Szerodiagnosztizálására és utólagos diagnózis
A megítélésének kritériuma a perzisztencia virulens vírus az állományt Xia titerek az antitest a szérumban a vér a madarak. A vizsgálat során csak a párosított nyert szérumot azonos madár. Az első mintát veszünk a vakcinálás előtt (vagy az elején a betegség), a második - 15-20 napon, a következő egyszer egy hónapban. Alkalmazott HAI, TTL, ELISA-val.
Differenciál diagnózis. NB differenciálni kell a UPS, influenza, PMA-2, ILT, mycoplasmosis és colibacillosisos madarak. Laboratóriumi madárinfluenza diagnosztizálására, IB és NB diagnosztikai eszközök használata biofabrichnogo termelés. A differenciálás az influenza A vírus, van 14 altípusok és a paramixovírust, köztük 9 szerotípus csak akkor lehetséges a laboratóriumban.
Laboratóriumi diagnózis klasszikus sertéspestis neki ??
Klasszikus sertéspestis ?? s (CSF) - erősen ragályos fertőző betegség láz, elváltozások a vér és a vérképző rendszer, lebenyes tüdőgyulladás és Lobar-pseudomembran gyulladás a vastagbélben. A csoport az OIE adatokat.
CSFV fogékony házisertéseken Sun ?? ex fajtájú és korú csoportokat, különösen fajtiszta és vaddisznók.
A betegség regisztrált főként Ázsiában, Közép- és Dél-Amerikában, valamint Európa egyes részein és Afrikában.
sertéspestisvírusával ?? s családjába tartozik Flaviviridae nemzetség Pestivirus. CSF vírusos jellegű létrehozott 1908 ᴦ. Schweinitz és Dorsey.
Antigénváltozékonyság CSFV nem bizonyított. Virulencia megkülönböztetni A-, B- és C -option vírus. A csoport áll, virulens epizootikus törzs okozó sertés ?? s ?? teljesen ex korosztály rosszul szivárgó betegség. B alcsoportba vírusok virulens csak sertés és közben keringő az állományban okoz atipikus vagy krónikus pestis. PodgruppaS - amerikai slabovirulentny darab. 331. Megállapítást egyoldalú kapcsolatát CSFV és marha hasmenés vírus: a vírus elleni antitestek szarvasmarha hasmenés semlegesítik CSFV, de antitestek CSFV nem semlegesítik vírusos hasmenés. A szérum disznó ?? s lábadozó érzékeli BHA, PA és KSA.
Diagnózis adatokon alapul járványos, a betegség tüneteit, és a patológiai változások a laboratóriumi eredményeket. Epizootologicheskie és patológiai adatok függ érzékenységét sertés ?? s, a virulenciája a törzs és a komplex intézkedések megelőzésére CSF.
Abban az esetben, hogy a járvány törzs virulens vírus, a sertések száma ?? s nem védettek, a betegség nagyon fertőző, magas halandóság, hipertermia, haemorrhagiás bőrelváltozások, jelei sokk szindróma, és a központi idegrendszer szervek. Figyeljünk ejtik vérzéses diathesis különböző szervekben, erezettel nyirokcsomók, szívinfarktus ült ?? ezenki, vérzések a vesékben a háttérben a vérszegénység, hurutos-vérzéses gastroenteritis, limfocitás encephalomyelitis. Ebben az esetben, a gyakori vakcinázást a sertések elleni sertés ?? létrehoz egy immun háttér befolyásoló a betegség tüneteinek és a természet a patológiás változások. A krónikus mérhető jellemző-niyami vannak diphtheritic fokális plakk (rügyek), barna ekcéma, fibrines pleuritis és pericarditis, nekrózis mandulákat. Krónikus betegség gyakran fordul elő a háttérben más fertőzések. A helyes diagnózis csak elő laboratóriumi körülmények között.
Rapid módszerek kimutatására CSF vírus. Ajánlott differenciálódása pestivírusok minta-DNS a CSFV. Mint hibridizációs próba alkalmazásával komplementer DNS (32P jelzett) fehérje egy részéhez földzárlat P125 gént. A gyors kimutatására CSFV-D szövetekben PCR állati szövetmintákból fenolos ház elszigetelt RNS készítményeket-t reverz transzkripcióval és PCR-rel amplifikáltuk. Használata „nested” primerek lehetővé amplifikáció különböző CSFV izolátumok. PCR magas érzékenysége és specificitása, és lehetővé teszi, hogy különbséget a különböző pestivírusokra. PCR javasolt kiviteli alak kimutatására CSFV alkalmazásával 4 amplifikációhoz felhasznált primerek a génfragmensek a fehérje
E-1. A a módszer érzékenysége 10 TCD50.
Elszigetelt ?? ix vírus. Felszabadítására a vírus ?? eniya vérmintát vesz, darabokra ült ?? ezenki, mandulák, nyirokcsomók, mellkasi csontok, a vesék és a tüdő 2-3 állat az első 2 óra után a halál vagy levágása a betegek állapotának atonalitás. Az anyagot felvesszük steril ampullákban, gumidugóval, a fiolákat kezelt kívülről 5% p-rum klóramin vagy derítjük 20% p-rum fehérítő, tekert gézzel átitatott fertőtlenítő p-készletet, és helyezzük egy műanyag zacskóba. Taken patmaterial feltöltött egy termosz, jéggel le kell zárni, és elküldte futárral a laboratóriumba a kísérő dokumentumnak. A laboratóriumban minden egyes mintát készítünk egy 20% -os szuszpenzió 0,85% -os p-pe NaCl, amely háromszor megfagyasztjuk és felolvasztjuk, centrifugáltuk 3-4 ezer. 20-30 perc-1 min. A felülúszót antibiotikumokkal kezelik 1 órán át 37 ° C-on, és használni, hogy izoláljuk ?? eniya vírus.
?? ix izolált a vírus sejttenyészetben. Használjon folyamatos tenyészet a PK-15 sejteket növesztettük üveglapok. Minden egyes minta esetében anyag figyelembe legalább 8 csövek, amelyekben Pipettázzunk 0,4 ml vizsgálandó anyagot. Virus-t adszorbeáltatjuk 2 órán 137 ° C-on, majd eltávolítjuk, a sejteket mostuk, és a tápközeget öntsünk 2 ml táptalajt, 2% szérumot szervek ?? Enka. Sejtkultúra minőség-ellenőrzés marad töltés nélküli 10 csövek. Inkubáljuk 24-96 óra. CSFV kultúra RK-15-sejtek nem okoz, ezzel kapcsolatban jelzés azt végzik közvetlen IF. Miután 24-96 órával a beoltás után, a lemezeket egy sejtréteg a csövekből eltávolítottuk, levegőn megszárítottuk, és rögzített 10 percen át hidegen (4 ° C) acetonnal, levegőn szárítjuk, és tegye le egy csepp sejtek FITC-Ig CSFV alkalmazni a munkahígítás üveglapkákon. Készítmények tartottuk nedves kamrában 30 percen át 37 ° C-on, majd mossuk egy tartályban FSB 0,01 M pH = 7,2-7,5 30-40 percig a sötétben, desztillált vízzel öblítjük, levegőn megszárítottuk, és ágyazott pufferes glicerin (9 tömegrész glicerinből és 1 rész 0,01 M FSB, pH = 7,5). Erre a célra a csúszó lefölözött alkalmazott alapos lu-pufferes glicerin gyógyszer sejteket helyezünk le, és öntsük az olvadék-él lennym paraffin nézők Lumino ?? estsentnym mikroszkóp alatt.
A fertőzött kezelt készítményekben Ig-FITC, AG vírus érzékeli egy fényes-sárga ?? enomu diffúz fénye citoplazmájában érintett sejtek, csoportokba rendezve, amelyek úgynevezett fluoreszcens mikroblyashkami. 24-48 óra után a kultikus D-RC-15 sejtek figyeltük mikroblyashek megjelenését. Ezek hiányában az első járat hajtjuk 2. és 3. áthaladását a vizsgálati anyagot, majd IF 24-96 órán át.
Kijelző és azonosítási virusa.Gistologicheskie kutatás. Hajtjuk végre, hogy kimutassuk a specifikus, mérhető Neny-idegi szövetekben. Az elhullott vagy levágott sertés ?? s vegye darab agyféltekék, a kisagy, Ammon, a szarvak a gerincvelő különböző területeken. A szövettani preparátumokat megfestettük hematoxilin-eozin. A legtöbb esetben (70-93%) a központi idegrendszerben is megfigyelték ob limfocitás nonsupparativ encephalomyelitis, azzal jellemezve, perivaszkuláris lymphocytás infiltráció, fokális proliferációját mikrogliális sejtek (glia csomók) és dystrophia gangliozngh sejtek. B szeleteket készítünk lim-fouzlov, szívizom, és a máj, képes észlelni a jelenlétét acidofil szervek vnut-riyadernyh ?? ec zárványok, valamivel kisebb, mint a nucleolusok. A nyirokcsomó azok 6-12 nappal a fertőzés után.
CSFV egy markáns gematotropizmom vonatkozó csontvelő-tartalmú vezetőképes nagyobb számú blaszt sejtek, mint a nyirokcsomók, és leült ?? ezenka. Emiatt a csontvelőt érinti először; gátolta csontvelőképző és eritropoietikus sejtek szaporodnak és nagy sejtek bazofil citoplazmában. Ugyanakkor talál egy képet a mély és cytolysissel dystrophiában limfopoietikus szervek.
Ha úgy gondolja, a pestis diagnózis több súlyosan beteg állatot ölnek, és megvizsgálta kenetet csontvelőből a mellkasát.
Biológiai vizsgálat. A sikeres kezelése a fertőző betegségek szed malacok év 2-3 hónap, súlya 20-30 kᴦ. Mivel az anyag 10% -os szuszpenziót készítünk a szervek (ült ?? ezenki, nyirokcsomók, csontvelő) vagy a vér a leölt állatok. A szuszpenziót antibiotikummal kezelt, tartjuk legalább 4 órán át 4 ° C-on centrifugáltuk, a folyadékot nuzhnosadochnuyu fertőzésére használjuk állatok. Három rosyatam subcutan 1 ml vért vagy 2 ml szuszpenzió szervek. Két állat oltottuk a vizsgálandó anyag nem tartalmaz külön-külön ellenőrzésre. Két-sertés van immúnis CSFV, beadagoljuk a vizsgálandó anyagot ugyanabban a dózisban, azzal a céllal,-Hoc differenciáldiagnózis elleni ASF. A Sun ?? EMI állatokat 21 napig megfigyeltük, és a sündisznó napos mérni a testhőmérsékletet.
Diagnózis pozitívnak tekintjük, ha 2-ből 3 nemimmun beteg malacok, pro-megnyilvánuló a betegség tüneteit, és meghal, míg a 2 egészséges maradt, vagy immun mutatnak kisebb és a rövid távú (1-4 nap), jelei gyenge intenzitás a betegség (láz nem fölött 41 ° C-on). Meg kell jegyezni, hogy ennek hiányában a reakció-nyek a fogékony állatok vagy abban az esetben elegendő súlyossága nem lehet kizárni bizonyossággal a vírus jelenlétét a vizsgálati anyag. Negatív-nek a fertőzés eredményeként eredményének kell lennie a túl kis mennyiségű vírus, vagy egy gyenge virulencia az utóbbi. Emiatt, a következő lépést megismételjük, miután után 3-6 héttel a beoltás a vizsgált anyag, a fertőzés (újrafertőződés) tengerimalac ?? s ebben az időben egy ismert vírus ismert virulencia. Hiánya-következmény állatok reakció ez a szennyeződés jelzi a megszerzése Immuno-theta eredményeként az első oltás (tünetmentes perebolevaniya) és közvetve jelzi a vírus jelenlétét a vizsgált anyag. Ezzel párhuzamosan a második mintát beoltjuk két további fogékony sertések (kontroll) vírusok használó-fürdőszoba az újrafertőződés.
Előfordul, hogy a biológiai mintát nem indokolt, vagy hogy homályos eredményt, ha ?? del enii vírustörzsek okozó enyhe lefolyású betegség. Az ilyen törzseket oltott sertés okozhat krónikus betegségek. Az ügyet bonyolítja az a tény, hogy a virulens törzs, gyenge lehet, hogy nem immunizáló tulajdonságait, de nem kíván létrehozni OAPC-pontos diagnózis segítségével további kihívást jelent a Viru-vegyértékű törzs (újrafertőződés). A diagnózis a betegség okozta ezeket a törzseket a ponuzhnobitsya fiatal állatok, és a kiegészítő még fokozza virulencia.
Javasolt körű értékelését virulencia területén törzsek CSFV:
- slabovirulentnye (csak patogén szopósmalacokat) nem immunizáló törzsek. Malacok szopós beteg az első nap az élet és a halál a nagy elválasztott malacok (12-15 kg) reagálnak csak az határozza ?? ennye napon testhőmérséklet emelkedése, nem megszerzése immunitás;
- slabovirulentnye (kórokozó a fiatal állatok számára) immunizáló törzsek. Állatok súlya 15-20 kg fejleszt egy krónikus betegség, emse tömegű 35 kg körte ruyut testhőmérséklet emelkedése, hogy több napon át tartott. A megnyitón az érzékelés-alive kis pontszerű vérzések. Állatok szerezni mentességet
- erősen virulens törzsek okoznak állatok súlya 30 kg akut megbetegedés a halálozási arány 40% vagy több. A boncolás során jellegzetes vérzéses változásokat.
Test moduláció a makrofágok fagocita-aktivitását. Deficiency fagocita funkció vezet zavar a helyi immunrendszer reakciók a gyulladásos folyamatok-TION a nyálkahártyákat. Amikor CSF történik lokalizációja a fagocita leukocita funkciók a reprodukció vakcina egységek. LK-VNIVViM csökkentett százalékos és fagocita indexe neutrofilek és a makrofágok, és a reprodukció a virulens vírus pc. Chi-Myn százalékos növekedést és index fagocitózisát neutrofilek és csökkentette a makrofágok. Amikor CSF in vivo és in vitro fagocitaaktivitása vér leukociták rövid idő (legfeljebb 4 napig) csökken a fertőzés során, és vakcina törzs növekszik makrofágokban fertőzés által egy virulens törzsével CSFV. Szerelt in infitsi Rowan-célsejtek citopátiás hatás kifejezett fagocita-moduláló aktivitásának tárálásához sertés makrofág CSF diagnózisban alkalmazott.
lásd még
RN. A diagnózis a fertőzés az elmúlt általában fel a pH-kultúra ragasztó-áram meghatározásához VNA titerek szérumában lábadozók. Erre a célra, az álló vírusdózist (100-1000 TCD 50) és két-szeres hígítású vizsgálandó szérummal előzőleg. [További információ].
Retrospektív diagnózis határozza meg a típusát és változatát mérlegcella, ami az utolsó állatbetegség alapuló azonosítása AT RPSK, RDP és RRID, NRIF reakció szeroprotekciós ráta az egerek és a pH-tenyészetből. A megbízható kimutatására AT és meghatározza típusai. [További információ].
Jelenleg három módszer Detect zheniya-specifikus AT a CSFV laboratóriumi diagnosztikai CSF: a reakcióelegyet semlegesítjük fluoreszcens mikroblya-nis (RNFB) reakció közvetett IF és közvetett ELISA variáns. A leghatékonyabb módszer. [További információ].