Ehrlich-féle diazo reakciót
Ehrlich-féle diazo reakció - minőségi mintaészlelési biológiailag fontos anyagok a vérben és a vizeletben. Alapján a nem-specifikus színreakció közötti diazoreaktivom Ehrlich és néhány szerves anyag (pirrol, krezol, indican, tartalmazó proteinek az aminosav tirozin, triptofán, hisztidin és mások.).
Diazo reakció a vizeletben. Reagensek: 1) diazoreaktiv (0,5 g szulfanilsavat és 5 ml 25% -os sósav 100 ml vízzel); 2) 0,5% nátrium-nitrit-oldatot.
Módszerek Ez a reakció, hogy a 4 ml I-reagenst adunk hozzá 1-2 csepp reagens II, 4 ml vizelet öntjük, majd 1 ml 10% -os ammónia-oldat; a csövet lezárjuk, és addig rázzuk, amíg habzó folyadékot érkezik. A mintát pozitívnak tekintjük, ha egy rózsaszín vagy piros színű, és negatív - sárga vagy narancssárga. A pozitív reakció figyelhető meg számos lázas betegségek: a tífusz és a tífusz. miliáris tuberkulózis, chlamydia, kanyaró, trichinózis és mások. A jelenlétében bilirubin a vizeletben úgy tűnik, hogy diazoreaktivom vörös színű vizelet hozzáadása előtt az ammónia.
Diazo reakciót a vérben. Ezt alkalmazzák meghatározására bilirubin, amely keveréket diazoreaktivov bizonyos arányokban olyan vörös festéssel. Ehrlich diazo reakció alapján leginkább módszerek minőségi és mennyiségi meghatározására a bilirubin (cm.).
Paul Ehrlich, 1915
Ehrlich diazo reakció (P. Ehrlich) - szín közötti reakció diazoreaktivom Ehrlich és számos szerves anyagok (pirrol, krezol, indican et al.), Belépő egy vegyületet az azocsoportot (-N = N-), használt kvantitatív meghatározására biológiailag fontos anyagok a vérben és a vizeletben.
Diazoreaktiva előállítás: oldott 5 g szulfanilsavat 50 ml tömény sósavat (d = 1,12), majd vizet adunk hozzá, hogy térfogata 1 liter; A kapott oldathoz 0,5% -os nátrium-nitrit-oldatot. Ez képezi diazofenilsulfonovaya savat (Ehrlich-féle reagenssel), amely egy színes azovegyület bizonyos biológiailag fontos anyag a vérben és a vizeletben.
Széles körű használata a diazo reakcióelegyet Ehrlich kapott a klinikán a minőségi és mennyiségi meghatározását a bilirubin a vérben (lásd. Alább). Diazoreaktiv is meghatározásához használt tirozin, hisztidin és a hisztamin. Proteinek, molekulák, amelyek magukban aminosavak - tirozin, triptofán, hisztidin, így diazoreaktivom narancs-vörös színű. Annak meghatározásához, bizonyos anyagok komponenseként, hogy készítsen egy színes azovegyület használni nem szulfanilsav, és más gyűrűs vegyületek, mint például fenolok meghatározására vérben és a vizeletben - paranitroanilin, amikor meghatározzák szulfonamidok - 2R-sav, stb ...
Diazo reakciót a vérben. Bilirubin a diazo reakció eredményeként jellegzetes vörös-ibolya színű. Ez a jelenség már használt legtöbb módszer minőségi és mennyiségi meghatározására bilirubin. Jelenleg a leggyakrabban használt módszer Endrashika, amely lehetővé teszi, hogy meghatározza külön bilirubin frakciót.
Reagensek: a) koffein reagens: 5 g koffein, 7,5 g nátrium-benzoát és 12,5 g nátrium-acetátot feloldunk egy kis felmelegedés desztillált vízben, és készült fel vízzel 0,1 l; b) diazoreaktiv: első reagenst - 1 g szulfanilsavat feloldjuk kis mennyiségű vízben, és úgy, hogy 15 ml tömény sósavat, feltöltjük vízzel 1 literre; második reagenst, - 0,5% -os nátrium-nitrit-oldatot.
Használat előtt mix 10 ml az első reagenst és 0,25 ml második. Meghatározására a teljes bilirubin 1 ml szérumot öntjük 3,5 ml koffein-reagens és 0,5 ml diazoreaktiva, és annak meghatározása, direkt bilirubin 1 ml szérumot adtunk 3,5 ml sóoldatban, és 0,5 ml diazoreaktiva. Keverjük jól össze, mindkét minta 5 perc után. kolorimetriruyut kompenzáció egy olyan oldattal szemben, amely 1 ml szérummentes, 3,5 ml koffein reagenst és 0,5 ml fiziológiás oldatban zöld fény szűrő. Indirekt bilirubin úgy határozzuk meg a teljes közvetlen.
Diazo reakció a vizeletben abban áll, hogy a 10 ml friss vizeletet diazoreaktiva 10 ml és 2 ml 10% -os ammónium-hidroxid-oldatot. Ebben az esetben, miután erőteljes rázás jelenik rózsaszín vagy kármin-vörös színű. A reakciót akkor tekintjük pozitívnak, ha festett nemcsak folyadék, hanem képződött habot. Sárga vagy narancssárga szín jelzi a negatív eredményt. A kétséges esetekben, a kialakulását a következő napon a csapadékot a kék-zöld vagy fekete színű sugallja pozitív reakciót. Jelenleg ez a reakció nincs gyakorlati értéke, mivel nem specifikus, és jellemző a sok lázas betegségek: a tífusz és a tífusz tífusz, miliáris tuberkulózis, poliserozita, a kanyaró, a Hodgkin-kór, a tüdőgyulladás, a diftéria, orbánc, trichinózis. Továbbá, gyógyszerek: ópium, a morfin, dionin, atofan, hexametilén-tetramin, rebarbara, a heroin, Chrysarobin, salvarsan - adnak hasonló festéssel és készítmények tannin, fenol és származékai, krezol, guajakol és salol befolyásolja a reakciót.