A modern módszerek laboratóriumi diagnosztika
A választás a laboratóriumi vizsgálatok
Az alapot a mikrobiológiai diagnózis fertőző betegségek make-scopic mikroszkópia, mikrobiológiai, biológiai, szerológiai és allergológiai technikákat.
Mikroszkópos módszerek közé tartozik az előállítására kenetek és készítmények mikroszkópiai. A legtöbb esetben mikroszkópos leletek orientálható rovochny-karakter (például, hogy meghatározzuk az arány a színezőanyagok), mint a beállított-Gia mikroorganizmusok megfosztott színező és morfológiai jellemzői. Azonban, az anyag lehet a mikroszkópos vizsgálatok alapján bizonyos morfológiai jelei rev-Leu (jelenlétében magok flagellumok intracelluláris zárványok, stb), és azt is, hogy létrehozza a jelenléte vagy hiánya a mikroorganizmusok az elküldött mintákban.
Mikrobiológiai módszerek - a „arany standard” a mikrobiológiai diagnózis, mivel az eredmények a mikrobiológiai vizsgálatok pontosan megállapítani azt a tényt, a Nali-kórokozó-lét az anyagban. Azonosítása tiszta tenyészeteket (a mikroorganizmus faj) végzett tekintve morfológiai, színező, kulturális, biohimiches-cal, toxikus és antigén tulajdonságait a mikroorganizmus. A legtöbb kutatás magában foglalja érzékenység meghatározására, hogy az antimikrobiális szerek megalázottság. Járványügyi szerepének értékelése a mikroorganizmus végezzük fajon belüli azonosítása bizonyos fagovarov, biovars stb rezistentvarov
Biológiai módszerek annak meghatározására irányul, a jelenléte a kórokozó az anyagban a toxinok és a kórokozó kimutatására (különösen, ha a forrás tartalmaz kis-Zhaniya a mintában). A módszerek közé tartozik a fertőzés a laboratóriumi állatok közvetlen-vizsgált anyagot és az ezt követő elkülönítési a tiszta tenyészet egy patogén vagy a megállapítás a jelenléte mikrobiális toxin és annak természete. Szimulációs kísérleti fertőzések fogékony állatok - egy fontos eszköz a tanulás patogenézisében Zabolev-CIÓ és a természet kölcsönhatás a rendszeren belül mikroorganizm- makro-szervezetet. Töltsön betétek biológiai mintákban, csak egészséges állatok bizonyos korától és testsúlyától. Fertőzés anyagot vezetünk belsejében a légutak, intraperitoneálisan, vnut-Riven, intramuszkulárisan, intradermálisan és szubkután elülső kamrájába a szem, egy fúrt lyukat a koponyán keresztül, szubokcipi-táiis (a legtöbb agyi öblítőtartály). Az állatok veszi vivo vér, váladékok a hashártya, a halál után - vér, darab különböző szervek, CSF, váladék a különböző üregek.
Szerológiai módszerek kimutatására specifikus AT és Ar kórokozó - fontos műszere-MENT diagnosztikájában a fertőző betegségek. Különösen értékesek azok azokban az esetekben, amikor a kórokozó nem lehetséges. Ezért szükséges meghatározni az Vyshen AT-titer, ami miatt a vizsgált minták párosított sera hozott 10-20 napig (néha ez az időköz hosszabb lehet). AT rendszerint megjelennek a vérben 1-2-ik héten a betegség, és kering a szervezetben viszonylag hosszú, hogy szeretné beállítani OAPC-használja őket azonosítására retrospektív epidemiológiai vizsgálatok. Op-meghatározás Ig osztályok egyértelműen jellemzi a lépcsőn a fertőzési folyamat, és szintén közvetve SLE-live előrejelzője. Különösen relevánsak olyan módszerek detektálására mikro-Ar részletesen. Jelentős számban, úgy tűnik, a legkorábbi időzítés, ami számukra fontos eszköze azonosítására gyors diagnózis a fertőző betegségek és azok mennyiségi meghatározása a dinamika a fertőző folyamat biztosítja hatékonyság mércéje-ság folyamatos antibiotikumos kezelés.
Ar számos patogén mutatnak érzékenyítő hatása, mellyel a diagnózis - diagnózis a fertőző betegségek, valamint az epidemiológiai vizsgálatokban-CIÓ. A legszélesebb körben talált kután allergia vizsgálatokat, beleértve intradermális Ar (allergén) a fejlődés a DTH reakció. Skin teszteket alkalmaztak már betegségek diagnosztizálására, mint a takonykór, melioido-sis, brucellózis. A legtöbb ismert Mantoux teszt használható diagnózis tuberkulózis és szervezetek értékelésére immunitás a kórokozó-ma.
A módszer alapja a PCR által katalizált DNS-polimeráz, több példányban specifikus DNS képződését része. Kezdetben végzett lágyítás - termikus elválasztása kettős szálú DNS-molekulák külön láncokat. A tápközeget ezután lehűtjük, és bevezetett primerek (primerek) komplementer nukleotid szekvenciák mindkét lánc. A reakció elindításához alkalmazott szintetikus primerek - egy olyan oligonukleotid, amely 10-20 nukleotidok (például, dezoxinukleotid-trifoszfátok) kölcsönhatásban megszüntetésére és alkotó egymást követő szekvenciát bázisok 50-1000. Ezután, a közepes-ter teszik mostabilnuyu Taq-polimeráz (elemzi a baktérium Thermus aquaticus), amely kiváltja a szekunder példányban a DNS-szálak, majd az így kapott kettős szálú DNS-molekula ismét melegítjük. A kapott egyláncú lehűtjük, primerek és bevezette megismételjük fűtési és hűtési eljárást; Taq-polimeráz hőstabil, hogy szükség van a ismételt bevezetése hiányzik. PCR lehetővé teszi, hogy nagy mennyiségben kapjunk a vizsgált DNS-fragmens, akkor is, ha a rendelkezésére álló kutatók csak egy molekula az eredeti genom DNS-t. Azonosítása példányban a DNS végzi elektroforézissel. A PCR-eljárással is az alapja a DNS azonosítására, szülőktől emberek gének azonosítására, és más genetikai betegségek.
69. Az antigén-prezentáló sejtek: típusok, szerepet kialakulását a celluláris és humorális immunválasz.
antigénprezentáló sejtek (APC) - mononukleáris fagocita rendszer sejtek (monociták, makrofágok, Kupffer-sejtek, Langerhans-sejtek, dendritikus sejtek), és a B-limfociták, befolyásolni képes proteolízis az exogén és endogén fehérje antigének, így a képződését peptidek. Legutóbbi kötődnek citoplazmájában molekulák komplementer szálaival I vagy MHC-II, szállítják a sejtmembránon, és ki vannak téve a felszínén, ahol által felismert T-helper vagy T-ölősejtek keresztül antigén receptorokat.
Az antigén-prezentáló sejtek (A-alrendszer) pre-imushchestvenno jelen van a bőrön, a nyirokcsomók, a lép és a csecsemőmirigy. Ezek otno-syatsya makrofágok, dendritikus sejtek, follikuláris sejtek Process Lim fouzlov és a lép, Langerhans-sejtek, M-sejtek a nyiroktüsz az emésztőrendszer, epiteliális sejtek a csecsemőmirigyben. Ezek a sejtek felvenni, feldolgozni és a jelen Ag (epitóp) a felületén más immunkompetens sejtek, IL-11, más citokinek, szekretálnak prosztaglandin E2 (PGE2), lehangoló impulzusok ny választ. Fagocitáló és a citolitikus aktivitás-fokozó egy makrofág # 947; IFN.
A dendritikus sejtek származnak csontvelőt és alkotnak lakossága ház életű sejtek kezdeményezi és módosítják az immunválaszt. Vkostnom csontvelő azok prekurzorait képezve szubpopuláció CD34 + sejtek, amelyek képesek differenciálódni Langerhans sejtek a epiteliális és a dendritikus sejtek a belső környezet. Éretlen és nedelyashiesya dendritikus sejt prekurzorok megtelepedni sok szöveteket és szerveket. Ln ferentsirovku dendritikus sejtek fenntartását koloniestimuliruyushy faktor és a granulocita makrofág GM-CSF és IL-3. A dendritikus sejtek általában csillag alakú, és képes elviselni a felfekvő felületétől képest kisszámú MHC-molekulák. Ezzel szemben, Langerhans-sejtek, interstitialis dendritikus sejtek képesek serkenteni a szintézisét Ig B-limfociták. Minden dendritikus sejtek először írja be a csecsemőmirigy-függő terület perifériás limfoid szervek, amelyek érik az úgynevezett interdigitiruyuschie sejtekben.
70. A makrofágok: hisztogenezisében, a funkcionális jellemzők, fontos szerepet játszanak.
makrofágokági (ógörög. # 956; # 945; # 954; # 961; # 972; # 962.; - a nagy és # 966; # 940; # 947; # 959; # 962; - evő (szinonimák: gistiotsit-makrofág gistofagotsit, makrofagotsit, megalofag evő)) polyblasts, mesenchymalis sejtek az állati szervezetben jellegét képesek aktívan beborító és emésztés baktériumok maradékok az elpusztult sejtek és más idegen részecskék vagy toxikus a szervezetre. A „makrofág” lépett Mechnikov.
Ahhoz, hogy végezze a vér monociták a makrofágok, hisztiociták kötőszövetek, endoteliális sejtek, a kapillárisok vérképző szervek, a máj Kupffer-sejtek, a falak a tüdő alveolusok sejtek (tüdő makrofágok) és a fal peritoneum (peritoneális makrofágok).
Megállapítást nyert, hogy az emlősökben makrofág progenitor képződnek a csontvelőben. Aktív tulajdonságok is fagocita sejtek hematopoetikus szövet retikuláris szervek joinable makrofágokhoz a retikuloendoteliális (makrofagicheskuyu) rendszer, amely elvégzi a védelmi funkció a szervezetben.
A fő típusa a mononukleáris fagocita rendszer sejtekben. Ez a nagy (10-24 mikron) hosszú élettartamú sejtek jól fejlett, és lizoszomális membránon berendezésben. A felületükön receptorok Fc-fragmense IgGl és IgG3, C3b-fragmens C receptor B- és T-limfociták, komplement, és más interleukinek hisztamin.
Valójában, ez lesz a makrofág monocita, amikor elhagyják a véráramba, és a szövetekbe.
Attól függően, hogy milyen típusú szöveti makrofágok a következő típusú.
· Histiocyták - makrofágok kötőszövet; eleme a retikuloendoteliális rendszer.
· Kupfer sejtek - vagy endothel májcsillagsejtek.
· Alveoláris makrofágok - egyébként, a por ketrecben; található az alveolusok.
· Epithelioid sejtek - alkatrészek granuloma.
· Az osteoclastok - magú sejtek részt vesznek a csontreszorpciót.
· A mikroglia - központi idegrendszeri sejtek, amelyek elpusztítják a neuronok és abszorbeáló fertőző ágensek.
A makrofágok tartalmaznak számos citoplazmatikus enzimek és azonosítani lehet a szövetekben hisztokémiai módszerekkel, amelyek kimutatására ezeket az enzimeket. Egyes enzimek, mint például a Muramidáz (lizozim) és kimotripszin lehet kimutatni jelölt antitest (immunhisztokémia), amely felhasználja elleni antitestek fehérjék az enzim. Az ilyen monoklonális antitestek ellen, különböző CD-antigének széles körben használják azonosítása makrofágok.
makrofág funkciók közé tartozik a fagocitózis, a „kezelés” antigéneket és kölcsönhatás citokinek.
· Nem immun fagocitózis makrofágok fagocitáljanak idegen részecskék, mikroorganizmusok és maradványai a sérült sejtek nélkül, közvetlenül az immunválasz hívást. Azonban, fagocitózis és megölése mikroorganizmusok nagy mértékben elősegíti a jelenléte specifikus immunglobulinok, kiegészítik és limfokineket immunológiailag aktivált T-limfociták.
· Immune fagocitózis makrofágok felületi receptoraival C3b és az Fc-fragment az immunglobulinok. Bármilyen részecskéket, amelyek be vannak vonva immunglobulin vagy komplement (opszonizált) befogják jelentősen könnyebb, mint a „csupasz” részecskék.
· „Processing” antigének makrofágok „kezelt” antigéneket, és ezeket B- és T-limfociták az előírt formában; Ez a sejt kölcsönhatás magában foglalja az egyidejű elismerése limfociták és MHC-molekulák „feldolgozott antigén”, található, a makrofágok felszínén.
· Kölcsönhatás citokinek makrofágok kölcsönhatásba által termelt citokinek T-limfociták, hogy megvédje a testet a bizonyos károsító szerekkel. Egy tipikus E kölcsönhatás eredményeként - a granulomák. A makrofágok is citokineket termelnek, beleértve az interleukin-l, b-interferon és a növekedési faktorok T- és B-sejtek. Különböző kölcsönhatása limfociták és makrofágok a szövetekben morfológiailag megnyilvánuló krónikus gyulladás.
A szerepe makrofágok nem korlátozódik az IL-1. Ezekben a sejtekben szintetizált számos biológiailag aktív anyagok, amelyek mindegyike hozzájárul a gyulladást. Ezek közé tartoznak: észteráz, proteáz és antiproteáz; lizoszómális hidroláz - kollagenáz, alastaza, lizozim, # 945; makroglobulin; monokinek - IL-1, kolónia stimuláló faktor, egy faktor növekedésének elősegítésére fibroblasztok; fertőzés elleni szerek - interferon, transzferrin, transzkobalamin; komplement komponensek: C1, C2, NW, C4, C5, C6; az arachidonsav származékai: prosztaglandin E2, a tromboxán A2, a leukotriének.