból vagy más üvegedénybe, amely tele volt minden nem több, mint egy harmadik térfogattal.
5. Mindegyik kémcsőbe egy kicsit, vagy a facsart ananász, megoldás kontaktlencsék és finoman rázza, esztergálás és hajlító cső (ha lesz rázzuk túl erőteljesen, break DNS-t és nem fog látni semmit).
6. Döntés a csövet, és lassan öntsük, hogy egy kevés etil-alkohol, hogy az egy réteg tetején a borsó keverék. Leyte, és az alkohol, amíg a keverék nem egyformán. DNS bukkan fel a pehely.
7. A fa bot (ceruza) elkapják, és megvizsgálja a mikroszkóp alatt.

Természetesen, ez a tudományos dolgozók utasítás - bizonyos mértékig egy vicc, és egyikük sem oly módon DNS nem termel, és ha igen között valóban kihasználják azt, sikerülni fog! DNS-visszanyerő azonban kicsi, és az anyag - nem különösebben tiszta, de láttam egy mikroszkóp hosszú, vékony szálak - DNS kristályok - ez nagyon is lehetséges.

Mi történik, zöldborsóval vagy csirke gras alatt manipulációk le, és miért a végeredmény DNS elkülönül az egyéb anyagokat, a sejtben nagyon sok?

1. Válassza ki a Tárgy

DNS Ismeretes, hogy a minden sejtben, ami azt jelenti, hogy válassza ki bármely anyagból - még az állati csontokból, hal pikkelyek vagy fa, ahol a cellák nem annyira képest a kötet az extracelluláris mátrix.

Általában, ha az első a kutató nem érdemes semmilyen különleges problémát, megkísérli, hogy kiválassza a szövetben, amelyben az extracelluláris kevés anyag és sokan maguk a sejtek. Továbbá, kívánatos, hogy a szövet könnyen esnek ezeket a komponenseket, és a sejteket nem túlterheltek fehérjék (mint az izom). lipidek (például zsír) vagy poliszacharidok (mint az agysejtek).

2. frakciókat szöveti sejtek

A keverő szövet, amelyből fogunk kivonat az anyag, az öröklődés, hasad külön sejtek mechanikusan megtörni a kapcsolat közöttük van szükség, mint általában, sokkal kevesebb erőfeszítést, mint a kár, hogy magát a sejtet. És mint a kiválasztási módszer, a DNS több mint szükséges, vagy kevesebb, mint a teljes, ép sejteket, egyértelmű, hogy a konzerv zöldborsó vagy sózott hering ilyen kísérletek nem működik - akkor jobb, hogy valami friss fagyasztott, ha biztos benne, hogy a termék felolvasztjuk egy kevés tárolási idők.

Egy kevés kell sózzuk az oldathoz, hogy ne robbant a sejtek idő előtt: a belső nyomás a tartalmát belül a sejtmembrán ekvilibráltuk sóoldattal külső nyomás.

3. makromolekuláris kibocsátások

Ami a szűrés, szükség van annak érdekében, mechanikusan eltávolítani a sejt rendezi zagy szennyeződéstől, ideértve a darab nagy szövet - mindegy anyagokat fogunk feldolgozni a keverék nem lesz képes, hogy mélyen behatolnak ilyen konglomerátumok, és a DNS kivonására ezek használhatatlan lesz.

Az eredmény az ilyen feldolgozás a teljes tartalmát a cella és a lenne kidobják, hogy a külső az oldatban válik, hogy ez nagyon viszkózus és nyúlós lényegesen átláthatóbb, mint volt, a sejtszuszpenziót. Módosítása az összhang a megoldás - a biztos jele, hogy a lízis sikeres volt.

nem túl sok, öntsük az oldatot a tartályba, még mindig vannak felöntjük egy csomó, amellett, ha a keveréket feleslegben van, nehéz lesz keverjük.

5. mentesül a fehérjék

Ami nem csak a mi mix! A proteinek azonban - legfőképpen, velük ez a legjobb forma erős komplexeket DNS. Vannak technikák, ahol fehérjéket eltávolítjuk az oldatból több szakaszban. Például, néhány közülük könnyen denaturáljuk és kicsapjuk a tömény sóoldatok. A laboratóriumi körülmények között, ilyen módszerek jól működik, és az üledék, a kutatók megjelent, a kémcsövet által forgalomba néhány percen át centrifugáljuk. Mindezek után, többé vagy kevésbé nagy sejttörmelékeket, denaturált fehérjék és egyéb szennyeződéseket az alján, amely egy nagyon vastag csapadék, és a felülúszót öntjük egy másik kémcsőbe tartalmazó folyadék elsősorban nukleinsavat - DNS-t vagy RNS-t - nem működik. Ugyanakkor a feltételek az otthoni tisztítási fokozatot mi lesz, hogy kihagyja a része vagyunk kíváncsiak ajándékozó anyag - így marad # 132; a fehérje fogoly # 147;.

Mi azonnal folytassa a tisztítását DNS a maradék fehérjék segítségével speciális enzimek képesek elpusztítani ezeket a molekulákat. Anyagokat tartalmaz, mint ananászlé. Ők maguk - ugyanaz a fehérje, így az ananász, ahonnan a kisajtolt lé kell a friss: az enzim nem a legkisebb esélyt, hogy változatlan marad befőtt vagy konzerv élelmiszerek. Mi vonatkozik a megoldást tisztítsa meg a lencsét, ha fogsz használni - ne felejtsük el, hogy egy pirulát, hogy fehérje eltávolítására betétek! A saját megoldás tárolására kontaktlencsék nem hatóanyagok nem tartalmaznak - egyébként a szemünk, és nem fáradnak el.

Az a tény, hogy az enzimek vetettek, lehet megítélni csökkenése oldatviszkozitás. Ha ez nem történik meg, az elegyet hozott egy meleg helyen (37 ° C) egy fél órát, néha tovább tart hozzá ananászlé vagy lencse tisztítóval.

6. A DNS-t kicsapjuk az oldatból

DNS most lebeg a saját megoldását. A fehérjék nem ragaszkodnak hozzá, bár a roncsok különböző molekulák a keverék még mindig sok. A laboratóriumi körülmények között, ezek a nem kívánt részek eltávolítjuk, alaposan keverjük az oldatot fenollal és / vagy kloroform. Szerves oldószerek képesek Pick fehérjék # 132, a # 147;, nehezebb, mint a víz, és ezért a kapott elegyet a kötegben általuk centrifugáljuk le az aljára. Centrifugálás után, az alján a csövek fenol és / vagy kloroformban, abban oldott fehérjék, és a fenti - tartalmazó vizes fázisban DNS. A vizes fázist összegyűjtjük egy külön kémcsőbe, és további már dolgozni viszonylag tiszta oldatot.

Híján centrifuga és a szerves oldószerek, a munkát igényel mellett különleges biztonsági intézkedéseket, ebben a szakaszban a kezelés az otthoni alá skip és kicsapódnak a DNS-ről # 132; piszkos # 147; oldatot.

Megjegyzés egyszer - helyére etil-alkohol a vodka vagy szeszes ital nem: ha az alkohol koncentrációja alacsony, és esik, amikor összekeverjük a vizes fázis 60-65%. DNS a kristályos állapotban nem fog menni. Részben emiatt, öntsük az alkohol egy kémcsőben a DNS-t tartalmazó keveréket gondosan meg kell, rétegződés a tetején. Ezután rétegek rövid szénláncú alkohol a vegyes parciális DNS oldat kezdődik a folyamat kristályosodási nukleinsavak, és emelkedik a felszínre (ahol egy töményebb-alkohol), a pehely.

Ha az alkohol tetejére öntjük nem fog működni, és minden reménytelenül összekeverjük, majd a sok kis etanol semmi egyáltalán nem működik, de amikor egy nagy kristályosodni kezd nemcsak a DNS: az üledékben fog esni, és fehérje maradványokat, és valami mást a forrása a sejtekben.

7. Mit találtunk?

Tiszta kristályos DNS hasonlítanak golyó kusza szálak, de ne felejtsük el, hogy láthatjuk a kristályok az anyag, nem a makromolekula, és mondja a megjelenésük, mely tartalmazza a géneket akkor izolált nukleinsav, természetesen lehetetlen. Ahhoz, hogy tudjuk ezt, meg kell oldani a DNS-t. azonban # 132, # 147 olvasni; nukleotid-szekvencia otthon, sajnos, lehetetlen: ez nem csupán a speciális berendezések, hanem a drága reagensek.

Azonban, ha már jónak kristályok és volt ideje megszáradni, akkor megfigyelhetjük, hogy a DNS-t feloldjuk. Ő kezd megduzzadnak, egyre hasonló zselé medúza, és néhány nappal később, az oldat homogén. A folyamat felgyorsulhat, ha a cső gyakran rázzuk.

Kívánunk sok sikert a kezdők genetika és molekuláris biológia!

Cikkek legközelebb tárgya:
Dezoksiribonu. és így tovább. E. Kotin.
Mindenki - a genom! George Church.
Olvassa DNS: százszor gyorsabb, ezerszer olcsóbb. E. Cleşcenco.