Eljárás diagnosztizálására gyógyszer intolerancia
G01N33 / 48 - biológiai anyagok, mint például a vér, vizelet (G01N 33/02-G01N 33/14, G01N 33/26, G01N 33/44, G01N 33/46 előnyben részesítendő; meghatározása csírázási A01C 1/02); eszközök számlálására és mérési vérsejtek (hemocitométer) (vérsejtszám, elosztva a felület letapogatásával a felület G06M 11/02)
A tulajdonosok a szabadalmi RU 2292550:
Smirnov Andrey Yurevich (RU)
Smirnova Olga (RU)
A találmány a gyógyászat, nevezetesen a laboratóriumi diagnosztika. Eljárás diagnosztizálására intolerancia dózisa egyes szerek vagy ezek keverékei végezzük kiértékelésével fokának eritrocita rezisztencia alakul ki olyan gyógyszerek in vitro alacsony moláris koncentrációjú (10 -6 M / l), ható plazmamembránján vörösvérsejtek helyezzük hipotóniás közegben. A találmány arra irányul, hogy egy univerzális, szerves és megbízható módon, amely lehetővé teszi, hogy meghatározzuk a tolerálhatóság és ezek kombinációit további terápia, és meghatározza az okot, és jelentőséggel bíró gyógyszer okozó, vagy azt, hogy a mellékreakció. 3-il. 1. táblázat.
A találmány a gyógyászat, nevezetesen a módszerek laboratóriumi diagnózist.
A hazai és külföldi szakirodalom van elég sok információt a valódi diagnózis kísérletek gyógyszer intolerancia (LN) külön módszereket. Az 1. táblázat mutatja a leginkább informatív diagnosztikai módszerek LN.
Ismert diagnosztikai módszerei gyógyszer intolerancia
Fradkin VA Allergia in vitro. M. 1975 S.73-80.
A diagnózis a valódi allergiás reakciók kapcsolódó immunológiai fázisban van, a modern ELISA kimutatására specifikus IgE és IgG antitestek bizonyos gyógyszerek a vérszérumban. Specifikus ellenanyagok kimutatását foglalja a kábítószer nehéz, vagy azért, mert az állandó változások a titer, vagy azért, mert azok teljes hiánya, mert sok gyógyszer nem az allergén vagy sok metabolitok, amelyek mindegyike függetlenül működnek. Az is nyilvánvaló, hogy az a tény, hogy sok mellékhatások a gyógyszerek vagy pszeudo-toxikus vagy farmakológiai amelyekre specifikus antitestek nem képződik. Továbbá, gyógyszerek nem allergének. Még ha vannak kialakítva haptének, lehet, hogy nem rendelkeznek a szükséges tulajdonságokkal antitest választ. Végül az antitestek jelenlétét nem gyakran okoz klinikai tüneteket allergiás reakció és nincs rá bizonyíték. Ezért ezek a módszerek nem tekinthetők diagnosztikai.
Az irodalomban nincs adat a megelőzési értéket használt LN diagnosztikai módszerek.
A terápiás gyakorlatban a jelenleg használt kombinált terápia, amely egy számos gyógyszer különböző pontok alkalmazás, így szükség van annak meghatározására, hogy a kombinált gyógyszerek hatásának.
Ezért, egy diagnózisára szolgáló eljárás kábítószer-intoleranciában legyen univerzális, integráns, amely lehetővé teszi, hogy meghatározzuk a tolerálhatóságot a kezelésre, és hatásait azok együttes hatása, figyelembe véve a gyógyszer-gyógyszer kölcsönhatás. Arsenal vizsgálati gyógyszert kell lennie elég széles (legalább 1000).
A prototípus a találmány szerinti eljárás kerül kiválasztásra erythrograms savas módszer (IF Terskov Gitelzon II módszer kémiai (sav) erythrograms biofizika - .. 1957 - Vol.2, S.259-266), amelyet használni diagnosztikai sugárzás betegségtől és annak súlyosságától , hepatitis, különböző mérgezés ellenállása eritrociták lizálására kémiai.
A találmány szerinti eljárás a következőképpen hajtjuk végre:
1. Egy heparinozott vért 1: 1000 hígítás sóoldatban mennyiségben 2 ml.
2. A hígított vért adunk egy hatóanyagot egy koncentrációja 1 # x000B7; 10 -6 M / l mennyiségben 0,2 ml és inkubátorba helyezzük 24 t # x000B0; C-on 10 percig.
3. Inkubálás után 2 ml-t a munka hemolitikus oldatot (0.004N HCI), és a küvettát van állítva a FEC. Fotometria hajtjuk végre 670 nm hullámhosszon. Az idő kezd minden 30 másodpercben a beadás idejét, így a roncsolják két egybeeső mutatók teljes hemolízis.
4. Felhasználás fotometriát bemenet számítógéphez és feldolgozott szerint a program, amely lehetővé teszi, hogy megkapja a „oszlopdiagram” konfidencia intervallum, amely lehetővé teszi, hogy becsülni a pontosságát hemolitikus vörösvértesteket ellenállás alatt a kábítószer hatása, míg expozíció fiziológiás sóoldat (kontroll).
A prototípus számos hátránya van:
1. Nem tartalmazza a gyógyszert beadó a reakcióközegben (in vitro).
2. Van alacsony informatív és a diagnosztikus pontosságot.
3. A mintákat alacsony informatív.
4. Ne értékelést nyújt komplex cselekvési számos gyógyszer.
Minden hátrányokat kiszűrik az a módszer, hogy a vizsgált vér beadott gyógyszerek alacsony moláris koncentrációjú (10 -6 M / l), amely pontosan méri a hordozhatóság, leírt eljárás alkalmazásával indikátoraként fokának hemolízis az eritrocita membrán ellenállása hatása alatt a vizsgált anyag.
Az általunk kifejlesztett számítógépes feldolgozás eredményeinek fotometriai növeli az információ tartalma és pontossága diagnózist.
A magas az eredmények reprodukálhatóságának biztosítja helyes megfogalmazása kontroll, számítógépesítés. A kontroll mintát vérét használva ugyanazon beteg, amelyben a hatóanyag hozzáadjuk helyett sóoldatot, és ProType - donor vérből.
Mi már tanulmányoztuk először előzetes kísérletekben a egészséges donorok véréből (nélkül jelei LN történelem) hatások az antibiotikumok és a vitaminok koncentrációban 10 -2 és 10 -22 M / L. Az eredmények azt mutatták, hogy a gyógyszerek a koncentrációja 10 -6 -10 -8 M / l volt, semleges az egészséges humán eritrocitákban.
További vizsgálatok során a gyógyszereket koncentrációban alkalmazzuk 10 -6 M / l (például az ellátási), amely lehet jobban megfelel a tényleges koncentrációkat a terápiás hatóanyagoknak a páciens vérében.
Mi gyógyszerek kölcsönhatást mechanizmust először vizsgálták eritrocita membrán szempontjából moláris koncentrációk. Ez abban áll, hogy a plazma membrán vörösvérsejtek helyeztük hipotóniás közegben (hemolitikus közepes igényelt eljárás), jelenlétében alacsony koncentrációjú gyógyszerek - 10 -6 M / l megsértése történik szállítása ionok (az ion áram növekedését a sejt), és rendre növelése membrán-permeabilitás és a gyorsulás hemolízis a vörösvértestek. Egy beteg intolerancia, hogy egy adott gyógyszer hemolízis történik gyorsabban, mint az egészséges donorok. Ha ez nem történik bármilyen változás a membrán a vörösvértestek és minél több kárt.
Az eljárást a következőképpen hajtjuk végre. Regisztráció változások kinetikája hemolízis elő a lehetőség, ami az alapja fotoelektromos koloriméter koncentráció mikroprocesszor - KFK-2MP. Használt küvetta 20 mm vastag. A munka sejt injektált 2 ml vért összekeverjük egyenletesen hígításban 1: 1000 adunk ugyanazon hatóanyag koncentrációban 10 -6 M / l mennyiségben 0,2 ml, alaposan összekevertük. A küvettát helyezünk 10 percig termosztátban hőmérsékleten 24 # x000B0; C. 10 perc eltelte után 2 ml dolgozik hemoiizáiása oldatot (0,004N HCI). A küvetta be van állítva a FEC ellen sejt desztillált vízzel. Fotometria hajtjuk végre 670 nm hullámhosszon. Az az idő, kezdődik (amikor a mikroprocesszor, és ezzel egyidejűleg a stopper), minden 30 másodpercben a beadás idejét, hogy megkapjuk a lizálják két egybeeső indexek, azaz amíg a teljes hemolízis. Extinction végén hemolízis eléri a 0 (nulla), mert a fény abszorpciós hemoglobin által felszabaduló eritrociták, amelyek hatása alatt a sósavat alakítjuk sósav hematint.
Eredményeinek értékelése az alábbiak szerint végezzük. Ennek eredményeként, a minták száma kapott csökkentésével kihalás, amelyek mindegyike megfelel a haemolysis mértékét az időkeret. Jelzések fotometriát bemenet számítógéphez és feldolgozott szerint a programot, így a „bar chart”, valamint egy megbízhatósági intervallum (# x000B1 5%, mivel az eljárás a variációs koefficiens meghatározni a kísérlet nem haladja meg az 5%), hogy értékelje a pontosságát hemolitikus ellenállás vörösvértestek hatása alatt kábítószerek, míg expozíció fiziológiás sóoldat (kontroll). Csökkentik annak ellenállását a vörösvértestek 10% -kal megbízhatónak tekinthető, amely tanúsítja, hogy az intolerancia egy gyógyszer.
Példa elő, hogy a számítógép az 1. ábrán látható.
ERPA - teljes ellenállás jelző eritrociták - alatti terület az eloszlási görbe. Az 1. ábra azt mutatja, hogy készítmények: bitsillin, vibromitsin, kanamicin, linkomicin, kloramfenikol nem hordozható, mint fehér sávok és a konfidenciaintervallumokat az alsó megbízhatósági határ rudak - térben sóoldat (ferde vonalkázás). Más gyógyszerek - hordozható. Erre a beteg azt javasolták és a választott gentamicin. Kezelés Ez az antibiotikum eseménytelen volt.
A klinikai gyakorlatban gyakran találkozunk azzal a komplex készítmények. Határozza meg az optimális gyógyszerek kombinációjával segít elviselhető LN javasolt diagnosztikai módszer.
Íme klinikai példát:
Így a találmány szerinti eljárás leginkább pontosan megállapítani az okot, jelentőséggel bíró gyógyszer kiválasztási generál profilaktikus célra szánt készítményeket terápiában, a gyógyszerek kombinációjával annak meghatározására, hogy tolerálható komplex azok alkalmazását.
Voltak 800 beteget vizsgáltunk LN, minden egyes beteg elhatározta, a tolerancia nem kevesebb, mint 10 készítmények (a vizsgált készítmények 8000). A reakciókat használt gyógyszer a 40 osztályok kémiai vegyületek: antibiotikumok - 52%, a helyi érzéstelenítők - 25%, vitaminokat - 14%, szulfonamidok - 12%, pirazolon-származékok - 9%, az intravénás érzéstelenítés - 7%, antihisztaminok - 5% , inzulinok - 6%, glükokortikoidok - 5%, kardiovaszkuláris szerek - 4%, pszichotróp - 3%, és mások.
Az eredmények azt mutatták, hogy a pontossága a módszer 97%. Ez azt jelenti, hogy 97% A kiválasztott gyógyszerek profilaktikusan nem okoznak komplikációkat a későbbi kezelés. A 80% -ában határoztuk meg visszamenőleg etiológiailag jelentős gyógyszer vagy különböző gyógyszerek kombinációja.
A használata nem engedélyezett gyógyszerek kifejlesztéséhez vezetett a nemkívánatos reakciók (ilyen incidensek számoltak 9).
Így, a javasolt eljárás diagnosztizálására in vitro gyógyszer-intolerancia sokoldalú, integráns, amely lehetővé teszi, hogy meghatározzuk a hatóanyag tolerálták a kezelést, és ezek a hatások egyesítjük, a kombinált hatása. Ez egy alacsony költségű, gazdasági előnyöket. Rendelkezésre álló, megbízható, és elvégezhető bármilyen orvosi rendelők.
Eljárás diagnosztizálására hatóanyag túlérzékeny egyes gyógyszerek vagy gyógyászati keverékek, azzal jellemezve, hogy az eljárás a következő lépéseket: rajz vérmintát a betegtől, és az említett mintát hígítottuk fiziológiás sóoldattal az arány 1: 1000; adunk gyógyszert vagy gyógyszereket kell tanulmányozni, koncentrációkban 10 -6 M / l hígított mintát a vér; A keveréket inkubáljuk vérminta és gyógyszert vagy gyógyszereket 10 percen át 24 # x000B0; C; beadott hemolysing oldatot HCI-koncentráció 0,004 N, hogy egy termosztált keverékét vérminta és gyógyszert vagy gyógyszereket; ellenállás meghatározására az eritrociták fotometriásan az említett elegy a vérminta és a gyógyszert vagy gyógyszereket hullámhosszon 670 nm-es bevezetése óta hemoiizáija-oldattal, amíg a hemolízis befejeződött, ahol a csökkenés ellenállása eritrocitától 10% azt jelzi, intolerancia említett betegnek az említett gyógyszert vagy gyógyszereket, ha ilyet alkalmaznak, mint a kontroll minta a beteg vérének hígítjuk sóoldattal.