Bacteriophages mellékút enterobaktériumokban és kilátásai az alkalmazásuk az állatgyógyászatban
A történelem a fejlődés bakteriofágok, mint az egyik olyan terület mikrobiológia, nyúlik vissza a múltba. Az első jelentések a felbomlás mikroorganizmusok jelentek meg a késő XIX - XX század elején. 1898-ban orosz tudós
Miután felfedezték a jelenség bakteriofág Félix d'Herelle kidolgozott elmélet, hogy a bakteriofágjának patogén baktériumok, hogy a paraziták, fontos szerepet játszanak a patogenézisében fertőzések, amely helyreállítását páciens testébe, majd - létrehozását specifikus immunitás. Ez a helyzet felkeltette a figyelmet, hogy a jelenség a bakteriofág számos kutató, aki arra számított, hogy a fágok fontos eszköze elleni küzdelem a legveszélyesebb fertőző betegségek emberekben és állatokban.
Az egykori Szovjetunió egyik központja bakteriofág Intézet Bakteriológiai lett, későbbi nevén az Institute of Vaccines and Szérumok, és most - Tbilisi Intézet bakteriofág, Mikrobiológiai és Virológiai. Úgy alakult 1923-ban professzor G. Az ellátásra Ava, aki 1918-ban függetlenül Félix d'Herelle talált a folyó vize Kura bakteriofág aktív kolera elleni. Ezek a megfigyelések voltak az oka a találkozó DZrellem Párizsban, a korai 1920-as és megoldások további vizsgálatot ebben a kérdésben.
A korai 1930-as években Félix d'Herelle kétszer látogatott Tbilisziben. Ennek eredményeként, a kommunikáció a két tudós programot tanulni bakteriofágok már tervezett létrehozása révén a World Center bakteriofág.
A jelenleg ismert fágok szinte minden típusú patogén és szaprofita baktériumok.
Átfogó vizsgálatok bakteriofágok történt az elmúlt 40-45 évben lehetővé tette széles körben használják őket megoldani sok problémát a mikrobiológia, virológia, a genetika, a biokémia, immunológia, radiobiológia, a biotechnológia és más területeken a biológia. Ezért bakteriofág, fejlődő először egy szűk területén az orvosi mikrobiológia, most szerzett általános biológiai jelentősége.
Tanulmányok fág hagyjuk, hogy felfedje a mechanizmusok alapvető biológiai folyamatokban, mint például a DNS-replikációt, a rekombináció, a transzkripció és a gén szabályozása. Tanulmányozása révén fágok mi megnyitották a lehetőséget a fejlődő sok fontos technikák és trendek géntechnológia.
A fág-végzett kiterjedt sugárbiológiai vizsgálatok és a kezdeti vizsgálatot a kemoterápiás szerek és antibiotikumok elleni néhány vírusos betegségek és a rosszindulatú daganatok.
Fágok használt legfontosabb biológiai űrkutatás.
Az állatgyógyászatban és a gyakorlati haszna fágok kapcsolatos tanulmány a genetikai variabilitás a baktériumok (transzdukció, fág átalakítás), jelzése és azonosítása a patogén baktériumok, fág terápia és fagoprofilaktikoy.
Azonban az elmúlt két évtizedben, az uralkodó nézet, hogy a tanulmány fágok nem adnak semmit alapvetően új a tudomány számára. Oroszországban idején géntechnológia, volt egy éles eltérés a vizsgálat fágok mellett a jobb finanszírozott kutatás. Csak néhány laboratóriumban Oroszország továbbra is nyúlnak alapkutatás fágok. Szerint a legtöbb szakértő, fagologov nyilvánvaló, hogy indulás a tanulmány fágok nem volt megalapozott. Így annak ellenére, felhalmozott tudományos adatokat a tanulmány a biológiai tulajdonságai bakteriofágok, sok kérdés igényel további kutatást. Például a legtöbb, mint korábban gondolták, jól tanulmányozott modellt esherihioznyh fágok T-sorozat, annak ellenére, hogy 40 éves intenzív kutatás, nem lehetett megtudni a funkcióját kétharmada a termékeket. Továbbá nem egykörös morfológiai osztályozás és taxonómia a mikroorganizmusok nincsenek szabvány meghatározza Bacteriophages számos kórokozó az állati és emberi betegségek, valamint a folyamatok és azok alkalmazása paramétereket.
A Mikrobiológiai Tanszék, virológia, járványtani és állatorvosi-egészségügyi vizsgálat UGSKHA azonosított egyik kiemelt kutatási területek - izolálása és vizsgálata bakteriofágok. Az osztály, együttműködve vezető kutatási központok az országban (VNIIVSGE, VGNKI, ARRIAH, VNIIVO) több mint harminc éve végzett kutatómunka ebben a kérdésben, különösen a tanulmány a bakteriofágok kevéssé tanulmányozott állatorvosi enterobacteriumok.
Ez a választás kutatási terület kapcsolódik az a tény, hogy az elmúlt években, a munka a hazai és külföldi kutatók, kibővített ötlet etiológiai jelentőségét az Enterobacteriaceae család baktériumok állati és emberi betegség. Ezen család tagjai széles körben elterjedtek a természetben, és a legtöbbjük a normál mikroflórájának a gyomor-bélrendszer az állatok és az emberek. Azonban ezek közül mikroorganizmus patogén nemzetség, faj és variánsai előállítására alkalmas emberekben és állatokban, mint önálló betegség (ehsherihioza, szalmonellózis, yersiniosis, kleb- siellez et al.) És az enteritis, suppuration sebek, tályogok, masztitisz, endometritis, meningitis , tüdőgyulladás, szepszis és m. o. élelmiszerek és takarmányok-toxikózis és toksikoin fektsii et al.
Különösen figyelemre méltó a munka a különböző kutatók, hogy tanulmányozza a szerepe ezeknek a mikroorganizmusoknak a etiológiájában gyomor-bélrendszeri betegségek fiatal állatok, melyek továbbra is komoly problémát okoznak, mindenütt jelen vannak, és okoz nagy gazdasági veszteségeket az állattenyésztőknek, különösen a nagy gazdaságok.
Hosszú ideig, különösen abban az időszakban, 1960 - 1980-es években a múlt század szinte minden betegség újszülött állatok klinikai tünetei a hasmenés tulajdonítható a nem fertőző betegségek funkcionális, az úgynevezett emésztési zavar, annak ellenére, hogy a jelek a járványos folyamat. Bár már a tevékenységek kezelésére és megelőzésére ilyen „emésztési zavarokat” jelen keresetet, hogy törés mikrobiális szer és járványos lánc (antimikrobiális, fertőtlenítés, periodikus változás Improvement elve alapján „minden üres - minden forgalmas” et al.).
A mai napig, felhalmozott rengeteg tényszerű anyag, jelezve, hogy a az esetek túlnyomó többségében a gyomor-bélrendszeri betegségek fiatal állatok fertőző természete és által okozott különböző szerek. A különleges helyet foglal el az etiológiája újszülött állatok betegségek veszi az úgynevezett „háztáji” feltételesen patognennaya mikroflóra amely ellentétben ügynökök „klasszikus fertőzések” napi táplált ürülékkel klinikailag egészséges tenyészállomány (-bacillicarriers állatok), és amikor az első esetben a betegség - a székletben a fiatal beteg a helyiségeket, ahol az állatok születtek és töltik termesztése az első hetekben az élet.
Ahhoz, hogy ezt a mikroflóra, valamint néhány más mikroorganizmusok közé tartoznak a baktériumok az Enterobacteriaceae család, amelynek ismerete mind kórokozók állatok és emberek az elmúlt évtizedekben kiszélesedett munkájának köszönhetően számos kutató.
Kontaminiruya élelmiszer nyersanyagok és élelmiszerek, enterobacteriumok fenti veszélyt jelentenek az emberek, így azok nagy mérgezés kialakulását.
A hatékonysága javító intézkedések nagyban függ a megfelelő időben a betegség diagnózisát, így a javulás módszerek laboratóriumi diagnózisa által okozott betegségek enterobaktériumokban képviselői vagy onnan való részvételük, nagy figyelmet fordítani.
Ha a diagnózis bakteriológiai eljárás számos nehézség. Ezek közül az egyik az a tény, hogy az alapja a az azonosítása baktériumok biokémiai tulajdonságaik. Munkaerő-intenzitás, és a vizsgálat időtartama alatt nem teszi lehetővé enzimatikus tulajdonságait gyorsan és pontosan azonosítani az említett mikroorganizmusok. Modern laboratóriumi diagnosztikai módszerek (PCR, ELISA, RIA), amelyeket fel lehet használni erre a célra, bár nagyon specifikus és érzékeny, de az eljárások összetettségének, a magas költségek berendezések és reagensek a termelés ezen reakciók teszi elérhetetlenné a legtöbb, amíg állatorvosi laboratóriumok.
Ebben az összefüggésben szükség volt, hogy megtalálják az alternatív módszerek laboratóriumi diagnosztika, ami már kevésbé időigényes, gyorsabb és olcsóbb. Az egyik ilyen módszer fagodiagnostika. fagodiagnostiki kidolgozott módszerekkel közepén a múlt század specifikusak, nem igényel nagy beruházást az idő, anyagok és laboratóriumok állnak rendelkezésre minden szinten.
Hiánya miatt a hazánkban szokásos készlet fágok diagnosztizálni által okozott betegségek enterobaktériumokban, egyik célkitűzése Kutatásunk izolálása és vizsgálata alapvető biológiai tulajdonságait bakteriofágok építési ezen diagnosztikai termékek, valamint a fejlesztési módszerei azok gyakorlati alkalmazásáról.
Ennek eredményeként a vizsgálatok szennyvíz minták, állati ürülék, vízzel, nyitott víztározók, patológiai anyagot beteg és halott borjaknál és malacoknál a kapcsolattartó izoláltuk és ezeket választottuk több mint 130 izolátumok fág litikus törzs patogén az emberi és állati enterobaktériumok következő nemzetségeket: Proteus, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Providencia, fajok: Yersiniaenterocolitica, Yersinia pseudotuberculosis, Morganella morganii, és az E. coli szerocsoport 0157 (szerovariáns 0157: H7 és 0157N-). A keresés az új fágok izolátumok ellen hatásos baktérium a Pseudomonas, Aeromonas, Pasterella, Enterococcus, Serratia et al. A képviselők kóroki jelentősége az állati patológia és okozhat ételmérgezést emberekben.
Tizennégy ígéretes törzsek fág (Phagum Morganella morganii M17 UGSKHA - DEP Phagum Morganella morganii M20 UGSKHA -. DEP Phagum Escherichia coli 0157 E-61 UGSKHA -. DEP Pagum Escherichia coli 0157 E-67 UGSKHA -. DEP Phagum Citrobacter C és 61 UGSKHA. - . DEP Phagum Citrobacter C-66 UGSKHA- DEP, Phagum Citrobacter C-52 UGSKHA -. DEP Yersinia enterocolitica Y / 9 UGSKHA-DEP Phagum Proteus P-16 UGSKHA Phagum Proteus DEP-P-261-DEP UGSKHA Phagum EnterobacterEn .... -2 UGSKHA- DEP. Phagum Enterobacter En-13-UGSKHA DEP. Phagum KlebsiellaK-10 UGSKHA-DEP. Phagum Klebsiella K-81 UGSKHA-DEP.) letétbe helyezett VGNKI állatgyógyászati készítmények, és ajánlott gyártásához diagnosztikai és terápiás-megelőző készítmények.
A szűkebb Kiválasztott fágok specificitásának, az általunk kifejlesztett módszerek azonosításához Enterobacteriaceae felett, ami lehetővé teszi, hogy meghatározza, faj és még serogruppovuyu tartozék izolált mikroorganizmus tenyészet tanulmányozása nélkül enzimatikus és szerológiai tulajdonságok 48 óra helyett 5-7 nap, ami jelentősen csökkenti az időt és a költségeket diagnosztikai vizsgálatok.
ÖSSZEFOGLALÁS RNF az, hogy ha az anyagban jelen lévő kért kórokozója, az anyagot hozzáadjuk egy ilyen homológ fág, érintkezésbe lép vele, ez gyorsan szaporodik, és az azt követő koncentrációjának növekedése a szabad extracelluláris fág jelenlétét jelzi a vizsgált szubsztrátumot homológ kórokozó.
RNF érintkezés javasolt technikával állít fág egy egyszerű, érzékeny és specifikus diagnosztikai módszer, amely lehetővé teszi egy viszonylag rövid időszak (11-22 óra). Ahhoz, hogy érzékeli a kívánt baktériumok koncentrációja 102-104 mikrobiális sejt per 1 g (ml) a vizsgálati anyag e idegen mikroflóra izolálása nélkül tiszta tenyészeteinek Enterobacteriaceae. Bakteriológiai módon észleli a mikroorganizmusok, mint koncentrációja általában nem lehetséges.
Sajnos, a biológiai ipar, az ország jelenleg nem gyárt speciális eszközök a megelőzés és a kezelés bélfertőzések okozta Enterobacteriaceae vagy a fenti eljárásban való részvételük (kivéve esherihioznyh Vakcinák és szérumok), ami jelentősen csökkenti az intézkedések hatékonyságának ezen betegségek leküzdésére.
Egyes kísérletek, hogy különböző fágokat a fertőző betegségek állatok végeztek az 1920-1930-es években. DZrell (1928, 1935) próbálta használni fágok pulloroze-tífusz csirkék. Mivel a növekvő ellenállási szintet kórokozók antibiotikumokkal és a negatív hatását az utóbbi a szervezet az állatok és az élelmiszer és az emberi, fágterápia és a fertőző betegségek fagoprofilaktika megint elkezdte vonzza a figyelmet a sok kutató.
Ezért a fejlesztés és gyártás a terápiás és profilaktikus fágkészítményből az igényeinek állatgyógyászatban jelenleg egyre nagyobb jelentőséget kapnak a gyakorlatban. Az előnye, hogy ezeket a forrásokat az ő környezetbarát, a biztonság, még nagy adagokban, és nincs káros hatása az állatokra (dysbacteriosis, allergiás reakciókat, visszaszorítják az immunrendszer funkcióit). Ugyanakkor phagotherapy fagoprofilaktika, és nem zárja ki a tüneti kezelés, és Serotherapy seroprfilaktiki, probiotikumok, antibiotikus kezelés, oltás és az egész komplexum az állategészségügy és zoogigie - etnikai eseményeket.
Jelenleg vizsgálják a lehetőségét, hogy a bakteriofágok kezelésére és megelőzésére bélrendszeri betegségek fiatal állatok, valamint a megszüntetése látens hordozó baktériumok. Kutatásokat folytat a fejlesztés technológiai paramétereinek előkészítése és ellenőrzése az új biológiai, a kiválasztás az optimális adagolás rendszerek és módszerek azok alkalmazását.
Ezekre a célokra, az általunk használt kiválasztott izoláljuk, és elszigeteli számunkra fágok fent említett gyűjteménye enterobaktériumok UGSKHA különböző kombinációkban, attól függően, hogy a betegség etiológiája és érzékenység nekik az azonosított kórokozók keringő egy adott gazdaságban.